基于CRISPR-Cas12a检测松树脂溃疡病原菌的方法及应用

    公开(公告)号:CN114807311A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210465278.0

    申请日:2022-04-29

    Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a体系可视化检测松树脂溃疡病病原菌(Fusarium circinatum)的检测方法,该方法通过重组酶聚合酶扩增后的目的DNA片段,再在crRNA序列介导下,引导CRISPR‑Cas12a体系对扩增产物进行识别结合并切割目标双链DNA激活非特异性核酸酶功能,然后任意切割体系中的单链DNA荧光探针得到裂解产物,最后通过裂解产物的显色检测进行判断。该检测平台通过重组酶聚合酶扩增及crRNA识别可双重特异地对松树脂溃疡病病原菌进行检测,特异性强,可视化强,且在灵敏度上可低至1 pg·μL‑1,对于港口的进境植物上携带的松树脂溃疡病病原菌实现即检即防。

    樟疫霉效应子蛋白Avh57及其应用

    公开(公告)号:CN113121659B

    公开(公告)日:2021-10-22

    申请号:CN202110441062.6

    申请日:2021-04-23

    Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的效应子蛋白Avh57及其编码基因和应用。该蛋白是具有序列表中的SEQ ID NO:1的氨基酸序列。实验证明,该基因控制表达的蛋白质能够参与樟疫霉侵染本氏烟草的过程,该基因能够抑制凋亡前体蛋白Bax诱导的植物细胞死亡的功能。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息,以及建立植物病原卵菌病害的综合防治技术策略均有重要意义。

    樟疫霉效应子蛋白Avh87及其编码基因与应用

    公开(公告)号:CN109912699B

    公开(公告)日:2020-09-29

    申请号:CN201910369504.3

    申请日:2019-05-05

    Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的效应子蛋白Avh87及其编码基因和应用。该蛋白是具有序列表中的SEQ ID No.1的氨基酸序列的蛋白质;表达该蛋白的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID No.2所示。实验证明,该基因能够抑制凋亡前体蛋白Bax诱导的植物细胞过敏反应或者致病疫霉菌激发子INF1诱导的植物细胞死亡的功能。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息,以及建立植物病原卵菌病害的综合防治技术策略都有重要意义。

    重组酶介导等温扩增-侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合及其应用

    公开(公告)号:CN109988823A

    公开(公告)日:2019-07-09

    申请号:CN201910404137.6

    申请日:2019-05-15

    Abstract: 本发明公开了一种重组酶介导等温扩增‑侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合及其应用方法。采用所述引物及探针组合检测橡树疫霉的具体方法为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用LFD进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有橡树疫霉;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有橡树疫霉。本发明所使用的引物及探针组合用于RPA‑LFD特异性强,灵敏度高,为橡树疫霉的检测提供了新的技术平台。

    一种基于RPA-侧流层析技术检测茄腐镰孢菌的引物和探针组合及其应用

    公开(公告)号:CN109825628A

    公开(公告)日:2019-05-31

    申请号:CN201910241240.3

    申请日:2019-03-28

    Abstract: 本发明公开了一种基于RPA-侧流层析技术检测茄腐镰孢菌的引物及探针组合及其应用。所述应用具体为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有茄腐镰孢菌;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有茄腐镰孢菌。本发明所使用的引物及探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在质控区有阳性对照,增加了检测的灵敏性,为茄腐镰孢菌的检测提供了新的技术平台,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对苗圃地或者发病植株中的茄腐镰孢菌进行检测。

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