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公开(公告)号:CN102703480A
公开(公告)日:2012-10-03
申请号:CN201210151938.4
申请日:2012-05-10
Applicant: 宁夏夏盛实业集团有限公司 , 华东理工大学鲁花生物技术研究所
Abstract: 本发明提供了一种全新α-葡聚糖酶的基因序列以及氨基酸序列,提供了含有其基因序列的表达载体和含有该表达载体的基因工程重组菌株,提供了从细丽毛壳中分离纯化一种α-葡聚糖酶的方法。本发明提供的细丽毛壳α-葡聚糖酶基因序列是首次报道,为进一步的研究和开发该酶奠定了基础。本发明提供的重组菌株产生的α-葡聚糖酶为分泌型的胞外可溶性蛋白,简化了后续的提取和纯化工艺,有利于实现大规模的工业化生产,填补我国在α-葡聚糖酶开发方面的空白。
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公开(公告)号:CN102168098A
公开(公告)日:2011-08-31
申请号:CN201110024406.X
申请日:2011-01-21
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明提供了胆固醇氧化酶基因及其编码的胆固醇氧化酶,提供了含有其基因序列的表达载体和含有该表达载体的基因工程重组菌株,提供了制备该胆固醇氧化酶的方法。本发明提供的胆固醇氧化酶重组菌株可用于对3-羟基类甾体化合物进行3位羟基脱氢或甾醇代谢,还可用于降解甾醇的应用,从而解决了甾体医药工业中分枝杆菌和红球菌降解甾醇利用率低的问题。
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公开(公告)号:CN101565709B
公开(公告)日:2010-12-29
申请号:CN200910051613.7
申请日:2009-05-20
Applicant: 华东理工大学
IPC: C12N15/53 , C12N9/02 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12P33/06 , C12N1/20 , C12R1/465 , C12R1/19 , C12R1/34 , C12R1/33 , C12R1/325 , C12R1/32
Abstract: 本发明提供了一种3-甾酮-9α-羟基化酶基因及3-甾酮-9α-羟基化酶还原酶基因,通过构建各种表达载体并转化相关菌株,从而获得多种高表达菌株,包括大肠杆菌、链霉菌和分枝杆菌,还可构建无3-甾酮-9α-羟基化酶活性的分枝杆菌,上述构建的高表达菌株或其粗酶液可以用于催化生产3-甾酮-9-α羟基化甾体化合物,上述无3-甾酮-9α-羟基化酶活性的分枝杆菌可以用于降解甾醇制备雄甾-4-烯-3,17-二酮或雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮,上述这些工程菌株可以大大提高甾体药物的生产效率与产品品质,有助于降低甾体药物生产过程中的能耗、提高药物前体的利用率、简化生产步骤,降低生产成本,且反应条件温和、环境友好,适合于大力推广应用,具有较高的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN101565710A
公开(公告)日:2009-10-28
申请号:CN200910051615.6
申请日:2009-05-20
Applicant: 华东理工大学
IPC: C12N15/53 , C12N9/02 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12P33/02 , C12N1/20 , C12R1/19 , C12R1/32 , C12R1/465
Abstract: 本发明提供了一种3-甾酮-Δ1-脱氢酶,通过构建各种表达载体并转化相关菌株,从而获得了多种工程菌株,包括无3-甾酮-Δ1-脱氢酶活性或高3-甾酮-Δ1-脱氢酶活性的菌株,采用这些工程菌可以有选择地制备雄甾-4-烯-3,17-二酮和9α-雄甾-4-烯-3,17-二酮或雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮和3-酮-1,4-二烯类甾体化合物。上述这些工程菌株,可以大大提高甾体医药生产体系的生产效率与产品品质,有助于降低甾体药物生产过程中的能耗、提高药物前体的利用率、简化生产步骤,降低生产成本,且反应条件温和、环境友好,适合于大力推广应用,具有较高的经济效益和社会效益。
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公开(公告)号:CN119081903A
公开(公告)日:2024-12-06
申请号:CN202411254204.8
申请日:2024-09-09
Applicant: 华东理工大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N15/62 , C12N9/90 , C12N9/88 , C12N15/54 , C12N9/10 , C12N15/60 , C12N15/31 , C12N15/52 , C12P5/02 , C12R1/84
Abstract: 本发明公开了一种高产番茄红素的毕赤酵母基因工程菌,是以发明人之前的研究中将编码GGPPs、番茄红素合成酶和番茄红素脱氢酶的外源基因CrtE、CrtYBW61R和CrtI,以及编码HMG‑CoA还原酶的tHMG1基因定位于胞质中而获得了一株能够合成番茄红素的毕赤酵母菌株TX‑L3为出发菌株,经逐级改造而得到的高产番茄红素工程菌。获得的高产番茄红素的毕赤酵母工程菌中,菌株zw327和zw352的结果最为突出,其中菌株zw327经5升生物反应器发酵的番茄红素产量最高达到8.4g/L;菌株zw352的发酵过程中使用甘油补料结合甲醇诱导的方式,番茄红素产量达到了10.2g/L。
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公开(公告)号:CN115044574B
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202210571548.6
申请日:2022-05-24
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种瓦伦西亚烯合酶突变体以及在酵母中合成瓦伦西亚烯的应用,所述瓦伦西亚烯合酶突变体为:以SEQ ID No.2所示氨基酸序列的野生型瓦伦西亚烯合酶为模板,发生定点突变形成的瓦伦西亚烯合酶突变体M560L。与野生型瓦伦西亚烯合酶相比,本发明提供的瓦伦西亚烯合酶突变体M560L的催化活性得到大幅提高,实现了瓦伦西亚烯的高产量制备,瓦伦西亚烯产量提高了30%,本发明通过构建瓦伦西亚烯合酶突变体提高了异源酶催化底物FPP的活性,为构建酵母高产瓦伦西亚烯细胞工厂奠定了基础。
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公开(公告)号:CN114149956A
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN202111588413.2
申请日:2021-12-23
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开了一种表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌,其是将具有序列如SEQ ID NO.3所示的EstR基因序列的目的片段克隆到表达载体中,然后转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中制备获得。本发明公开了该表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌的应用。本发明还公开了一种微生物酶法拆分制备(R)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸的方法,其是以所述的表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌为催化剂,以外消旋6‑氟‑色满‑2‑羧酸甲酯为底物,进行反应,该方法提供了出色的立体选择性。
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公开(公告)号:CN108138126B
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN201680057388.6
申请日:2016-06-16
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 提供了一种分枝杆菌基因工程菌及其在制备甾体化合物中的应用。所述分枝杆菌基因工程菌是同时缺失酰基辅酶A脱氢酶fadE31、fadE32和fadE33基因的分枝杆菌,所述酰基辅酶A脱氢酶fadE31、fadE32和fadE33基因分别编码具有SEQ ID NO:4、6和8所示氨基酸序列的蛋白质,或上述氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或几个氨基酸衍生的蛋白质,且具有与上述蛋白质相同的功能。
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公开(公告)号:CN112980760A
公开(公告)日:2021-06-18
申请号:CN202110251782.6
申请日:2021-03-08
Applicant: 华东理工大学
Abstract: 本发明公开一种用于生产麦角硫因的基因工程菌株及其构建方法以及应用。所述基因工程菌株的构建包括以下步骤:A:将自杀质粒p19‑Mn_hal电转化导入Mn‑egtABCDE‑hisG菌株感受态,利用同源臂引物进行PCR扩增筛选,获得MnΔhal‑egtABCDE‑hisG菌株;B:将整合型质粒pMV306‑Mn_hisC‑Mn_allB1电转化导入MnΔhal‑egtABCDE‑hisG感受态,平板筛选,验证,即得。本发明通过对自身可产生麦角硫因的新金色分枝杆菌进行代谢工程改造,构建的基因工程菌株生产麦角硫因的能力相对野生型菌株提高18倍,相对出发菌株提高4.1倍,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN112680450A
公开(公告)日:2021-04-20
申请号:CN202110156691.4
申请日:2021-02-04
Applicant: 华东理工大学
IPC: C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/81 , C12N1/19 , C12R1/865
Abstract: 本发明公开一种基于CRISPR‑Cas系统的全基因组随机突变方法及其应用,所述全基因组随机突变方法基于CRISPR‑Cas系统,通过随机gRNA文库的引导,对生命体的全基因组进行散弹式随机切割,在非保真式DNA修补作用下,引发全基因组尺度上的随机突变。该全基因组随机突变方法可用于定向进化以及迭代进化,本发明以酿酒酵母生产β‑胡萝卜素为验证模型,在两个月内,完成了7轮迭代突变筛选,获得产量提高到10.5倍的进化菌株。组学分析表明平均每次操作可引入约122个突变,有50%左右基因的转录水平发生了显著的变化,说明经过突变进化,酵母代谢发生了深度重塑,实验证实本发明是一项简易可控的基因组变异新技术。
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