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公开(公告)号：CN108254460B
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN201711462268.7
申请日：2017-12-28
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种检测大蒜根系分泌物中硫醚类化合物的方法，该方法将硫醚类化合物标准品配制成梯度浓度的标准品溶液，用乙酸乙酯萃取、旋转蒸发浓缩后用正己烷复溶，采用GC‑MS方法进行检测，得到不同浓度标准品溶液的GC‑MS谱图，绘制标准品溶液浓度和GC‑MS谱图对应峰面积的最佳拟合曲线，将待测根系分泌物GC‑MS谱图中对应组分的峰面积代入所述最佳拟合曲线公式，即可计算出其在根系分泌物中的浓度。本发明采用硫醚类化合物收集效率最高的收集方法以及损失最低的浓缩方法，并通过气相色谱‑质谱联用仪检测硫醚类化合物，进一步优选采用标准品添加回收的方法消除浓缩过程目标组分损失所产生的影响，可以实现对大蒜根系分泌物中硫醚类化合物的精确定量。
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公开(公告)号：CN108037232B
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN201711461650.6
申请日：2017-12-28
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种检测土壤中硫醚类化合物的方法，该方法采用气相色谱‑质谱联用方法对待测土壤溶液中的硫醚类化合物进行检测；所述待测土壤溶液采用包括如下步骤的方法制备得到：将待测土壤分散放置在封闭器皿中，所述封闭器皿的顶部与装有吸附树脂的样品管以及排空管分别相连；打开位于所述样品管另一端的气泵，使所述待测土壤中的硫醚类化合物充分挥发并吸附于样品管内的吸附树脂上，再用正己烷淋洗所述吸附树脂，收集淋洗液，浓缩，即得用于后续气相色谱‑质谱检测的待测土壤溶液。本发明提供的方法可用于检测大部分含有硫醚类化合物的土壤，优选适用于检测大蒜根际土壤。本发明提供的方法得到的检测结果准确可靠，具有很强的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN110819583A
公开(公告)日：2020-02-21
申请号：CN201810912845.6
申请日：2018-08-10
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明属于微生物技术领域，具体公开了一种大豆疫霉菌的产孢培养方法。本发明在菌丝生长完成后加入液体培养基寡营养摇培步骤，使菌饼在10％液体V8培养基中培养，菌丝生长在寡营养状态会受到抑制，进而刺激生殖生长有利于游动孢子囊的产生。进一步通过寡营养阶段摇培结合灭菌水冲洗和土壤浸提液诱导，实现了V8培养基上大豆疫霉菌的大量产孢，孢子量达到2×105个/mL，产孢效果和稳定性都远高于现有技术公开的方法。
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公开(公告)号：CN106577657A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611114645.3
申请日：2016-12-06
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种利用外源添加抗坏血酸缓解三七自毒物质损伤的方法，属植物保护技术领域。该方法的具体技术方案是：利用浓度为0.1～50.0mg/L的L‑抗坏血酸溶液对三七种子进行浸种处理；或将L‑抗坏血酸溶解于种衣剂适乐时中配制成含有浓度为50.0～2500.0mg/L的L‑抗坏血酸种衣剂，然后对三七种子进行包衣处理；或利用浓度为0.1～50.0mg/L的L‑抗坏血酸溶液对种苗进行浸根处理。本发明的有益效果在于：通过外源添加抗坏血酸的方法，增强了三七的抗性，降低了三七生长过程中由于自毒物质导致的细胞伤害从而加大根腐病菌危害的机率，减少了农药的使用量，是一种生态、安全、有效地缓解连作障碍的措施。
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公开(公告)号：CN106577649A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611112116.X
申请日：2016-12-06
Applicant: 云南农业大学
IPC: A01N25/32
CPC classification number: A01N25/32
Abstract: 一种利用草酸缓解三七自毒伤害的方法，具体为：用含有体积百分比0.01％吐温80的去离子水配制浓度为0.1～5.0mg/L的草酸溶液，三七播种或移栽后7d灌根处理一次；待三七种子萌发率达到10％后再用相同浓度的草酸溶液连续浇灌3次，每次间隔7天；每棵三七灌根量为5mL。本发明的有益效果在于：补充了由于皂苷类自毒物质导致的三七根际抗氧化物质草酸降低带来的氧自由基清除能力下降的问题，提高了三七种子和种苗的出苗率和生长势，增强了三七的抗性，降低了三七生长过程中由于自毒物质导致细胞的伤害从而加大根腐病菌危害的机率，减少了农药的使用量，是一种生态、安全、有效的缓解连作障碍的措施。该方法对提高三七品质、降低农药残留具有重要的意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105699511A
公开(公告)日：2016-06-22
申请号：CN201610048009.9
申请日：2016-01-25
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明涉及一种快速检测玉米组织中三种苯并噁嗪类防御物质的方法，属植物化学分析领域。方法为：取玉米的根或叶片于液氮中磨至粉末状，置于15mL预先加入5mL乙酸乙酯的样品管，混匀后放置60min，期间混匀3次；室温的萃取液在振荡器上涡旋震荡2分钟呈悬浮状；悬浮液经滤纸过滤于100mL心形旋蒸瓶中，用5mL乙酸乙酯冲洗2次，共15mL滤液；滤液于40℃旋蒸5min至干燥状，后用500μL甲醇溶解后置于1mL样品瓶中，密封保存于-80℃；采用Agilent1200高效液相色谱仪和Extend C18 100×4.6mm色谱柱进行检测。本发明的有益效果在于：能较真实地反应玉米植株体内DIMBOA的含量；能同时检测玉米根系或叶片组织提取物中DIBOA、DIMBOA和MBOA的含量，减少了色谱试验步骤和时间，是一种简便有效的方法。
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公开(公告)号：CN102960147B
公开(公告)日：2014-05-07
申请号：CN201210485048.7
申请日：2012-11-16
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种以沸石替代钾肥施用的三七育苗方法，育苗基质组成如下：将沸石、生土和有机肥按照体积比5∶3∶2的比例混合后作为育苗基质；所述的沸石为天然沸石，将采集的天然沸石粉碎过筛，粗细度不超过1mm，作为基质配料备用；所述有机肥为象草(又名紫狼尾草)经粉碎，加水堆沤，1个月后，按体积比加入10％的鸡粪，拌匀，再加水，覆膜，继续堆沤，每半个月翻堆一次，6个月后，凉干，过孔径为1cm的筛子，备用；所述生土为从未中过三七的田块中去除耕作层土壤50cm后取出的土壤，过孔径为1cm的筛子，备用。该方法既能充分利用当地资源，减少钾肥的投入，又能改良三七种植土壤，有利于三七种植业的健康发展。
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公开(公告)号：CN102643776B
公开(公告)日：2013-09-04
申请号：CN201210091253.5
申请日：2012-03-31
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种以萝卜为原料制作适宜恶疫霉菌产生孢子囊的培养基，具体制作方法为，取100-200克萝卜，切碎后于0.5L水中煮沸30分钟过滤，滤液中加入15g琼脂，加热使琼脂融化后定容至1升，分装后以0.103MPa、121C、高压蒸气灭菌20min；将灭菌培养基到入灭菌的9cm直径培养皿中制成平板，冷却后用直径5mm的打孔器在已培养3d的菌落边缘打取菌块接种于培养基上。将接种后的培养皿置于25℃下黑暗培养10天后便产生大量孢子囊。减少了利用水培法诱导产生孢子囊的操作过程中污染的几率。该培养基原材料成本低廉且容易获取，培养基的制作和孢子囊产生的程序简单易学。
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公开(公告)号：CN102643892A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210078708.X
申请日：2012-03-23
Applicant: 云南农业大学
IPC: C12Q1/18
Abstract: 本发明公开了一种用于植物霜霉病菌抗药性频率监测的方法，步骤为：A1、在待监测区域采集霜霉病病样，带回室，在19℃下黑暗培养诱导产生新的孢子囊；A2、将所有采集病叶上的新生孢子囊洗脱并混合制成孢子囊悬浮液；A3、分别将孢子囊悬浮液用液滴法接种健康离体植物叶片制成的叶碟背面，叶碟事先用无菌水浸泡30分钟和2×(待侧杀菌剂最小抑制浓度)药液浸泡30分钟；A4、将接种叶蝶置于吸水纸保湿的培养皿中，保湿培养；A5、测算抗药性菌株的频率。该方法简单易学，容易操作，对实验仪器要求不高，且能较准确地反映田间霜霉病菌群体的抗药性情况，具有较高的实际应用价值。
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公开(公告)号：CN102643776A
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201210091253.5
申请日：2012-03-31
Applicant: 云南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种以萝卜为原料制作适宜恶疫霉菌产生孢子囊的培养基，具体制作方法为，取100-200克萝卜，切碎后于0.5L水中煮沸30分钟过滤，滤液中加入15g琼脂，加热使琼脂融化后定容至1升，分装后以0.103MPa、121C、高压蒸气灭菌20min；将灭菌培养基到入灭菌的9cm直径培养皿中制成平板，冷却后用直径5mm的打孔器在已培养3d的菌落边缘打取菌块接种于培养基上。将接种后的培养皿置于25℃下黑暗培养10天后便产生大量孢子囊。减少了利用水培法诱导产生孢子囊的操作过程中污染的几率。该培养基原材料成本低廉且容易获取，培养基的制作和孢子囊产生的程序简单易学。
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