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公开(公告)号:CN102841126B
公开(公告)日:2015-02-25
申请号:CN201210315398.9
申请日:2012-08-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定菊花花粉与柱头互作差异蛋白的方法,属于菊花蛋白质组学领域。该方法包括:以栽培菊花作母本,野菊为父本进行菊花远缘杂交工作。授粉后1h及24h,剪下已授粉的花序;去除取得的花序中舌状花花瓣及萼片得到雌蕊。所得的雌蕊用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质样品;运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白,并进行生物信息学分析。本发明针对菊花及其近缘属野生种,提供了一种快速准确鉴定菊花花粉与柱头互作过程中的关键差异蛋白,为解决菊花远缘杂交不亲和性提供研究基础。
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公开(公告)号:CN103250495B
公开(公告)日:2014-10-15
申请号:CN201310208052.3
申请日:2013-05-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01C21/00
Abstract: 本发明公开了一种建立高品质切花菊生产定量精准施氮方案的方法,属于花卉栽培领域。它包括以下步骤:a、不同施氮水平下不同时期植株性状指标与土壤含氮量的测定;b、土壤适宜含氮量的确定:对不同时期植株性状指标与土壤含氮量进行相关回归分析,通过回归方程求解得出不同生长时期土壤适宜含氮量;c、适宜施氮量的确定:对采收期植株各性状指标与施氮量进行相关回归分析,得到回归方程,通过回归方程求解得出土壤适宜施氮量。本发明没有地域限制,适合不同的土壤条件及不同品种,实用性强,且所需设备简单,所得结果可直接应用于生产。
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公开(公告)号:CN103250495A
公开(公告)日:2013-08-21
申请号:CN201310208052.3
申请日:2013-05-28
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01C21/00
Abstract: 本发明公开了一种建立高品质切花菊生产定量精准施氮方案的方法,属于花卉栽培领域。它包括以下步骤:a、不同施氮水平下不同时期植株性状指标与土壤含氮量的测定;b、土壤适宜含氮量的确定:对不同时期植株性状指标与土壤含氮量进行相关回归分析,通过回归方程求解得出不同生长时期土壤适宜含氮量;c、适宜施氮量的确定:对采收期植株各性状指标与施氮量进行相关回归分析,得到回归方程,通过回归方程求解得出土壤适宜施氮量。本发明没有地域限制,适合不同的土壤条件及不同品种,实用性强,且所需设备简单,所得结果可直接应用于生产。
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公开(公告)号:CN102242225B
公开(公告)日:2013-05-08
申请号:CN201110203309.7
申请日:2011-07-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种菊花CVB和CChMVd病毒的二重RT-PCR检测方法,属于分子生物学的病毒检测领域,该方法包括:(1)从菊花植株取样并提取总RNA;(2)分别针对CVB和CChMVd病毒设计两对特异性引物:CVB-F,CVB-R;CChMVd-F,CChMVd-R;(3)以随机六聚体为引物进行反转录得到两种cDNA;(4)利用RT-PCR技术扩增所述cDNA,将扩增的产物进行琼脂糖凝胶电泳,得到665bp特异性片段表示感染CVB,得到206bp特异性片段表示感染CChMVd。本发明提供的检测方法可同时检测被CVB和CChMVd复合侵染的病株,检测特异性强,灵敏度高,工序简单,节约成本。
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公开(公告)号:CN102090342B
公开(公告)日:2013-01-16
申请号:CN201110003048.4
申请日:2011-01-10
Applicant: 南京农业大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明涉及一种建立紫花野菊高效再生体系的方法,属于植物生物技术育种领域。以紫花野菊无菌苗叶片为外植体,采用两激素三水平随机区组设计的方法筛选出最佳再生培养基,诱导胚性愈伤组织,经过2-3次继代培养后分化出再生小苗,而后转入生根培养基中生根培养,获得完整植株。本发明首次针对紫花野菊建立了其高频再生体系,为紫花野菊生物技术育种工作提供了理论基础和实验依据,将有效推动菊花生物技术育种进程。
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公开(公告)号:CN102841126A
公开(公告)日:2012-12-26
申请号:CN201210315398.9
申请日:2012-08-30
Applicant: 南京农业大学
IPC: G01N27/62
Abstract: 本发明公开了一种快速鉴定菊花花粉与柱头互作差异蛋白的方法,属于菊花蛋白质组学领域。该方法包括:以栽培菊花作母本,野菊为父本进行菊花远缘杂交工作。授粉后1h及24h,剪下已授粉的花序;去除取得的花序中舌状花花瓣及萼片得到雌蕊。所得的雌蕊用TCA/丙酮沉淀法提取蛋白质样品;运用iTRAQ与质谱技术快速鉴定差异蛋白,并进行生物信息学分析。本发明针对菊花及其近缘属野生种,提供了一种快速准确鉴定菊花花粉与柱头互作过程中的关键差异蛋白,为解决菊花远缘杂交不亲和性提供研究基础。
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公开(公告)号:CN102676545A
公开(公告)日:2012-09-19
申请号:CN201210172706.7
申请日:2012-05-29
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,涉及菊花‘钟山紫桂’生长素响应蛋白Aux/IAA编码基因CmIAA1表达载体构建。本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-CmIAA1是由CmIAA1基因插入到克隆载体pMD19-T simple vector,经BamH I和Xba I双酶切后连接到载体pCAMBIA 1301的BamH I和Xba I位点而得到的重组质粒。将该植物表达载体用于植物遗传转化,CmIAA1基因在CaMV35S启动子的启动下超量表达,大量合成Aux/IAA蛋白,影响生长素信号途径,对植物生长发育产生负调控作用,抑制植物主根伸长,促使侧根增多,并抑制植物整体生长进度。
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公开(公告)号:CN102154316B
公开(公告)日:2012-07-04
申请号:CN201110030101.X
申请日:2011-01-27
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,公开了睡莲花器官发育基因NsAGL6及其植物表达载体和构建方法。睡莲花器官发育基因NsAGL6,序列为SEQ ID NO.1,本发明所构建的表达载体pCAMBIA 1301-220-NsAGL6是由NsAGL6基因连接到线性化的pCAMBIA 1301-220质粒而得到的。将该植物表达载体用于植物遗传转化,NsAGL6基因在CaMV35S启动子的驱动下超量表达,大量合成AGL6蛋白,调控下游基因的表达,使之提前开花,改变植物花型。
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公开(公告)号:CN102161995A
公开(公告)日:2011-08-24
申请号:CN201110049155.0
申请日:2011-03-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,涉及菊属异色菊耐寒基因DdICE1及其表达载体和构建方法。DdICE1基因的序列为SEQ ID NO.1,所述的表达载体是将DdICE1基因插入到gateway入门载体pENTR1A的Sal I和Not I酶切位点之间,重组的pENTR1A-DdICE1质粒Nsi I单酶切线性化后与pEarleyGate103载体质粒进行LR重组反应得到的。直接用于农杆菌介导的遗传转化,创造耐寒新种质,提高植物的耐寒性,可进行植物品种改良。
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公开(公告)号:CN102124950A
公开(公告)日:2011-07-20
申请号:CN201010607838.9
申请日:2010-12-28
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术育种领域,公开了一种获得栽培菊花单倍体的方法。本发明选择栽培菊花品种为“母本”,利用蒙导父本的灭活花粉进行授粉杂交,并采用组织培养手段进行胚珠的离体培养,以克服菊属栽培菊花单倍体的生产和鉴定障碍。对获得的单倍体材料进行形态学鉴定和细胞学鉴定,选择茎、叶、花序、气孔等形态学特征与“母本”不同或出现特异性状单倍体材料,进行细胞学鉴定,若染色体组成为“母本”数目的一半,即为获得的单倍体。应用本方法成功地生产了多个栽培种的单倍体,为菊属植物种质创新和起源进化研究提供了新的材料。
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