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公开(公告)号：CN114717204A
公开(公告)日：2022-07-08
申请号：CN202210220569.3
申请日：2022-03-08
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/01 , C12N15/38 , C12N15/869 , A61K39/245 , A61P31/22
Abstract: 本发明公开了一种复制缺陷型伪狂犬病病毒构建方法和应用。所述的复制缺陷型伪狂犬病病毒是在包含PRV全基因组的BAC感染性克隆的基础上，将其中的gB基因编码序列中的第151或196位精氨酸突变为终止密码子TGA后得到的。本发明用tRNA反密码子编辑(Anticodon‑engineeredtransferRNAs，ACE‑tRNAs)技术实现DNA病毒提前终止密码子(Prematurestopcodon，PTC)的高效通读并应用于动物病毒疫苗的研究。证明了基于ACE‑tRNAs技术研究的复制缺陷病毒作为疫苗应用的可行性。本发明的提出为伪狂犬病病毒的防治提供了一种新的技术手段，同时也为解决一直困扰人们的疫苗安全性和有效性的问题提供了一种新的思路，代表了一种有前途的疫苗研究工具，为其它疫苗研究困难的病毒新型疫苗开发打开一扇新的大门。
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公开(公告)号：CN111849924B
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202010580477.7
申请日：2020-06-23
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了类NADC30猪蓝耳病强毒株、弱毒株及其应用。本发明的一种类NADC30猪蓝耳病强毒株，命名为类NADC30猪蓝耳病病毒SD株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.19691。通过对该SD株进行致弱培养，本发明还获得了一株类NADC30猪蓝耳病弱毒株，命名为类NADC30猪蓝耳病病毒SD‑R株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.19692。实验证明，本发明的SD株具有毒力强、对仔猪致病力稳定的特征，可用于检验预防或治疗类NADC30猪繁殖与呼吸综合征；本发明的弱毒疫苗株SD‑R株具有安全性高、保护效果好的特征，可用于预防类NADC30猪繁殖与呼吸综合征。因此，本发明的SD株及其弱毒疫苗SD‑R株可用于制备成防治类NADC30猪繁殖与呼吸综合征的单苗或联苗(活或灭活疫苗)等，也可以制备成诊断类NADC30猪繁殖与呼吸综合征的诊断试剂。
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公开(公告)号：CN112125960B
公开(公告)日：2021-10-26
申请号：CN202010878710.X
申请日：2020-08-27
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C07K14/01 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/20 , C07K1/14 , C07K1/30 , C07K1/18 , C12N15/70 , C12N15/34 , C12P21/02 , A61K39/295 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了一种适用于大规模工厂化生产操作的去除内毒素的通用方法。本发明将液相分离去除内毒素法和疏水层析去除内毒素法进行了结合和改进，保留了液相分离法高效去除内毒素的优点和疏水层析法适合大规模工厂化操作的优点，去掉了液相分离法中繁琐的离心和萃取以及疏水层析法中的高盐步骤。本发明可用于重组蛋白中内毒素的去除，也可用于制药业的药液中内毒素的去除，经过本发明的方法处理后，最终蛋白溶液中内毒素的含量为不超过10EU/mL或10EU/mg(目的蛋白)，通过本方法，能够以较低的成本将兽用疫苗中内毒素的含量控制到和人用疫苗相近的标准。本发明的一种去除内毒素的方法，具有高效、高回收率、低成本、易于大规模工厂化生产操作的特点。
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公开(公告)号：CN109536456B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN201811261025.1
申请日：2018-10-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术有限公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种识别PCV2病毒样颗粒的单克隆抗体及其在定性及定量检测PCV2病毒样颗粒中的应用。其中，能够特异性识别猪圆环病毒2型病毒样颗粒的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.15793的杂交瘤细胞株分泌产生。通过间接免疫荧光实验鉴定所得到的单克隆抗体3H9的特异性，结果表明该单克隆抗体可以特异性识别PCV2病毒粒子，并且能够与PCV2 VLPs反应，而不与线性cap蛋白包被的ELISA板反应。因此，本发明建立了一种可以同时定性和定量分析PCV2 VLPs的简便方法，解决了PCV2 VLP粒子结构检测仪器昂贵，操作困难以及定量方法不能区分非特异性蛋白和破碎亚基的问题。
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公开(公告)号：CN106520807B
公开(公告)日：2019-09-03
申请号：CN201611169628.X
申请日：2016-12-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因及其重组蛋白的制备方法。本发明的经改造后的胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明同时公开了该基因表达的重组蛋白制备及活性检测的方法，具体涉及胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白基因的改造、基因的克隆及其在毕赤酵母中的分泌表达、重组蛋白的制备和发酵培养条件，以及活性检测方法等操作方法的改进等步骤。本发明简单易行，成本较低，实现了胸腺素α1‑猪干扰素α融合蛋白在毕赤酵母中高效稳定分泌表达，表达的重组融合蛋白具有高水平的抗病毒活性和调节免疫细胞活性，为提供具有治疗猪病毒性疾病及免疫调节功能的绿色无残留生物制品奠定了基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109536456A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811261025.1
申请日：2018-10-26
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 哈尔滨维科生物技术开发公司
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种识别PCV2病毒样颗粒的单克隆抗体及其在定性及定量检测PCV2病毒样颗粒中的应用。其中，能够特异性识别猪圆环病毒2型病毒样颗粒的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.15793的杂交瘤细胞株分泌产生。通过间接免疫荧光实验鉴定所得到的单克隆抗体3H9的特异性，结果表明该单克隆抗体可以特异性识别PCV2病毒粒子，并且能够与PCV2 VLPs反应，而不与线性cap蛋白包被的ELISA板反应。因此，本发明建立了一种可以同时定性和定量分析PCV2 VLPs的简便方法，解决了PCV2 VLP粒子结构检测仪器昂贵，操作困难以及定量方法不能区分非特异性蛋白和破碎亚基的问题。
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公开(公告)号：CN104962524A
公开(公告)日：2015-10-07
申请号：CN201510333160.2
申请日：2015-06-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一株分泌CAV-2单克隆抗体的杂交瘤细胞株2C1、由该细胞株分泌的单克隆抗体及应用。所述杂交瘤细胞株2C1保藏编号为CGMCC No.10878。间接免疫荧光结果表明：2C1杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体能特异性识别CAV-2病毒而与MDCK细胞不反应。本发明制备的2C1和另一杂交瘤细胞株7D7分泌的两个单克隆抗体的叠加实验结果表明：这两个单克隆抗体为针对CAV-2病毒不同抗原表位的单抗。本发明所制备的单克隆抗体能很好的和CAV-2反应，可用于临床分离毒株的鉴定。本发明所制备的2C1单克隆抗体和7D7单克隆抗体是识别CAV-2的两个不同抗原决定簇的单抗，因此说明本发明的单克隆抗体能用于检测CAV-2病原胶体金的制备和夹心ELISA方法的建立。
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公开(公告)号：CN102634525A
公开(公告)日：2012-08-15
申请号：CN201210128807.4
申请日：2012-04-27
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因、表达载体的构建及其蛋白高效表达的方法。本发明的一种经改造后的猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因其序列如SEQ ID NO.1所示，本发明同时公开了其蛋白的制备方法，具体涉及猪圆环病毒II型衣壳蛋白基因的改造、基因的克隆及在毕赤酵母中的高效表达、蛋白收获时间及方法、蛋白含量及抗原性检测、扩大培养条件等操作方法的改进等步骤。本发明简单易行，成本较低，实现了猪圆环病毒II型衣壳蛋白在毕赤酵母中稳定高效表达，在试管或摇瓶中表达量大于218mg/L，为猪圆环病毒II型的抗体检测及亚单位疫苗的研制提供了基础。
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公开(公告)号：CN100523177C
公开(公告)日：2009-08-05
申请号：CN200710001253.0
申请日：2007-01-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine Reproductive and RespiratorySyndrome virus)弱毒疫苗株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.1883。本发明弱毒疫苗株遗传变异稳定，安全性好，对妊娠母猪、仔猪等各年龄猪只均安全，无致病力。用本发明弱毒疫苗株免疫仔猪后，所免疫仔猪均能抵抗猪繁殖与呼吸综合症病毒强毒的攻击。
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公开(公告)号：CN101220348A
公开(公告)日：2008-07-16
申请号：CN200710001253.0
申请日：2007-01-09
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine Reproductive and RespiratorySyndrome virus)弱毒疫苗株，其微生物保藏号是：CGMCC NO.1883。本发明弱毒疫苗株遗传变异稳定，安全性好，对妊娠母猪、仔猪等各年龄猪只均安全，无致病力。用本发明弱毒疫苗株免疫仔猪后，所免疫仔猪均能抵抗猪繁殖与呼吸综合症病毒强毒的攻击。
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