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公开(公告)号：CN106244617A
公开(公告)日：2016-12-21
申请号：CN201610812885.4
申请日：2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor： 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种递送外源DNA进入总状毛霉未萌发孢子的方法，包括总状毛霉培养和孢子收集、总状毛霉孢子预处理以及使用HDEN法电击总状毛霉孢子三个步骤，得到导入待转化质粒的总状毛霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料，并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入总状毛霉休眠孢子，可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤，省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等，并且转化率高，每个转化反应体系，至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号：CN106148385A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201610812871.2
申请日：2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor： 林峻
IPC: C12N15/80
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种对黄曲霉休眠孢子转化外源DNA的方法，包括黄曲霉培养和孢子收集、黄曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击黄曲霉孢子三个步骤，得到导入待转化质粒的黄曲霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料，并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入黄曲霉休眠孢子，可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤，省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等，并且转化率高，每个转化反应体系，至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号：CN106148383A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201610812825.2
申请日：2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor： 林峻
CPC classification number: C12N15/80
Abstract: 本发明公开了一种不依赖介质直接转化外源DNA进入里氏木霉休眠孢子的方法，包括里氏木霉培养和孢子收集、里氏木霉孢子预处理以及使用HDEN法电击里氏木霉孢子三个步骤，得到导入待转化质粒的里氏木霉孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料，并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入里氏木霉休眠孢子，可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤，省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等，并且转化率高，每个转化反应体系，至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。
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公开(公告)号：CN103060344A
公开(公告)日：2013-04-24
申请号：CN201310031803.9
申请日：2013-01-29
Applicant: 福州大学
Inventor： 林峻
Abstract: 本发明提供了一种梅花鹿过氧化氢酶及其制备方法，本发明提供的梅花鹿过氧化氢酶基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，梅花鹿过氧化氢酶基因的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明成功克隆得到此前未见报道的梅花鹿过氧化氢酶基因序列。通过序列比对，可以知道，梅花鹿过氧化氢酶基因在哺乳动物中是高度保守的，通过生物信息学分析，可知该基因长度适中，带有典型的过氧化氢酶结构域，对应的蛋白质序列具有较好的亲水性，适合异源重组蛋白表达，之后采用毕赤酵母表达系统，成功实现了该基因的重组表达。梅花鹿过氧化氢酶的获得无论是在工业化应用领域，还是探究其药理价值，都具有重要意义。
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公开(公告)号：CN115125224B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202210959921.5
申请日：2022-08-11
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种可规模化生产具有活性的DNA聚合酶的方法。所述方法包括以下步骤：1）将携带有目的基因的菌种划线于带氨苄抗性的LB平板上，挑取单菌落培养后作为种子液；2）配置高密度发酵培养基，加入发酵罐中；3）将种子液转接到步骤2)的发酵罐中进行培养；4）当培养至溶氧下降至30%以下时，开始加入补料培养基，控制溶氧为30％以上；5）当培养至细菌菌体湿重距最大菌体湿重4g/L时，一次性加入IPTG诱导，使IPTG终浓度为1±0.1 mM；6）达到最佳诱导时长后停止发酵，放罐，获取菌体。本发明提高了目标产物的发酵稳定性，并且减少了包涵体的产生，可实现规模化生产DNA聚合酶。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN108384868A
公开(公告)日：2018-08-10
申请号：CN201810483056.5
申请日：2018-05-18
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种用于同时检测四种致病弧菌的多重PCR引物组及检测方法和试剂盒，其检测引物组包含检测副溶血性弧菌、创伤弧菌、哈氏弧菌和拟态弧菌的引物对。本发明还建立了一种用于同时检测四种致病弧菌的多重PCR检测方法及试剂盒，利用设计得到的所述引物组，对待测样品中提取的细菌的基因组DNA，在同一反应体系中进行多重PCR反应，通过对反应产物的电泳分析来判定样品中是否含有上述致病弧菌，具有快速准确、成本低、特异性和灵敏度高的优点。
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公开(公告)号：CN106381305A
公开(公告)日：2017-02-08
申请号：CN201610812886.9
申请日：2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor： 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了转化外源ssRNA到米根霉休眠孢子中并表达蛋白质的方法，包括米根霉培养和孢子收集、米根霉孢子预处理以及使用HDEN法电击米根霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在米根霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速，效果极佳，转化率达到90%以上。
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公开(公告)号：CN106381304A
公开(公告)日：2017-02-08
申请号：CN201610812881.6
申请日：2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor： 林峻
CPC classification number: C12N15/80 , C12N2800/10
Abstract: 本发明公开了一种使用外源单链RNA在米曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法，包括米曲霉培养和孢子收集、米曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击米曲霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在米曲霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速，效果极佳，转化率达到90%以上。
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公开(公告)号：CN106244631A
公开(公告)日：2016-12-21
申请号：CN201610813613.6
申请日：2016-09-09
Applicant: 福州大学
Inventor： 林峻
CPC classification number: C12N15/87
Abstract: 本发明公开了一种使用外源单链RNA在红曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法，包括红曲霉培养和孢子收集、红曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击红曲霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在红曲霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速，效果极佳，转化率达到90%以上。
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