一种抗草甘膦植物EPSPS酶双突变体及其克隆、表达与应用

    公开(公告)号:CN111139228B

    公开(公告)日:2021-04-06

    申请号:CN201911422900.4

    申请日:2019-12-31

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种通过基因突变技术对来源于甘蓝型油菜的EPSPS酶进行定向进化,以对其草甘膦抗性进行改良,并公开该突变体及其编码基因在新型耐草甘膦作物培育领域中的应用。本发明所述抗草甘膦植物EPSPS酶双突变体,通过体外定向进化技术改造甘蓝型油菜EPSPS基因BnEPSPS,使之对草甘膦抗性的提高,进而获得具有草甘膦抗性的植物来源的EPSPS双突变体BnEV1和BnEV2。突变体BnEV1和BnEV2酶学性质测定表明草甘膦耐受性显著提升,并验证其应用到植物中提高植物的抗性,可为培育消费者更易接受的转基因抗草甘膦油菜新品种,提供重要的遗传资源,具有广泛的应用价值。

    一种油菜S-腺苷-L-蛋氨酸依赖的甲基转移酶基因BnPMT6及其应用

    公开(公告)号:CN112048515A

    公开(公告)日:2020-12-08

    申请号:CN202010843041.2

    申请日:2020-08-20

    Inventor: 郭亮 鲁少平 唐珊

    Abstract: 本发明公开了一种油菜S‑腺苷‑L‑蛋氨酸依赖的甲基转移酶基因BnPMT6,该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1或SEQ ID NO:2所示。通过获得过表达和突变体材料,分析了转化材料的含油量,发现BnPMT6负调控含油量的积累,同时还调控脂肪酸组成。本发明进一步提供了一种获得高含油量作物的方法:使用农杆菌介导的遗传转化方法将含有油菜S‑腺苷‑L‑蛋氨酸依赖的甲基转移酶基因BnPMT6的CRISPR/Cas9基因编辑载体转化到作物的基因组中,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得基因BnPMT6功能缺失的作物品种。

    GCS基因调控植物磷脂代谢的用途
    34.
    发明公开

    公开(公告)号:CN118272432A

    公开(公告)日:2024-07-02

    申请号:CN202410563233.6

    申请日:2024-05-08

    Inventor: 郭亮 杨报

    Abstract: 本发明公开了GCS基因在调控植物缺磷胁迫条件下磷脂代谢的用途,该基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。通过获得过表达和RNAi干扰材料,分析了遗传转化材料的生长状况和磷素利用情况,发现GCS基因在调控植物在缺磷胁迫条件下的鞘脂代谢和无机磷含量中发挥关键作用,该基因的过表达可促进植物在缺磷胁迫条件下的生长,有利于减少磷肥的使用和水体富磷化,在产业中具有较大的应用价值。

    油菜BnaREM1.3基因及其编码蛋白在调控作物抗旱性中的应用

    公开(公告)号:CN117844860A

    公开(公告)日:2024-04-09

    申请号:CN202311734910.8

    申请日:2023-12-15

    Inventor: 姚璇 房帅 郭亮

    Abstract: 本发明油菜BnaREM1.3基因及其编码蛋白在调控作物抗旱性中的应用。本发明获得了BnaREM1.3基因的过表达株系,发现其抗旱性相比于野生型显著提高,同时,利用CRISPR/Cas9技术得到了BnaREM1.3基因的突变体株系,发现其抗旱性相比于野生型显著降低。综上结果表明,利用油菜BnaREM1.3基因可以创制不同抗旱性且能够稳定遗传的油菜,为油菜的抗旱育种提供了重要的基因资源和种质资源,在油菜分子设计育种中具有广阔的应用前景。

    一种具有草甘膦降解活性的氨膦氧化还原酶及其应用

    公开(公告)号:CN111607573A

    公开(公告)日:2020-09-01

    申请号:CN202010286083.0

    申请日:2020-04-13

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种具有草甘膦降解能力的氨膦氧化还原酶,并进一步公开所述氨膦氧化还原酶及其编码基因在新型耐草甘膦作物的培育以及草甘膦污染生物降解领域中的应用。本发明所述具有草甘膦降解能力的氨膦氧化还原酶,具有全新的草甘膦分解机制,可以特异性切割草甘膦中磷酰基甲基与甘氨酸连接的C-N键,进而产生甘氨酸及其它无毒产物,将该酶编码基因导入大肠杆菌细胞能赋予其对草甘膦较高的抗性,该酶及其编码基因无论在草甘膦污染的降解修复还是在基于遗传工程进行抗草甘膦植物的培育研究中,都具有极大的应用潜力。

    一种适冷的I型5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因

    公开(公告)号:CN111197052A

    公开(公告)日:2020-05-26

    申请号:CN202010178189.9

    申请日:2020-03-14

    Abstract: 本发明属于微生物基因工程技术领域,具体涉及一种适冷的I型5-烯醇丙酮酰莽草酸-3-磷酸合酶基因。所述的I型5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶(EPSPS)基因的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO:1所述,该基因编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所述。所述适冷的I型5-烯醇丙酮莽草酸-3-磷酸合酶基因是根据Genbank中报导的同属嗜盐白蚁菌Isoptericola sp.GR1TH_0001的aroA基因保守序列克隆得到的,经过生物学试验验证,证明该酶对草甘膦具有较高的耐受性,且具有独特的低温适应性。

    一种植物中脂质的色谱-质谱检测方法

    公开(公告)号:CN110927287A

    公开(公告)日:2020-03-27

    申请号:CN201911299204.9

    申请日:2019-12-17

    Inventor: 郭亮 鲁少平 李清

    Abstract: 本发明公开了一种植物中脂质的色谱-质谱检测方法,包括:(1)样品前处理;(2)液相分离:向所得的脂质粗提物中加入混合内标,然后上UPLC色谱仪进行液相色谱分离,所述UPLC色谱仪的色谱柱为Acquity UPLCTM BEH C18柱,流动相A为水:甲醇:乙腈:300mM乙酸铵=20:20:20:1;流动相B为异丙醇:甲醇:300mM乙酸铵=180:20:3,采用梯度洗脱(3)质谱检测分析。该方法实现了植物甘油酯的全脂质组分析,可以全面地、快速地检测植物中的甘油脂。

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