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公开(公告)号:CN109988860B
公开(公告)日:2022-08-30
申请号:CN201910194831.X
申请日:2019-03-14
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种用于检测冬生疫霉的引物及探针组合物及其试剂盒和检测方法,该引物和探针序列为:RPA‑PSYPT‑F:5'‑TTCCACCCTTCCACCAGACTGCTGAGGAGG‑3',RPA‑PSYPT‑R:5’‑[Biotin]TGTTAGCTGCGTGTTCGTTGGTCACCCCAGA‑3’,SYPT‑P:5’‑[FAM]CTTCTGTGATTTATCCAGAAAATCCGTACGAT‑THE‑GAGCTGGACGGCAAGA[C3‑spacer]‑3’。本发明所使用的引物探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在检测区的有阳性反应,增加了检测的灵敏性。
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公开(公告)号:CN114807311A
公开(公告)日:2022-07-29
申请号:CN202210465278.0
申请日:2022-04-29
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6816 , C12Q1/6895 , C12R1/77
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas12a体系可视化检测松树脂溃疡病病原菌(Fusarium circinatum)的检测方法,该方法通过重组酶聚合酶扩增后的目的DNA片段,再在crRNA序列介导下,引导CRISPR‑Cas12a体系对扩增产物进行识别结合并切割目标双链DNA激活非特异性核酸酶功能,然后任意切割体系中的单链DNA荧光探针得到裂解产物,最后通过裂解产物的显色检测进行判断。该检测平台通过重组酶聚合酶扩增及crRNA识别可双重特异地对松树脂溃疡病病原菌进行检测,特异性强,可视化强,且在灵敏度上可低至1 pg·μL‑1,对于港口的进境植物上携带的松树脂溃疡病病原菌实现即检即防。
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公开(公告)号:CN114685631A
公开(公告)日:2022-07-01
申请号:CN202210450845.5
申请日:2022-04-27
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的SCR效应子蛋白SCR93258及其编码基因和应用。该蛋白的氨基酸序列为SEQIDNo.1,编码改氨基酸的核苷酸序列为SEQIDNo.2,实验证明,该基因控制表达的蛋白质能够参与疫霉侵染本氏烟草的过程,引起凋亡前体蛋白Bax诱导的植物植物细胞死亡。本发明对于充实植物樟疫霉与寄主互作的分子机制,以及建立植物樟疫霉病害的综合防治技术都有重要意义。
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公开(公告)号:CN113105533B
公开(公告)日:2022-02-22
申请号:CN202110376846.5
申请日:2021-04-08
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的效应子蛋白Avh49及其编码基因和应用。该蛋白是具有序列表中的SEQIDNO:1的氨基酸序列。实验证明,该基因控制表达的蛋白质能够参与樟疫霉侵染本氏烟草的过程,具有诱导植物细胞死亡的功能。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息,以及建立植物病原卵菌病害的综合防治技术策略均有重要意义。
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公开(公告)号:CN113121659B
公开(公告)日:2021-10-22
申请号:CN202110441062.6
申请日:2021-04-23
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的效应子蛋白Avh57及其编码基因和应用。该蛋白是具有序列表中的SEQ ID NO:1的氨基酸序列。实验证明,该基因控制表达的蛋白质能够参与樟疫霉侵染本氏烟草的过程,该基因能够抑制凋亡前体蛋白Bax诱导的植物细胞死亡的功能。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息,以及建立植物病原卵菌病害的综合防治技术策略均有重要意义。
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公开(公告)号:CN112852648B
公开(公告)日:2021-08-31
申请号:CN202110214342.3
申请日:2021-02-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了樟疫霉原生质体遗传转化菌株的筛选及其转化体系的建立。本发明筛选一株致病性最强的樟疫霉菌株ATC 15400,通过PEG/CaCl2介导的方法将含有筛选标记的绿色荧光蛋白转到樟疫霉菌株ATC 15400基因组中,在G418选择培养基上筛选转化子。本发明实现了稳定高效的樟疫霉原生质体遗传转化,建立了一套完整的遗传转化方法,获得表达绿色荧光信号且稳定遗传的转化子,转化效率高、稳定性好。
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公开(公告)号:CN112852648A
公开(公告)日:2021-05-28
申请号:CN202110214342.3
申请日:2021-02-26
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了樟疫霉原生质体遗传转化菌株的筛选及其转化体系的建立。本发明筛选一株致病性最强的樟疫霉菌株ATC 15400,通过PEG/CaCl2介导的方法将含有筛选标记的绿色荧光蛋白转到樟疫霉菌株ATC 15400基因组中,在G418选择培养基上筛选转化子。本发明实现了稳定高效的樟疫霉原生质体遗传转化,建立了一套完整的遗传转化方法,获得表达绿色荧光信号且稳定遗传的转化子,转化效率高、稳定性好。
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公开(公告)号:CN109912699B
公开(公告)日:2020-09-29
申请号:CN201910369504.3
申请日:2019-05-05
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种来源于樟疫霉的效应子蛋白Avh87及其编码基因和应用。该蛋白是具有序列表中的SEQ ID No.1的氨基酸序列的蛋白质;表达该蛋白的核苷酸序列如序列表中的SEQ ID No.2所示。实验证明,该基因能够抑制凋亡前体蛋白Bax诱导的植物细胞过敏反应或者致病疫霉菌激发子INF1诱导的植物细胞死亡的功能。本发明对于充实植物病原卵菌与寄主互作的分子机制资料信息,以及建立植物病原卵菌病害的综合防治技术策略都有重要意义。
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公开(公告)号:CN109988823A
公开(公告)日:2019-07-09
申请号:CN201910404137.6
申请日:2019-05-15
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6844 , C12Q1/6895 , C12Q1/04 , C12N15/11 , C12R1/645
Abstract: 本发明公开了一种重组酶介导等温扩增‑侧流层析技术检测橡树疫霉的引物和探针组合及其应用方法。采用所述引物及探针组合检测橡树疫霉的具体方法为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用LFD进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有橡树疫霉;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有橡树疫霉。本发明所使用的引物及探针组合用于RPA‑LFD特异性强,灵敏度高,为橡树疫霉的检测提供了新的技术平台。
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公开(公告)号:CN109825628A
公开(公告)日:2019-05-31
申请号:CN201910241240.3
申请日:2019-03-28
Applicant: 南京林业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA-侧流层析技术检测茄腐镰孢菌的引物及探针组合及其应用。所述应用具体为:1)提取待测样本DNA;2)以DNA为模板,进行RPA扩增;3)应用侧流层析试纸条进行扩增产物检测;当试纸条出现两条棕色条带,一条位于质控区内,一条位于检测区,则结果为阳性,表明样本中含有茄腐镰孢菌;当试纸条只有质控区出现一条棕色条带,检测区没有条带,则结果是阴性,表明样本中不含有茄腐镰孢菌。本发明所使用的引物及探针组RPA扩增效果好,条带特异性强,与其他病菌无交叉反应,在质控区有阳性对照,增加了检测的灵敏性,为茄腐镰孢菌的检测提供了新的技术平台,同时在病害侵染初期鉴定出病原物,能够对苗圃地或者发病植株中的茄腐镰孢菌进行检测。
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