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公开(公告)号:CN101993888A
公开(公告)日:2011-03-30
申请号:CN200910091766.4
申请日:2009-08-25
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
Abstract: 本发明提供一种在酵母系统中诱导表达重组葎草花粉主要致敏蛋白Hum j 3的方法,包括:构建表达SEQ ID NO.2所示氨基酸序列的重组表达载体;线性化重组表达载体,转化感受态酵母细胞;筛选阳性克隆,得重组菌株,并扩大培养;重组菌株的诱导表达以及筛选:Hum j 3蛋白在酵母中以α-factor信号肽蛋白引导的分泌表达;以高活性的重组菌株为种子菌进行高密度的诱导表达重组Humj 3蛋白;收集培养上清并分离纯化Humj 3。本发明首次在国际上确证了葎草主要致敏蛋白的全基因序列,并首次成功进行了酵母分泌表达,且证实了该重组蛋白具有免疫活性,为葎草花粉过敏患者的分子诊断和临床免疫治疗提供了全新的蛋白。
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公开(公告)号:CN101988928A
公开(公告)日:2011-03-23
申请号:CN200910090769.6
申请日:2009-08-06
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一种用于Hum j3检测的夹心ELISA试剂盒,其通过天然葎草花粉纯化主要致敏蛋白Hum j3的制备、小鼠杂交瘤单抗的制备和筛选、夹心ELISA方法两种单抗的选择、夹心ELISA方法试验条件的确定、夹心ELISA方法敏感性、特异性、线性范围、稳定性等方法学指标的确定等步骤建立夹心ELISA法。本发明试剂盒包括该方法的运用包括:捕捉抗体和检测抗体,所述捕捉抗体包被于酶标板中,所述检测抗体为酶标记抗体,所述捕捉抗体和检测抗体分别特异性地针对Hum j3的不同抗原决定簇。本发明在临床实践、变应原制药工业生产、质控与新药研发、气候与环境中Hum j3含量监测与预报中有重要的运用价值。
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公开(公告)号:CN101392023A
公开(公告)日:2009-03-25
申请号:CN200710122176.4
申请日:2007-09-21
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
IPC: C07K14/415 , C07K16/18
Abstract: 本发明公开了葎草花粉主要致敏蛋白,该蛋白可从葎草花粉中分离获得,其能与89%以上葎草花粉过敏病人血清特异性IgE结合,经SDS-PAGE测定其表观分子量约为12kDa,等电点为4.7,N端序列为:NH4+-MDNPFENGMKA-COO-。该蛋白的分离纯化为其变应原制剂标准化的实现奠定了基础。
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公开(公告)号:CN110078803B
公开(公告)日:2022-08-05
申请号:CN201910204888.3
申请日:2019-03-18
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
IPC: C07K14/415 , C07K1/14 , A61K39/36 , A61K9/19 , A61K49/00 , A61P37/08 , A61P11/06 , A61P11/02 , A61P17/00
Abstract: 本发明提供了本发明涉及一种洋白蜡花粉变应原浸液物、其浸液及其制备方法。该洋白蜡花粉变应原浸提物,其中含有洋白蜡花粉变应原蛋白如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。该浸液经洋白蜡花粉收集、干燥、脱脂、提取、超滤浓缩、冷冻干燥、复溶等工艺方法制得,其主要组分为洋白蜡花粉变应原、甘油、氯化钠、苯酚等。该洋白蜡花粉变应原浸液具有特异性高的特点,洋白蜡致敏蛋白组分提取充分,总生物效价稳定,有效期长,无菌效果好;其原液可有效用于变态反应疾病的皮肤点刺试验诊断、经适当稀释后可用于体外嗜碱性粒细胞活化试验诊断及特异性免疫治疗,可有效诊断由洋白蜡花粉诱发的变态反应疾病并对其进行特异性免疫治疗。
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公开(公告)号:CN108129558B
公开(公告)日:2021-10-12
申请号:CN201711395712.8
申请日:2017-12-21
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
Abstract: 本发明提供了一种桦树花粉主要致敏蛋白Bet v 8的提取和分离纯化方法及应用。所述Bet v 8的提取方法包括使用pH 4.5的醋酸盐缓冲液作为提取液对桦树花粉致敏蛋白进行提取,所述的分离纯化方法包括先制备桦树花粉水溶蛋白提取液,随后通过阳离子交换层析和Con A琼脂糖凝胶4B层析进一步分离纯化,最终获得纯化的主要致敏蛋白Bet v 8。本发明所制备的提取液或纯化蛋白可用于患者血清样品中主要致敏蛋白的检测,同时还可进一步制备成过敏原检测试剂或脱敏制剂,在提高桦树花粉的皮试阳性率及脱敏疗效方面具有广泛应用。
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公开(公告)号:CN110201188B
公开(公告)日:2021-08-03
申请号:CN201910440773.4
申请日:2019-05-24
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
Abstract: 本发明提供了本发明涉及一种地肤花粉变应原浸提物、其浸提液及其制备方法,地肤花粉变应原浸提物其含有致敏蛋白Koc S1’,其含有如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。该地肤花粉变应原浸液,其含有治疗有效量或诊断有效量的地肤花粉变应原。该浸液还可经地肤花粉收集、干燥、脱脂、提取、超滤浓缩、冷冻干燥、复溶等工艺方法制得。该地肤花粉变应原浸液具有特异性高的特点,地肤致敏蛋白组分提取充分,总生物效价稳定,有效期长,无菌效果好;可有效用于变态反应疾病的皮肤点刺试验诊断、体外嗜碱性粒细胞活化试验诊断及特异性免疫治疗,可有效诊断由地肤花粉诱发的变态反应疾病并对其进行特异性免疫治疗。
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公开(公告)号:CN107176974B
公开(公告)日:2021-04-13
申请号:CN201710417662.2
申请日:2017-06-06
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
Abstract: 本发明提供了一种ω‑5‑醇溶蛋白特异的CD4+T细胞表位,该表位的氨基酸序列为LAMAMNIASASRLLS。该T细胞表位肽能诱导特异性CD4+T细胞增殖,为变应原特异性免疫治疗提供了新的靶点。可以用于制备药物,用于小麦依赖运动诱发的严重过敏性反应(WDEIA)特异性免疫治疗,为WDEIA提供新的治疗手段。
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公开(公告)号:CN107669743B
公开(公告)日:2020-08-25
申请号:CN201711187985.3
申请日:2017-11-24
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
IPC: C07K14/415 , C07K1/34 , A61K39/36 , A61P11/06 , A61P37/08
Abstract: 本发明提供一种葎草花粉过敏性哮喘免疫治疗小鼠模型的建立方法,包括步骤:第一步:分别于第1天、第8天和第15天对BALB/c小鼠颈后皮下注射25μg葎草花粉变应原粗浸液对小鼠致敏;第二步:第22‑24天,雾化吸入1%的葎草花粉变应原粗浸液激发,连续3天,每天30min;第三步:第25天开始,颈后皮下注射300μg葎草花粉变应原粗浸液脱敏,隔天一次,共8次;第四步:第43‑49天,雾化吸入1%的葎草花粉变应原粗浸液再次激发,连续7天,每天30min;造模成功;本发明建立了一种有效的过敏性哮喘特异性免疫治疗小鼠模型,为研究葎草花粉过敏性哮喘免疫治疗作用机制提供良好的载体。
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公开(公告)号:CN110078803A
公开(公告)日:2019-08-02
申请号:CN201910204888.3
申请日:2019-03-18
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
IPC: C07K14/415 , C07K1/14 , A61K39/36 , A61K9/19 , A61K49/00 , A61P37/08 , A61P11/06 , A61P11/02 , A61P17/00
Abstract: 本发明提供了本发明涉及一种洋白蜡花粉变应原浸液物、其浸液及其制备方法。该洋白蜡花粉变应原浸提物,其中含有洋白蜡花粉变应原蛋白如SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列。该浸液经洋白蜡花粉收集、干燥、脱脂、提取、超滤浓缩、冷冻干燥、复溶等工艺方法制得,其主要组分为洋白蜡花粉变应原、甘油、氯化钠、苯酚等。该洋白蜡花粉变应原浸液具有特异性高的特点,洋白蜡致敏蛋白组分提取充分,总生物效价稳定,有效期长,无菌效果好;其原液可有效用于变态反应疾病的皮肤点刺试验诊断、经适当稀释后可用于体外嗜碱性粒细胞活化试验诊断及特异性免疫治疗,可有效诊断由洋白蜡花粉诱发的变态反应疾病并对其进行特异性免疫治疗。
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公开(公告)号:CN110025788A
公开(公告)日:2019-07-19
申请号:CN201910210653.5
申请日:2019-03-20
Applicant: 中国医学科学院北京协和医院
Abstract: 本发明提供了一种变应原溶媒以及该溶媒的制备方法。通过在传统变应原溶媒的基础上添加相应的缓冲液以及抑菌剂成分,使得采用本发明提供的变应原溶媒稀释配制的变应原产品稳定,不易变色,活性蛋白不容易发生变性或被吸附在玻璃容器内表面,提高了需经溶媒稀释的变应原疫苗及变应原皮内诊断制剂的稳定性和效价,具有较高的推广价值。
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