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公开(公告)号：CN109234350B
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN201811358451.7
申请日：2018-11-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产维生素C前体2‑酮基‑L‑古龙酸的方法，该方法将过表达D‑山梨醇脱氢酶(SLDH)的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis，伴生菌)与产酸菌普通生酮基古龙酸菌(Ketogulonigenium vulgare)混合培养，发酵制备2‑酮基‑L‑古龙酸。本发明方法实现了从D‑山梨醇到2‑酮基‑L‑古龙酸的“一锅法”转化，简化了生产工艺，缩短发酵周期，有效降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN112080440A
公开(公告)日：2020-12-15
申请号：CN202011028630.1
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生产法尼烯的酿酒酵母工程菌及其应用，属于合成生物学技术领域。本发明筛选获得了在酿酒酵母中转化效率较高的法尼烯合成酶Fsso；构建不同拷贝数HMG1和甲羟戊酸途径全部基因强化法尼烯合成菌株，确认单拷贝和双拷贝HMG1最有利于法尼烯的持续合成积累；用GAL启动子同时控制HMG1和Fsso的表达可进一步提高法尼烯的积累量。本发明构建的法尼烯合成菌株基因操作简单，摇瓶发酵最高能够积累1.11g/L法尼烯。
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公开(公告)号：CN112062822A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202011017359.1
申请日：2020-09-24
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体I42A，属于蛋白质工程技术领域。本发明对从地衣芽孢杆菌基因组中克隆的CcpA基因进行突变，得到的一种碳分解代谢调控蛋白CcpA突变体I42A，其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码其的基因核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明构建了包含编码上述CcpA突变体I42A基因的重组表达载体，并将构建的表达载体转化到地衣芽孢杆菌CcpA基因缺陷株中获得重组地衣芽孢杆菌；所获得的重组地衣芽孢杆菌能够明显改变由于葡萄糖存在而产生的碳分解代谢阻遏现象，能够降低地衣芽孢杆菌对木糖的偏好性。
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公开(公告)号：CN107400677B
公开(公告)日：2020-05-22
申请号：CN201710590555.X
申请日：2017-07-19
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统的地衣芽孢杆菌基因组编辑载体，所述地衣芽孢杆菌基因组编辑载体的制备方法为：将Cas9蛋白表达框和sgRNA scaffold表达框整合在出发载体pHY xyl中，获得pHY‑Cas9‑sgRNA scaffold，然后将以amyL为靶位点设计合成的多条sgRNA片段中的任意一条整合到所述的pHY‑Cas9‑sgRNA scaffold中，制得所述地衣芽孢杆菌基因组编辑载体。本发明可以大幅改善当前地衣芽孢杆菌基因编辑困难的现状，显著提高基因编辑的效率。
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公开(公告)号：CN110656051A
公开(公告)日：2020-01-07
申请号：CN201910864041.8
申请日：2019-09-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种制备高质量食药用真菌原生质体的方法，属于真菌的生物学领域。本发明方法为在食药用真菌静置培养过程中外源添加一定量的苯丙氨酸，使得食药用真菌细胞壁厚度降低58.58％，从而提供有助于原生质体制备的菌丝体，且可以高效、稳定地为食药用真菌遗传转化操作制备高质量原生质体。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109234350A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811358451.7
申请日：2018-11-15
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种发酵生产维生素C前体2-酮基-L-古龙酸的方法，该方法将过表达D-山梨醇脱氢酶(SLDH)的地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis，伴生菌)与产酸菌普通生酮基古龙酸菌(Ketogulonigenium vulgare)混合培养，发酵制备2-酮基-L-古龙酸。本发明方法实现了从D-山梨醇到2-酮基-L-古龙酸的“一锅法”转化，简化了生产工艺，缩短发酵周期，有效降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN109136208A
公开(公告)日：2019-01-04
申请号：CN201811044790.8
申请日：2018-09-07
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/485 , C07K2319/02 , C07K2319/21 , C12N15/70 , C12Y304/17002
Abstract: 本发明公开了一种羧肽酶B分泌表达的方法，所述方法包括如下步骤：(1)以信号肽OmpA、PelB、Endoxylanase和OmpT序列为出发序列，分别进行定点突变；(2)制备核苷酸序列SDB‑pCPB‑6×His；(3)制备重组表达载体；(4)将重组表达载体转化至宿主大肠杆菌E.coli BL21并诱导表达pCPB；(5)酶切上述pCPB并纯化CPB。本发明通过对信号肽的改造，能够将羧肽酶原B直接分泌到培养基中，相比于胞内和周质表达，不需要破碎细胞，回收与纯化更能容易操作。另外，培养基中空间足够大，利于重组蛋白的过量表达。
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公开(公告)号：CN108998486A
公开(公告)日：2018-12-14
申请号：CN201810870120.5
申请日：2018-08-02
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种木糖诱导型地衣芽孢杆菌产蛋白的诱导方法，该方法采用RT-qPCR技术对不同条件下发酵过程中木糖启动子基因转录水平进行实时检测，并据检测结果提出木糖诱导型地衣芽孢杆菌诱导产蛋白的方法。本发明依据启动子转录水平提供的诱导方法可以从基因表达最基础的层面指导木糖诱导型重组地衣芽孢杆菌产蛋白，满足实际生产的不同诱导需求；此外，该方法也可以应用于不同的宿主菌产不同蛋白的研究，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN104699997B
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201510131784.6
申请日：2015-03-24
Applicant: 江南大学
IPC: G06F19/12
Abstract: 本发明公开了一种基因组代谢网络模型自动化修正方法，利用了超文本传送协议和Java控件HttpClient相结合、并利用图像处理算法，实现自动提交并分析网站脚本语义，基于KEGG、MetaCyc、MetRxn在线数据库以及多个蛋白区间定位预测网站对基因组规模代谢网络模型进行了自动化断点补齐，同时通过蛋白区间预测结果和权重打分机制确定可信度高的特异性反应，完成代谢网络粗模型的自动化修正过程。利用本发明所述的方法进行基因组代谢网络模型修正的优点是更加省时、方便，且所得修正模型更为全面、准确。
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公开(公告)号：CN105586367A
公开(公告)日：2016-05-18
申请号：CN201610137420.3
申请日：2016-03-10
Applicant: 江南大学 , 江苏国信协联能源有限公司
Abstract: 本发明公开一种基于pH响应阶段添加糖化酶发酵生产柠檬酸的方法，包括将淀粉质原料进行调浆、液化、接种发酵，制得终发酵液，还包括在发酵培养过程中，当发酵液pH降至2.0~3.0时，向其中分阶段等量添加糖化酶的步骤，所述分阶段等量添加为每间隔2~8h等量添加，所述糖化酶的添加总量为40~1000U/g残余非葡萄糖量。本发明方法能解决柠檬酸发酵中后期糖化酶活力损失的问题，有效缩短发酵周期，提高发酵转化率，降低终发酵液残糖量，降低废水排放，同时能够抵消自身分泌的葡萄糖糖苷酶活性，减少非发酵糖的产生，具有重要的经济效益与环境效益。
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