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公开(公告)号:CN110241259B
公开(公告)日:2023-03-14
申请号:CN201910540545.4
申请日:2019-06-21
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分鹅1型星状病毒和鹅2型星状病毒的HRM检测方法及其引物,本发明操作简单,只需要一对通用引物,在PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量,缩短了分型所需时间;不需要特异性荧光标记探针;特异性强、准确性高,可以快速、准确、高通量地对样品进行分析,有利于在临床实践中推广应用,具有较高的应用价值。
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公开(公告)号:CN105838826B
公开(公告)日:2019-12-24
申请号:CN201610296557.3
申请日:2016-05-05
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分犬细小病毒疫苗株与野毒株的双色荧光PCR引物、探针及方法。该方法结合了实时荧光PCR技术及熔解曲线分析技术,根据熔解曲线峰型及Tm值差异鉴定犬细小病毒疫苗与野毒株;操作简单:只需一个反应即可实现三种基因型野毒株及两种疫苗与的鉴别检测;检测速度快且高通量:全部操作过程不需3小时,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了病毒三种不同基因型及两种疫苗与野毒株的鉴别检测所需时间;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN105755174A
公开(公告)日:2016-07-13
申请号:CN201610218996.2
申请日:2016-04-08
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2563/107 , C12Q2527/107
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定H7N9禽流感病毒的HRM检测方法及其引物组,该方法同样适合于H7亚型禽流感病毒和N9亚型禽流感病毒的检测。该方法操作简单:只需在PCR反应之前加荧光饱和染料即可;检测速度快且高通量:全部操作过程只需2?3小时,极大缩短了分型所需时间;费用低,不需要特异性荧光标记探针,每个样品的饱和染料成本为1.6 RMB;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床检测中推广应用。
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公开(公告)号:CN105331740A
公开(公告)日:2016-02-17
申请号:CN201510770565.2
申请日:2015-11-12
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/706 , C12Q1/686 , C12Q2527/107 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种快速区分鸭甲肝病毒1型和3型的PCR-HRM引物和方法,该方法首先构建了DHAV-1和DHAV-3相应目的片段的质粒样品作为阳性质粒,然后从样品中提取病毒RNA并反转录为cDNA,再以cDNA为模板,利用所设计的特异性引物对cDNA进行PCR-HRM扩增;对扩增产物进行HRM分析,确定病毒类型。本发明操作简单,只需在普通PCR反应之前加入荧光饱和染料;检测快速且高通量,整个操作过程需约3.5小时,即可完成96/384孔板的PCR产物检测,极大缩短了检测时间;费用低,不需要多条引物和特异性探针;敏感性高、特异性和重复性好,有利于在临床上的推广应用。
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公开(公告)号:CN119320444A
公开(公告)日:2025-01-17
申请号:CN202411531537.0
申请日:2024-10-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
IPC: C07K14/54 , C12N15/70 , C12N1/06 , C12N1/21 , C12N15/24 , C07K1/14 , C07K1/30 , C07K1/22 , C07K1/34 , C07K1/36 , A61P37/04 , A61K38/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及生物医药领域,具体而言,涉及一种鸡IL‑17A重组蛋白的制备方法及其在激活细胞炎症反应中的应用。本发明通过构建重组质粒,以热应激法将该载体转化至大肠杆菌BL21感受态细胞内,利用IPTG诱导表达,将包涵体洗涤、溶解、变性、复性后,通过纯化得到重组蛋白IL‑17A蛋白。本发明制备的重组IL‑17A蛋白能够刺激鸡骨源单个核细胞,导致炎症因子IL‑1β、IL‑6、TNF‑α的上调。本发明纯化的重组蛋白IL‑17A具备生物学活性,可以作为免疫增强剂,为禽类提供免疫保护。
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公开(公告)号:CN118480512B
公开(公告)日:2024-10-01
申请号:CN202410928778.2
申请日:2024-07-11
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所 , 兽用生物制品(泰州)国泰技术创新中心
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/867 , C12N7/00 , C12R1/91
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种A3Z2基因敲除的ST细胞株的构建方法,采用慢病毒感染ST细胞株,经筛选得到A3Z2基因敲除的ST细胞株;所述ST细胞株为能表达Cas9蛋白的ST细胞株;所述慢病毒为用于敲除ST细胞株的A3Z2基因的慢病毒。流式细胞术分析发现,与ST细胞株(ST‑WT)相比,敲除A3Z2基因的ST细胞株(ST‑A3Z2‑KO),处于G1期的细胞数量明显增多;当PDCoV感染ST‑A3Z2‑KO细胞后,该细胞株中处于G1期的细胞数量明显减少;由此可见,PDCoV可以利用细胞G1期的有利条件进行高效增殖。因此,该发现不仅仅可以应用于PDCoV的增殖,对于其他病毒的增殖也是有着积极意义的。同时,本发明还提供细胞系的构建方法以及用途。
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公开(公告)号:CN115786175B
公开(公告)日:2023-12-08
申请号:CN202211210167.1
申请日:2022-09-30
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一株粘膜乳杆菌(Limosilactobacillus mucosae),其特征在于,保藏编号为:GDMCC NO:62541;保藏日期:2022年06月13日,保藏单位:广东省微生物菌种保藏中心,地址:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。该菌株可以提高猪对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的抵抗效果,该菌株在I型干扰素IFN‑α,IFN‑β等因子的调节方面以及在III型干扰素IFN‑λ1,IFN‑λ3基因的调节方面具有较好的功能,特定浓度的菌株针对抗病毒蛋白基因MX1、MX2、OAS1和ZAP的调节具有差异化和特异性。同时,本发明还提供了该菌的用途。(56)对比文件S Roos, F Karner et al.Lactobacillusmucosae sp. nov., a new species with invitro mucus-binding activity isolatedfrom pig intestine《.Int J Syst EvolMicrobiol》.2000,第251-258页.Repally Ayyanna et al.Anti-inflammatory and Antioxidant Propertiesof Probiotic Bacterium Lactobacillusmucosae AN1 and Lactobacillus fermentumSNR1 in Wistar Albino Rats《.FrontMicrobiol》.2018,第1-13页.姜绍通 等.粘膜乳杆菌发酵乳清生产L-乳酸的研究《.食品科学》.2007,第162-165页.
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公开(公告)号:CN107937615B
公开(公告)日:2021-06-25
申请号:CN201711402234.9
申请日:2017-12-20
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了用于区分猪乙型脑炎病毒野毒株和疫苗株的方法以及相应的引物和探针。本发明首次建立了一种可快速区分五种不同基因型JEV野毒株(I、II、III、IV、V)与疫苗株SA14‑14‑2的荧光PCR检测方法,该检测方法操作简单,全部操作过程不需3小时,不需要病毒的细胞培养,显著缩短了病毒五种不同基因型野毒株与疫苗株鉴别与检测所需时间,并且准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN106048079B
公开(公告)日:2020-03-31
申请号:CN201610296853.3
申请日:2016-05-05
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
Abstract: 本发明公开了一种快速区分猪伪狂犬病毒中国型、欧美型及疫苗株Bartha‑K61的双色荧光检测方法、引物及探针。该方法结合了实时荧光PCR技术及熔解曲线分析技术,根据熔解曲线Tm值差异鉴定猪伪狂犬病毒中国型、欧美型及疫苗株Bartha‑K61;操作简单:只需一个反应即可实现两个基因型及疫苗株Bartha‑K61的鉴别检测;检测速度快且高通量:全部操作过程可在3小时内完成,不需要病毒的细胞培养,极大缩短了猪伪狂犬病毒中国型、欧美型及疫苗株Bartha‑K61鉴别检测所需时间;准确性高、特异性好,重复性好,可以准确、快速、高通量地进行分析,有利于在临床实践中推广应用。
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公开(公告)号:CN106399559A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201611018505.6
申请日:2016-11-16
Applicant: 广东省农业科学院动物卫生研究所
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2527/107 , C12Q2563/107
Abstract: 本发明公开了一种检测猪肺炎支原体的引物对、试剂盒及Syto9荧光定量PCR-HRM检测方法。该方法操作简单,只需在PCR反应之前加荧光饱和染料Syto9即可;检测速度快且高通量,全部操作过程只需2~3小时,极大缩短了检测所需时间;费用低,不需要特异性荧光标记探针,每个样品的饱和染料成本为1.6 RMB;准确性高,相关系数大于0.99;特异性好,可有效区分包括猪鼻支原体、猪滑液支原体等猪病原;灵敏度高,最低检出限可低至4.56拷贝/μL;结合HRM的闭管检测技术可避免假阳性或假阴性的出现,更易于应用与推广。
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