工程化的Cas12i核酸酶及其效应蛋白以及用途

    公开(公告)号:CN115851665B

    公开(公告)日:2025-01-24

    申请号:CN202211325001.4

    申请日:2021-05-27

    Abstract: 本申请提供了一种工程化的Cas12i核酸酶;其包含一种、两种、三种或四种以下基于参比Cas12i核酸酶的突变:(1)将参比Cas12i核酸酶中与PAM相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸;和/或(2)将参比Cas12i核酸酶中参与打开DNA双链的一个或多个氨基酸替换为带芳香环的氨基酸;和/或(3)将参比Cas12i核酸酶中位于RuvC结构域并与单链DNA底物相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸;和/或(4)将参比Cas12i核酸酶中与DNA‑RNA双螺旋相互作用的一个或多个氨基酸替换为带正电的氨基酸;尤其所述参比Cas12i核酸酶为天然Cas12i核酸酶,例如天然Cas12i2核酸酶,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所定义。

    一种将非神经元细胞转化为神经元细胞的方法

    公开(公告)号:CN111471653B

    公开(公告)日:2022-11-25

    申请号:CN202010322427.9

    申请日:2017-03-01

    Abstract: 本发明提供了将非神经元细胞转分化为神经元细胞的方法,包括用细胞骨架蛋白小分子抑制剂处理,用小干扰RNA(siRNA)对胞外基质‑骨架系统的特定基因表达敲低处理,对胞外基质低粘附处理并定向分化培养。小分子抑制剂选自肌球蛋白抑制剂和/或肌动蛋白组装抑制剂。对胞外基质低粘附处理选自悬浮培养。siRNA敲低选自对以下至少一种胞外基质‑骨架系统中基因表达敲低:rock1、rock2、mrlc1、mrlc2、mrlc3、myh9、myh10、mrckα、mrckβ、lamina/c、lmnb1、lbr、sun1、sun2、cbx1、cbx3、cbx5、banf1、syne1、syne2、β‑actin。

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