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公开(公告)号：CN111088241A
公开(公告)日：2020-05-01
申请号：CN202010106516.X
申请日：2020-02-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了基因工程改造的高活力人溶菌酶，属于生物工程技术领域。本发明公开了一种利用基因工程改造人源溶菌酶活性中心而得到的人源溶菌酶突变体m4HLM，通过改变活性中心的氨基酸残基从而将比酶活提高了60％。本发明还公开了一种含突变人源溶菌酶基因的重组质粒，以及经过该重组质粒转化毕赤酵母后获得的高效表达人源溶菌酶突变体的重组毕赤酵母基因工程菌。本发明获得的人源溶菌酶突变体具有比酶活高，制备简单的特点，具有潜在的临床应用价值，在饲料、食品工业上也具有广泛的用途。
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公开(公告)号：CN105779363B
公开(公告)日：2019-06-04
申请号：CN201610327227.6
申请日：2016-05-17
Applicant: 江南大学 , 厦门欧米克生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了一种液化沙雷氏菌及其转化合成洋茉莉醛的方法，属于生物技术领域。本发明从土壤中筛选分离到一株可以转化黄樟油素为底物原料合成洋茉莉醛的新菌株ZMT‑1，该菌经鉴定为液化沙雷氏菌，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M2016170。该菌株种子培养物接种于发酵培养基中，需氧生长24‑36h，然后添加0.5～3g/L底物转化24‑48h，产洋茉莉醛160‑524mg/L。本发明首次报道了液化沙雷氏菌用于合成洋茉莉醛，提供了一种微生物转化法合成洋茉莉醛的方法。
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公开(公告)号：CN103898011A
公开(公告)日：2014-07-02
申请号：CN201410087026.4
申请日：2014-03-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种甲基营养菌及其发酵生产吡咯喹啉醌的方法，属于生物技术领域。本发明从土壤中筛选分离到一株新菌株Methylopilasp.YHT-1，该菌能够生产吡咯喹啉醌，已于2014年1月12日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC？NO：M2014016。该菌株在以甲醇为碳源的培养基中好氧培养3-4天，产吡咯喹啉醌50-113mg/L。本发明首次报道了Methylopilasp.能过量产生PQQ并能分泌到胞外，为发酵法制备PQQ提供了新菌种。
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公开(公告)号：CN103436561A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310401535.5
申请日：2013-09-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发公开了一种以棉纤维材料固定琥珀酸放线杆菌发酵生产丁二酸的方法，属于发酵工程领域。将琥珀酸放线杆菌在装有棉纤维载体的发酵罐中培养、吸附固定，通过反复分批发酵、反复补料分批发酵、连续发酵或双罐循环连续发酵工艺，提高了发酵的细胞浓度，同时获得高产酸浓度、高生产强度和高转化率。转化率最高达90%，生产强度最高为4.27g/L/h，丁酸产量最高为98.7g/L。
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公开(公告)号：CN103420827A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310366258.9
申请日：2013-08-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种通过双水相萃取从发酵液中提取丁二酸的方法，属于生物化工技术领域。本发明涉及微生物发酵生产的丁二酸发酵液，经酸化处理后，加入溶解度较大的酸式盐和亲水性有机溶剂，形成双水相体系，分离上相并进行减压蒸馏回收有机溶剂、母液用活性炭脱色、浓缩结晶，得到丁二酸晶体；在下相中，加入亲水性醇，分别回收无机盐与亲水性醇。本发明克服了目前从丁二酸发酵液中提取目标产物丁二酸存在的效率低，成本高，蛋白和葡萄糖去除困难的问题，该提取丁二酸方法，具有低能耗、操作简单、绿色环保的特点。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102061283B
公开(公告)日：2012-08-22
申请号：CN201010572851.5
申请日：2010-12-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株产精氨酸脱亚胺酶（ADI）的重组菌的构建及其定向改造方法，属于医药生物工程技术领域。其中包括：采用PCR方法，扩增变形假单胞菌（Pseudomonasplecoglossicida）CGMCCNo.2039的ADI编码基因arcA，构建ADI重组表达菌种，对该重组ADI酶进行酶学性质研究，其Km为2.88mmol/L（pH6.0），最适反应pH为6.0，比酶活为20.85U/mg，当pH升高至生理pH（7.4）时，比酶活下降超过90%。采用易错PCR突变技术，对该重组ADI酶进行定向改造以提高其在生理中性条件pH下的活性及底物亲和力。通过一轮定向改造，筛选获得一株优良的突变株ADIM314，ADIM314酶和野生酶相比：其生理pH条件下比酶活提高20倍以上，Km值下降至0.65mmol/L（pH7.4），最适反应pH从6.0提高至6.5。
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公开(公告)号：CN102061283A
公开(公告)日：2011-05-18
申请号：CN201010572851.5
申请日：2010-12-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 一株产精氨酸脱亚胺酶（ADI）的重组菌的构建及其定向改造方法，属于医药生物工程技术领域。其中包括：采用PCR方法，扩增变形假单胞菌（Pseudomonas plecoglossicida）CGMCC No.2039的ADI编码基因arcA，构建ADI重组表达菌种，对该重组ADI酶进行酶学性质研究，其Km为2.88mmol/L（pH6.0），最适反应pH为6.0，比酶活为20.85U/mg，当pH升高至生理pH（7.4）时，比酶活下降超过90%。采用易错PCR突变技术，对该重组ADI酶进行定向改造以提高其在生理中性条件pH下的活性及底物亲和力。通过一轮定向改造，筛选获得一株优良的突变株ADIM314，ADIM314酶和野生酶相比：其生理pH条件下比酶活提高20倍以上，Km值下降至0.65mmol/L（pH7.4），最适反应pH从6.0提高至6.5。
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公开(公告)号：CN101302546B
公开(公告)日：2011-04-13
申请号：CN200810123545.6
申请日：2008-06-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 连续发酵或半连续发酵生产丁二酸的方法，属于生物工程技术领域。本发明提供琥珀酸放线杆菌(Actinobacillus succinogenes)在以甘蔗糖蜜、玉米淀粉糖浆、菊芋水解糖浆、甜高粱秸秆糖浆及纤维质木质原料水解糖浆等碳水化合物原料连续或半连续制备丁二酸方法中的应用。本发明的方法利用多级连续发酵或两级半连续发酵可以提高菌体浓度和细胞活力，可获得高的丁二酸产量和高的丁二酸生产强度；容易实现自动化、连续化操作；较分批发酵可节约反复洗罐、灭菌等非发酵时间，因而生产效率可以大大提高；利用半连续发酵生产丁二酸较连续发酵更容易控制发酵参数，糖利用率、目标产物产率和目标产物产量高，设备及操作简单易行，适合工业化生产。
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公开(公告)号：CN101531972B
公开(公告)日：2010-12-01
申请号：CN200810146688.9
申请日：2008-09-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一株具有较强钠离子耐受性和产酸性能的琥珀酸放线杆菌Actinobacillus succinogenes CGMCC No.2653(即F3-10)，该菌株的选育方法及用其发酵生产丁二酸的方法。以琥珀酸放线杆菌CGMCC No.1593作为出发菌株，分别对其进行X-射线、紫外线诱变和硫酸二乙酯(EMS)、亚硝基胍(NTG)化学诱变，筛选得到具有改良的发酵产酸性能，特别是钠离子耐受性有改良三株菌株X-8、UV-17、SE-6，和具有氟乙酸抗性的高产菌株SF-9，将它们用基因组改组方法选育得到高产、耐钠、抗氟乙酸的菌株F3-10。该菌株F3-10以甘蔗糖蜜为原料，采用Na2CO3控制发酵pH，在5L发酵罐中进行补料分批发酵，48h产丁二酸53.96g/L，对消耗糖产率89.2％，糖利用率94.0％，丁二酸比杂酸为6.58∶1，较出发菌CGMCC No.1593有显著提高。
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公开(公告)号：CN101348428A
公开(公告)日：2009-01-21
申请号：CN200810195851.0
申请日：2008-09-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 一种阴离子树脂吸附提取发酵液中丁二酸的方法，属于生物化工技术领域。本发明将丁二酸发酵液经加热活性炭脱色处理，离心或微滤膜过滤除去菌渣，将得到的发酵清液通过碱性阴离子树脂柱吸附，吸附饱和后用水冲去杂质，然后用盐酸或硫酸溶液洗脱，得到丁二酸溶液，减压浓缩、结晶得到丁二酸产品；并且回收发酵液用阴离子树脂柱吸附后流出液中的MgCl2和残糖。阴离子树脂吸附时流出液中的MgCl2通入CO2或(Na)2CO3制备碳酸镁，回用于发酵过程缓冲和调节pH，滤液中的糖回收到发酵配料中继续发酵。本发明方法可以实现操作过程中的物料回收再利用，显著减少提取过程的材料消耗，降低废水的环保处理费用，提高产品经济效益。
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