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公开(公告)号：CN110607282A
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201910788857.7
申请日：2019-08-26
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用。所述的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.18301的杂交瘤细胞株分泌产生。此外本发明还提出了用于检测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒，并建立了相应的间接竞争ELISA检测方法。实验证明，本发明建立的间接竞争ELISA方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，比间接ELISA方法和夹心ELISA方法的检测敏感度高出一个数量级。通过对临床样品检测，与PCR结果一致，表明该方法检测结果准确可靠。因此本发明可用于牛细小病毒感染的临床检测，尤其适用于检测早期感染和隐性感染时病毒含量低的病料，同时，也为牛细小病毒流行病学调查及疫情监控提供了一种可靠的方法。
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公开(公告)号：CN108169492B
公开(公告)日：2019-12-17
申请号：CN201711382428.7
申请日：2017-12-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括从左到右依次连接的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水滤纸，还包括位于下方的PVC底板，其中PVC底板的作用是提供组装平台，硝酸纤维素膜上具有山羊抗鼠IgG喷涂的质控线，以及兔抗牛轮状病毒多克隆抗体喷涂的检测线，胶体金垫上涂覆有胶体金颗粒标记的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体，样品垫提供了待测样品加入的位置；其中，所述的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体是由保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会微生物中心的，菌种保藏编号为CGMCC NO.14726的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明制备的试纸条，灵敏度好，特异性高，操作简单、快速，适用于现地检测。
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公开(公告)号：CN108169492A
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201711382428.7
申请日：2017-12-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括从左到右依次连接的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水滤纸，还包括位于下方的PVC底板，其中PVC底板的作用是提供组装平台，硝酸纤维素膜上具有山羊抗鼠IgG喷涂的质控线，以及兔抗牛轮状病毒多克隆抗体喷涂的检测线，胶体金垫上涂覆有胶体金颗粒标记的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体，样品垫提供了待测样品加入的位置；其中，所述的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体是由保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会微生物中心的，菌种保藏编号为CGMCC NO.14726的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明制备的试纸条，灵敏度好，特异性高，操作简单、快速，适用于现地检测。
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公开(公告)号：CN106190986A
公开(公告)日：2016-12-07
申请号：CN201610533234.1
申请日：2016-07-07
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569
CPC classification number: C07K16/10
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒血清4型VP2蛋白的单克隆抗体，分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株及用途。本发明以pET-28a为载体构建表达的VP2-4B蛋白作为免疫原免疫小鼠，以pMAL-c5x为载体构建表达的VP2-4B蛋白作为抗原，筛选阳性杂交瘤细胞，最终筛选得到一株能够稳定分泌抗BTV4-VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，实验证明，该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体BTV4-VP2-1B6能够与BTV4-VP2蛋白发生特异性反应，而与其他血清型VP2蛋白不发生反应。本发明的单克隆抗体BTV4-VP2-1B6为建立BTV4与其他血清型的血清学鉴别诊断方法奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106011075A
公开(公告)日：2016-10-12
申请号：CN201610348833.6
申请日：2016-05-24
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , C12R1/91
CPC classification number: G01N33/56983 , C07K16/10 , G01N2333/18 , G01N2469/20
Abstract: 本发明公开了一种抗鲑鱼甲病毒(SAV)E1基因高保守区蛋白的单克隆抗体及其应用，属于生物技术领域。本发明所提供的抗鲑鱼甲病毒E1基因高保守区蛋白单克隆抗体，是由保藏编号为CGMCC No.12289的小鼠杂交瘤细胞株分泌产生。本发明针对SAV六个基因型的高度保守区(436‑1137bp)制备出了抗鲑鱼甲病毒E1基因高保守区蛋白的单克隆抗体，研究表明，该单克隆抗体能够与鲑鱼甲病毒及E1重组蛋白发生特异性反应，而与传染性造血器官坏死病病毒(IHNV)、传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)不反应。因此，本发明的提出为SAV的检测或诊断提供了一种新的，有效的技术手段。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111073859B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN201911280787.0
申请日：2019-12-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种检测牛细小病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。本发明使用纯化后的兔抗BPV VP2蛋白多克隆抗体作为捕获抗体，使用由保藏号为:CGMCC No.18896的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体作为检测抗体，建立了双抗体夹心ELISA方法。特异性试验结果表明该方法特异性良好，与BRV、PRV、PEDV和TGEV均不发生反应。灵敏性试验表明该方法对病毒的最低检出量为3.125×102.8TCID50/mL。重复性试验表明该方法变异系数均小于10％，确定该方法具有良好的重复性。通过对临床样品的检测发现，双抗体夹心ELISA方法与PCR方法的检测结果一致，符合率为100％。本发明的提出可用于牛细小病毒的诊断，并为牛细小病毒感染的防控提供了一种快速检测方法和监测手段。
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公开(公告)号：CN107475445B
公开(公告)日：2021-01-12
申请号：CN201710703618.8
申请日：2017-08-16
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于RT‑PCR和RFLP技术鉴别鸡传染性法氏囊病病毒强弱毒株的试剂盒及其应用。所述的试剂盒含有用于扩增鸡传染性法氏囊病病毒VP2基因的引物对以及SpeI、SacI和StuI限制性内切酶。本发明所建立的基于RT‑PCR和RFLP技术的鉴别诊断方法能够区分IBDV的超强毒株和弱毒株，且步骤简单便于操作，本发明的提出为IBDV强弱毒株的快速鉴别诊断提供了一种新的有效技术手段。
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公开(公告)号：CN106190986B
公开(公告)日：2019-05-17
申请号：CN201610533234.1
申请日：2016-07-07
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种抗蓝舌病病毒血清4型VP2蛋白的单克隆抗体，分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株及用途。本发明以pET‑28a为载体构建表达的VP2‑4B蛋白作为免疫原免疫小鼠，以pMAL‑c5x为载体构建表达的VP2‑4B蛋白作为抗原，筛选阳性杂交瘤细胞，最终筛选得到一株能够稳定分泌抗BTV4‑VP2蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株，实验证明，该杂交瘤细胞株所分泌的单克隆抗体BTV4‑VP2‑1B6能够与BTV4‑VP2蛋白发生特异性反应，而与其他血清型VP2蛋白不发生反应。本发明的单克隆抗体BTV4‑VP2‑1B6为建立BTV4与其他血清型的血清学鉴别诊断方法奠定了基础。
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公开(公告)号：CN107179408B
公开(公告)日：2019-01-22
申请号：CN201710318544.6
申请日：2017-05-08
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于蓝舌病病毒型特异性检测的竞争ELISA检测试剂盒及其应用。所述试剂盒包括以下两组组分：组分I中包括包被蓝舌病病毒抗原I的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体I，所述的单克隆抗体I由杂交瘤细胞株1B6分泌产生；组分II中包括包被蓝舌病病毒抗原II的酶标板和用于蓝舌病病毒型特异性检测的单克隆抗体II，所述的单克隆抗体II由杂交瘤细胞株4A‑1G7分泌产生。本发明利用制备的两株4型BTV VP2单克隆抗体4A‑1G7以及1B6建立了蓝舌病病毒型特异性检测的联合竞争ELISA检测方法，该检测方法短时间内可以用于初步区分不同型蓝舌病感染的动物血清，实验条件要求低，适合于大规模的BTV血清抗体检查。
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公开(公告)号：CN109206502A
公开(公告)日：2019-01-15
申请号：CN201811126498.0
申请日：2018-09-26
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猫干扰素ω及其制备方法和在抗病毒中的应用。所述的猫干扰素ω的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。优选的，编码所述的猫干扰素ω的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。此外，本发明还公开了一种制备所述的猫干扰素ω的方法及其在制备抗病毒药物中的应用。本发明采用病毒刺激(猫肠道冠状病毒)结合干扰素诱生剂刺激(聚肌胞poly I:C)方法对宠物猫体进行刺激，进而诱导猫干扰素基因表达。然后通过PCR扩增得到了一条猫干扰素ω基因，细胞试验显示本发明获得的一种猫干扰素ω具有明显的抗病毒活性，并优于现有已知猫干扰素。本发明的提出为猫干扰素制品的进一步研发和应用奠定了基础。
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