一种快速检测玉米组织中三种苯并噁嗪类防御物质的方法

    公开(公告)号:CN105699511A

    公开(公告)日:2016-06-22

    申请号:CN201610048009.9

    申请日:2016-01-25

    Abstract: 本发明涉及一种快速检测玉米组织中三种苯并噁嗪类防御物质的方法,属植物化学分析领域。方法为:取玉米的根或叶片于液氮中磨至粉末状,置于15mL预先加入5mL乙酸乙酯的样品管,混匀后放置60min,期间混匀3次;室温的萃取液在振荡器上涡旋震荡2分钟呈悬浮状;悬浮液经滤纸过滤于100mL心形旋蒸瓶中,用5mL乙酸乙酯冲洗2次,共15mL滤液;滤液于40℃旋蒸5min至干燥状,后用500μL甲醇溶解后置于1mL样品瓶中,密封保存于-80℃;采用Agilent1200高效液相色谱仪和Extend C18 100×4.6mm色谱柱进行检测。本发明的有益效果在于:能较真实地反应玉米植株体内DIMBOA的含量;能同时检测玉米根系或叶片组织提取物中DIBOA、DIMBOA和MBOA的含量,减少了色谱试验步骤和时间,是一种简便有效的方法。

    一种快速检测玉米组织中三种苯并噁嗪类防御物质的方法

    公开(公告)号:CN105699511B

    公开(公告)日:2017-07-28

    申请号:CN201610048009.9

    申请日:2016-01-25

    Abstract: 本发明涉及一种快速检测玉米组织中三种苯并噁嗪类防御物质的方法,属植物化学分析领域。方法为:取玉米的根或叶片于液氮中磨至粉末状,置于15mL预先加入5mL乙酸乙酯的样品管,混匀后放置60min,期间混匀3次;室温的萃取液在振荡器上涡旋震荡2分钟呈悬浮状;悬浮液经滤纸过滤于100mL心形旋蒸瓶中,用5mL乙酸乙酯冲洗2次,共15mL滤液;滤液于40℃旋蒸5min至干燥状,后用500μL甲醇溶解后置于1mL样品瓶中,密封保存于‑80℃;采用Agilent1200高效液相色谱仪和Extend C18 100×4.6mm色谱柱进行检测。本发明的有益效果在于:能较真实地反应玉米植株体内DIMBOA的含量;能同时检测玉米根系或叶片组织提取物中DIBOA、DIMBOA和MBOA的含量,减少了色谱试验步骤和时间,是一种简便有效的方法。

    一种从微量辣椒疫霉菌游动孢子中提取RNA的方法

    公开(公告)号:CN105754989A

    公开(公告)日:2016-07-13

    申请号:CN201610047920.8

    申请日:2016-01-25

    CPC classification number: C12N15/1003

    Abstract: 本发明涉及一种从微量辣椒疫霉菌游动孢子中提取RNA的方法,属于分子生物学领域。从微量辣椒疫霉菌游动孢子中提取RNA的具体步骤如下:首先含有RNase抑制剂的DEPC水裂解辣椒疫霉孢子囊,4℃,18000g离心5min收集5000个游动孢子;加入1mL Trizol、1μLβ巯基乙醇,1μL RNase抑制剂,剧烈斡旋1min后超声波处理5min;加入200μL氯仿剧烈斡旋,室温静置15min,4℃,12000g离心15min,取上层水相;加入500μL异丙醇,上下反转5?10次,加2μL糖原和1μLRNase抑制剂,于?20℃过夜放置12h;剧烈斡旋于4℃,12000g离心15min后弃上清,用1mL 75%乙醇洗涤2次;沉淀室温干燥10min后,用10μL DEPC水溶解。本发明的有益效果在于:减少了RNA降解,有效富集了RNA,为从微量辣椒疫霉游动孢子中取RNA提供了一种有效方法。

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