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发明公开
一种T7RNA聚合酶介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统的构建方法失效

公开(公告)号：CN105861552A

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201610261461.3

申请日：2016-04-25

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 张智英 , 邢佳妮 , 闫强 , 徐坤

IPC: C12N15/85 , C12N15/65

Abstract: 本发明主要属于高等生物体基因组编辑技术领域，具体涉及一种T7 RNA聚合酶介导的CRISPR/Cas9基因编辑系统的构建方法。所述方法基于T7 RNA聚合酶和T7启动子的高度特异性识别原理，首先构建T7启动子?sgRNA，将T7启动子?sgRNA、Cas9表达质粒以及T7 RNA聚合酶表达质粒共同转入细胞，T7 RNA聚合酶催化T7启动子启动sgRNA的转录，从而引导Cas9在靶位点处，进行切割，完成基因编辑过程。本发明所述方法利用T7启动子表达sgRNA，简化了CRISPR/Cas9系统的设计步骤，使得更多的人能够快速简便使用CRISPR/Cas9这一基因编辑工具研究感兴趣的基因位点。

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