酵母展示脂肪酶催化合成麦芽糖月桂酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212592A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110108793.5

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成麦芽糖月桂酸酯的方法,包括:将麦芽糖和月桂酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得麦芽糖月桂酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成麦芽糖月桂酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成蔗糖棕榈酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212590A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110108737.1

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成蔗糖棕榈酸酯的方法,包括:将蔗糖和棕榈酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得蔗糖棕榈酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS 115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成蔗糖棕榈酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成维生素E琥珀酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212577A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110108816.2

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成维生素E琥珀酸酯的方法,包括:将维生素E和琥珀酸酐溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应10~14小时,分离、纯化制得维生素E琥珀酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichiapastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成维生素E琥珀酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212575A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110110431.X

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯的方法,包括:将L-抗坏血酸和棕榈酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应4~8小时,分离、纯化制得L-抗坏血酸棕榈酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成L-抗坏血酸棕榈酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    酵母展示脂肪酶催化合成维生素C共轭亚油酸酯的方法

    公开(公告)号:CN102212570A

    公开(公告)日:2011-10-12

    申请号:CN201110108725.9

    申请日:2011-04-28

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成维生素C共轭亚油酸酯的方法,包括:将L-抗坏血酸和共轭亚油酸溶于有机溶剂中,加入酵母展示脂肪酶,无氧条件下于50~60℃反应4~8小时,分离、纯化制得L-抗坏血酸共轭亚油酸酯;将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,将所得转化子接种于BMMY培养基中,诱导培养72~144小时后离心收集菌体,菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶;本发明通过将脂肪酶展示在细胞外,利用该酶制剂催化合成L-抗坏血酸共轭亚油酸酯,不仅提高了转化效率,而且缩短了反应时间,降低了生产成本。

    等位基因的敲除方法及其构建的重组GAL菌株和用途

    公开(公告)号:CN101979535A

    公开(公告)日:2011-02-23

    申请号:CN201010284289.6

    申请日:2010-09-16

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种等位基因的敲除方法,根据等位基因的基因序列,设计40~500bp的同源引物,分三步敲除三个等位基因,同时引入长片段的目的基因。本发明还同时公开了利用上述方法构建而得的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae),其保藏名称为:S.CGQ21-14,保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心;保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号,中国科学院微生物研究所;保藏日期:2009年9月6日,保藏号:CGMCC NO.3263。该酿酒酵母能在发酵过程中提高GAL1启动子控制下的外源蛋白的表达水平,同时使发酵过程中半乳糖的浓度维持不变。

    同步检测啤酒花中黄腐酚、异黄腐酚和8-异戊烯基柚皮素的方法

    公开(公告)号:CN101871924A

    公开(公告)日:2010-10-27

    申请号:CN201010187676.8

    申请日:2010-05-31

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种同步检测啤酒花中黄腐酚、异黄腐酚和8-异戊烯基柚皮素方法,包括:用有机溶剂提取含啤酒花的待测样品,过滤,所得滤液用有机溶剂定容,获得样品待测液;采用反相碳十八色谱柱和紫外可见分光检测器,流动相为乙腈和水相的混合溶液,流速为0.7ml/min~1ml/min,采用梯度洗脱,在双检测波长350nm~390nm和260nm~290nm分析样品待测液,得到样品待测液的色谱图;所述的水相为甲酸质量百分比浓度为0.5%~1.5%的甲酸水溶液;将样品待测液的色谱图上的峰面积在标准工作曲线上回归,计算含啤酒花的待测样品中黄腐酚、异黄腐酚和8-异戊烯基柚皮素的含量。该方法的精密度高,操作简单。

    一种肠道保健型桑椹红酒的生产方法

    公开(公告)号:CN101182440B

    公开(公告)日:2010-10-13

    申请号:CN200710156532.4

    申请日:2007-11-07

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明了公开一种肠道保健型桑椹红酒的生产方法,包括(1)主发酵、(2)后发酵、(3)冷冻、(4)硅藻土下胶。本发明生产方法在桑椹红酒的制作过程中加入低聚糖类双歧因子来协调桑椹红酒的甜酸比,利用低聚糖类双歧因子调节胃肠道菌群的功能。本发明制得的桑椹红酒具有双重保健效应。

    一种产耐高温、耐酸beta-葡聚糖酶的康氏木霉菌株及其应用

    公开(公告)号:CN100584937C

    公开(公告)日:2010-01-27

    申请号:CN200610155028.8

    申请日:2006-12-05

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种产耐高温、耐酸beta-葡聚糖酶的康氏木霉(Trichoderma koningii)ZJU-T CGMCC No.1842。其菌丝透明,有隔,壁光滑;分生孢子梗由菌丝生出,直立,无色,其上分枝形成树枝状;分生或分生孢子梗常呈直角,末端分枝为小梗,小梗瓶形;分生孢子圆形或长椭圆形,壁光滑或粗糙,单孢,靠粘液在小梗上集聚成球状绿色的分生孢子头。本发明康氏木霉(Trichoderma koningii)ZJU-T可产耐高温、耐酸的beta-葡聚糖酶,该beta-葡聚糖酶在食品、饲料、果蔬加工、烟草、中草药有效成分提取、纺织、造纸、污水处理和石油开采等方面均有巨大应用潜力。

    一种促进丁酸梭菌生长的菊粉酶解产物的制备方法

    公开(公告)号:CN101624611A

    公开(公告)日:2010-01-13

    申请号:CN200910101556.9

    申请日:2009-08-13

    Applicant: 浙江大学

    Abstract: 本发明公开了一种促进丁酸梭菌生长的菊粉酶解产物的制备方法,在反应容器中加入稀释的菊粉酶、质量百分比浓度为1%~20%菊粉液(菊粉的水溶液)、pH为3~6的醋酸盐缓冲液;在40℃~60℃反应,反应结束后,加热使菊粉酶失活,得到菊粉酶解产物;其中,所述的稀释的菊粉酶、菊粉液和醋酸盐缓冲液的体积比为0.2~1∶5∶4。本发明制备方法操作简便,对益生菌丁酸梭菌的生长有很好的促进作用,具有极大的开发利用价值。

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