一种叶片组织自由基测定的原位显色和定量的方法

    公开(公告)号:CN102147359A

    公开(公告)日:2011-08-10

    申请号:CN201110000246.5

    申请日:2011-01-04

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种叶片组织自由基测定的原位显色和定量的方法,属于叶片自由基测定领域。其步骤为:第一步:采集植物新鲜叶片,快速漂洗干净;第二步:叶片自由基显色反应,1)超氧阴离子自由基:将叶片置于真空抽滤装置内,加入含SOD酶和MnCl2的溶液,抽真空,效果以叶片表面冒出明显气泡为宜;2)过氧化氢自由基:将叶片置于真空抽滤装置内,加入含抗坏血酸和mm过氧化氢酶的溶液,抽真空,效果以叶片表面冒出明显气泡为宜。第三步:脱除叶片叶绿素,清洗叶片并扫描成像用于软件分析定量。本发明能够直观地显示叶片组织中O2.-和H2O2的非均匀分布状况,可实现较为准确的半定量,成本低,操作简单,易推广。

    受菲、芘或五氯苯酚污染土壤的植物修复方法

    公开(公告)号:CN101648205B

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN200910184200.6

    申请日:2009-08-21

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 受菲、芘或五氯苯酚污染土壤的植物修复方法,属于土壤环境污染治理领域。其步骤为:(A)测量土壤中菲和芘或五氯苯酚的含量;(B)将金丝垂柳插种或者种植深根性植物辣根或者同时插种金丝垂柳和种植深根性植物辣根。步骤B中的柳树为金丝垂柳J1011(Salixxjiangsuensis CL.1011),菲、芘和五氯苯酚的含量为每5、50或1mg/kg土壤时每平方米种植4~6株。本发明较好而能稳定地去除土壤中的有机物,符合了因地制宜的原则,将自然力量有效地应用起来;将金丝垂柳和深根性植物辣根组合使用,使得污染物能够更好的得到富集,处理效果强于分别单独的处理效果之和。

    一种提取蚯蚓体腔细胞的溶液及超声方法

    公开(公告)号:CN101638634B

    公开(公告)日:2011-07-20

    申请号:CN200910034261.4

    申请日:2009-09-03

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种提取蚯蚓体腔细胞的溶液及超声方法,属于生物工程技术领域。提取蚯蚓体腔细胞的溶液,以每3mL计其中含有60-70mM NaCl、重量含量5%-6%ethanol、50-60mM guaicol glyceryl ether和5-6mM EGTA的PBS缓冲液。操作步骤:第一步,蚯蚓清肠,用PBS缓冲液反复清洗;第二步,将蚯蚓放入.冰冷提取体腔细胞的溶液中,迅速以超声进行提取;第三步,移去蚯蚓,加入LBBS缓冲液清洗,离心,去上清,所得沉淀为体腔细胞;第四步,加入细胞液孵育;第五步,台盼蓝染色、镜检,计算细胞存活率。本发明所提取的体腔细胞数量多,成活率高,能满足细胞凋亡以及单细胞凝胶电泳实验的需要,能用于对土壤污染进行早期诊断,实现早期预警的作用。

    受菲、芘或五氯苯酚污染土壤的蚯蚓强化修复方法

    公开(公告)号:CN101648206A

    公开(公告)日:2010-02-17

    申请号:CN200910184601.1

    申请日:2009-08-21

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 受菲、芘或五氯苯酚污染土壤的蚯蚓强化修复方法,属于土壤环境污染治理领域。其步骤为:(A)定期测量土壤中菲和芘或五氯苯酚的含量;(B)加入蚯蚓或者蚯蚓以及秸秆或蚯蚓与金丝垂柳。上面所述的蚯蚓品种为M.guillelmi食土蚯蚓,加入方式为以人工投放的方式单独投入或与金丝垂柳组合投入或与秸秆组合投入。步骤B中菲、芘和五氯苯酚的含量为每5、50和1mg/kg时金丝垂柳种植密度为4~6株每平方米。本发明采用的蚯蚓在快速去除土壤污染物的同时,可大幅度改善耕作土壤质量,提升其农业再利用价值;与土壤的自然生态过程比较协调;将其进一步与木本植物修复相结合,蚯蚓在进行有机物代谢的同时也促进了木本植物对有机物的吸收利用。

    一种结合态磷化氢的提取方法及装置

    公开(公告)号:CN100590066C

    公开(公告)日:2010-02-17

    申请号:CN200810023259.2

    申请日:2008-04-03

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种结合态磷化氢的提取方法及装置,属于环境监测技术领域。本发明装置包括气体取样器,气体取样器与预吸收管连接,预吸收管的另一端连接避光密闭试管,避光密闭试管连通另一个避光密闭试管,该避光密闭试管的另一端连接注射器。其提取方法步骤主要包括:样品的采集;待测样品在厌氧避光密闭体系中用酸或碱液消解;消解出的气体用固体氢氧化钠粉末预吸收,去除消解过程产生的酸性气体和水汽;消解出的气体样品采用二次在线冷阱快速富集配合气相色谱-NPD法测定磷化氢含量。磷化氢检测灵敏度高,检测限低,达到了0.01pg,适用于不同环境样品中结合态磷化氢气体的测定。用酸消解时,亦可适用于硫化氢、甲烷等还原性气体的测定。

    一种测定蚯蚓体内羟基自由基的方法

    公开(公告)号:CN101639454A

    公开(公告)日:2010-02-03

    申请号:CN200910034260.X

    申请日:2009-09-03

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种测定蚯蚓体内羟基自由基的方法。首先将充分暴露的蚯蚓清肠,清洗,在密闭的已经除氧的密闭操作箱中进行自由基的PBN捕获,最后用EPR技术进行测定。本发明的优点在于:操作较为简单,容易掌握,并能在很短的时间内测得蚯蚓的羟基自由基;根据EPR谱图的超精细结构常数和谱图的形状分析,发现所测定的自由基是羟基自由基,是目前测定羟基自由基最直接、最准确有效的方法;具有较好的剂量效应关系。研究结果显示羟基自由基的强度与暴露物的浓度存在着较好的剂量-效应关系。

    一种用于治理重金属污染土壤的调控剂及其制备和使用方法

    公开(公告)号:CN100465137C

    公开(公告)日:2009-03-04

    申请号:CN200710019264.1

    申请日:2007-01-10

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了用于治理重金属污染土壤的调控剂及其制备和使用方法,首先将动物骨头经加工提取的天然羟基磷灰石粉体为主原料,以1∶0.5~1配以适量市售硅钙镁肥,同时以溶液形式添加铁、锌、锰、钼、硼等元素,充分混合后烘干制成粉末调控剂。调控剂元素组成按重量百分比为:CaO 40%~50%、SiO210%~20%、MgO 3%~6%、P2O515%~30%、Al2O35%~10%、K2O 0.1%~0.5%、Fe2O30.1%~1.0%、ZnO 0.3%~0.5%、MnO 0.1%~0.5%,其余为杂质。调控剂使用方法可根据具体情况,按土壤干重0.05%~1.0%的比例添加调控剂,充分混匀。本发明的优点在于:原料来源广泛,生产工艺简单、成本低廉、能同时固定多种重金属,修复效果好,用量少且不出现二次污染,不影响土壤结构,并能提供多种养分,可部分替代化肥使用。

    一种淋洗修复重金属-有机物复合污染土壤的方法

    公开(公告)号:CN101293254A

    公开(公告)日:2008-10-29

    申请号:CN200810123622.8

    申请日:2008-05-27

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了一种淋洗修复重金属-有机物复合污染土壤的方法,其步骤为:分析土壤中多环芳烃和重金属含量以及土壤基本理化性质;根据土壤有机质及多环芳烃含量稀释乳酸酯至重量百分比为5%~20%,然后根据土壤中重金属的含量加入乙二胺类有机配体,调节pH至中性,配制成淋洗剂;根据土壤干重,按照淋洗剂∶土=10∶1~5∶1加入淋洗剂淋洗土壤24h,分离土壤和上清液;将上清夜首先通过有机吸附树脂进行吸附,然后通过阳离子交换树脂树脂,处理后的淋洗剂可以再次循环利用。本发明有如下的特点和优势:①淋洗液可同时修复土壤重金属-有机物复合污染土壤,且环境风险小;②淋洗液循环利用后减少了淋洗用量,降低了修复成本。

    修复土壤多环芳烃-铜复合污染的淋洗剂及方法

    公开(公告)号:CN101224467A

    公开(公告)日:2008-07-23

    申请号:CN200810019385.0

    申请日:2008-01-04

    Applicant: 南京大学

    Abstract: 本发明公开了修复土壤多环芳烃-铜复合污染的淋洗剂及方法。该淋洗剂由A和B两种试剂组成,A是乳酸酯或重量百分比大于30%的乳酸酯水溶液,B为乙二胺类有机配体或重量百分比大于25%的乙二胺类有机配体水溶液,A和B两种试剂单独包装。修复土壤多环芳烃-铜复合污染的方法步骤为先分析土壤中多环芳烃和重金属含量以及土壤基本理化性质;而后配制淋洗剂;加入淋洗剂淋洗土壤12h以上,分离土壤和上清液。本发明修复效果好,为土壤重金属-有机物复合污染提供了同时修复的方法;乳酸酯来源广,获取易,提高了单独用有机配体作为淋洗剂修复效率,修复成本较低;乳酸酯和有机配体均为可生物降解物质,从而降低了淋洗修复后的环境风险。

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