公开(公告)号：CN110628958A

公开(公告)日：2019-12-31

申请号：CN201911095969.0

申请日：2019-11-11

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  顾玉超 ,  冯永杰 ,  谢美萍 ,  李鳗芸 ,  鲍胜华 ,  周阳 ,  薛仁宇 ,  曹广力 ,  胡小龙 ,  朱敏 ,  张星

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种用于中华绒螯蟹茧蜂病毒PCR检测的引物对及试剂盒。本发明提供了一种用于中华绒螯蟹茧蜂病毒PCR检测的引物对，本发明的引物对根据如SEQ ID NO.3所示的中华绒螯蟹茧蜂病毒特异性序列进行设计，实现了中华绒螯蟹茧蜂病毒的PCR检测。本发明实现了中华绒螯蟹茧蜂病毒的快速检测，从模板制备至PCR产物的电泳检测通常在5小时左右完成，由于PCR技术已非常普及，因此在一般的生物学实验室均可实现，可广泛应于养殖生产中中华绒螯蟹茧蜂病毒的检测。与宏基因组、宏转录组检测相比，速度快、费用低、针对性强，应用性好。

公开(公告)号：CN108660157A

公开(公告)日：2018-10-16

申请号：CN201810535576.6

申请日：2018-05-30

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  曹广力 ,  薛仁宇 ,  胡小龙 ,  余蕾 ,  冯永杰

IPC: C12N15/85 ,  C12N7/00 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化；以及7）将线性化质粒等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染表达T7 RNA聚合酶的宿主细胞，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的一种基于DNA载体的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，为体外获取家蚕质型多角体病毒提供新方法，而且也可以为构建重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供理论指导和技术支撑。

公开(公告)号：CN104789597B

公开(公告)日：2018-03-30

申请号：CN201510209183.2

申请日：2015-04-28

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  薛仁宇 ,  曹广力 ,  胡小龙 ,  郭睿

IPC: C12N15/88 ,  C12N15/46 ,  C12N7/00 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种家蚕质型多角体病毒的体外构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得家蚕质型多角体病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组S1至S10片段的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，然后克隆到质粒载体中，获得重组质粒；6）将重组质粒进行酶切、线性化后，经过体外转录，获得RNA；以及7）将RNA等摩尔混合，使用脂质体进行包裹并转染宿主，进而获得体外构建的家蚕质型多角体病毒。本发明的家蚕质型多角体病毒的体外构建方法不但对家蚕质型多角体病毒基因组各片段的功能研究有促进作用，也可以为重组质型多角体病毒生物杀虫剂的研发提供技术支持。

公开(公告)号：CN107653315A

公开(公告)日：2018-02-02

申请号：CN201710960636.4

申请日：2017-10-16

Applicant: 苏州大学附属第一医院

Inventor： 张星 ,  朱敏 ,  杨荣 ,  胡小龙 ,  赵卫峰 ,  甘建和

IPC: C12Q1/6883 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了lncRNAs作为活动性肺结核病特异性标志物的应用。lncRNAs有组织特异性与时空特异性，不同组织之间的lncRNAs表达量不同，同一组织或器官在不同生长阶段，其中的lncRNAs表达量也会变化，本发明首次公开了两个lncRNAs作为活动性肺结核病特异性标志物，利用临床上比较容易直接获得的全血标本，结合设计的引物对进行RT-qPCR验证lncRNAs的差异表达，具有快速、简单、省时、检测灵敏度高，样品消耗少的优点，是非常适合的利用差异表达的lncRNAs诊断活动性肺结核病的方法，对研究控制肺结核病的传播，降低其发生率具有重要的意义。

公开(公告)号：CN104789598A

公开(公告)日：2015-07-22

申请号：CN201510209184.7

申请日：2015-04-28

Applicant: 苏州大学

Inventor： 贡成良 ,  曹广力 ,  薛仁宇 ,  胡小龙 ,  郭睿

IPC: C12N15/88 ,  C12N15/46 ,  C12N7/01 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了一种表达红色荧光蛋白的重组家蚕质型多角体病毒的构建方法。具体而言，本发明的方法包括下列步骤：1）获得病毒基因组；2）设计并合成引物；3）获得病毒基因组的cDNA；4）对cDNA进行PCR扩增；5）将扩增产物进行酶切，获得重组质粒；6）将重组质粒pT-S1至pT-S9进行酶切，体外转录获得对应的RNA；7）构建带有红色荧光蛋白基因的重组质粒pT-S10-DsRed并获得S10-DsRed RNA；以及8）将上述RNA等摩尔混合，包裹并转染宿主，进而获得病毒。利用本发明建立的方法可以在家蚕细胞中表达红色荧光蛋白，进而有可能获得人们所需的重组质型多角体病毒生物杀虫剂。