3-甾酮-△1-脱氢酶基因、相关载体和工程菌及应用

    公开(公告)号:CN101565710A

    公开(公告)日:2009-10-28

    申请号:CN200910051615.6

    申请日:2009-05-20

    Abstract: 本发明提供了一种3-甾酮-Δ1-脱氢酶,通过构建各种表达载体并转化相关菌株,从而获得了多种工程菌株,包括无3-甾酮-Δ1-脱氢酶活性或高3-甾酮-Δ1-脱氢酶活性的菌株,采用这些工程菌可以有选择地制备雄甾-4-烯-3,17-二酮和9α-雄甾-4-烯-3,17-二酮或雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮和3-酮-1,4-二烯类甾体化合物。上述这些工程菌株,可以大大提高甾体医药生产体系的生产效率与产品品质,有助于降低甾体药物生产过程中的能耗、提高药物前体的利用率、简化生产步骤,降低生产成本,且反应条件温和、环境友好,适合于大力推广应用,具有较高的经济效益和社会效益。

    瓦伦西亚烯合酶突变体以及在酵母中合成瓦伦西亚烯的应用

    公开(公告)号:CN115044574B

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202210571548.6

    申请日:2022-05-24

    Abstract: 本发明公开了一种瓦伦西亚烯合酶突变体以及在酵母中合成瓦伦西亚烯的应用,所述瓦伦西亚烯合酶突变体为:以SEQ ID No.2所示氨基酸序列的野生型瓦伦西亚烯合酶为模板,发生定点突变形成的瓦伦西亚烯合酶突变体M560L。与野生型瓦伦西亚烯合酶相比,本发明提供的瓦伦西亚烯合酶突变体M560L的催化活性得到大幅提高,实现了瓦伦西亚烯的高产量制备,瓦伦西亚烯产量提高了30%,本发明通过构建瓦伦西亚烯合酶突变体提高了异源酶催化底物FPP的活性,为构建酵母高产瓦伦西亚烯细胞工厂奠定了基础。

    一种表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌及其应用

    公开(公告)号:CN114149956A

    公开(公告)日:2022-03-08

    申请号:CN202111588413.2

    申请日:2021-12-23

    Abstract: 本发明公开了一种表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌,其是将具有序列如SEQ ID NO.3所示的EstR基因序列的目的片段克隆到表达载体中,然后转化到大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中制备获得。本发明公开了该表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌的应用。本发明还公开了一种微生物酶法拆分制备(R)‑6‑氟‑色满‑2‑羧酸的方法,其是以所述的表达酯酶EstR的大肠杆菌基因工程菌为催化剂,以外消旋6‑氟‑色满‑2‑羧酸甲酯为底物,进行反应,该方法提供了出色的立体选择性。

    一种基于CRISPR-Cas系统的全基因组随机突变方法及其应用

    公开(公告)号:CN112680450A

    公开(公告)日:2021-04-20

    申请号:CN202110156691.4

    申请日:2021-02-04

    Abstract: 本发明公开一种基于CRISPR‑Cas系统的全基因组随机突变方法及其应用,所述全基因组随机突变方法基于CRISPR‑Cas系统,通过随机gRNA文库的引导,对生命体的全基因组进行散弹式随机切割,在非保真式DNA修补作用下,引发全基因组尺度上的随机突变。该全基因组随机突变方法可用于定向进化以及迭代进化,本发明以酿酒酵母生产β‑胡萝卜素为验证模型,在两个月内,完成了7轮迭代突变筛选,获得产量提高到10.5倍的进化菌株。组学分析表明平均每次操作可引入约122个突变,有50%左右基因的转录水平发生了显著的变化,说明经过突变进化,酵母代谢发生了深度重塑,实验证实本发明是一项简易可控的基因组变异新技术。

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