一种快速高效的植物寄生线虫总RNA提取方法及其应用

    公开(公告)号:CN103387977A

    公开(公告)日:2013-11-13

    申请号:CN201310345091.8

    申请日:2013-08-09

    Abstract: 本发明涉及一种快速高效的植物寄生线虫总RNA提取方法及其应用。植物线虫组织破碎方法,采用如下步骤:(1)制备玻璃粉末:将普通玻璃破碎后收集过60目筛子的粉末,用浓盐酸洗后再用去离子水洗至pH7.0,再高温去除RNA酶;(2)搅拌破碎:于无RNA酶离心管中加入玻璃粉末和TRIzol试剂以及线虫体,用微量电动组织匀浆器搅拌玻璃粉末,直至线虫组织破碎。本发明以自制的玻璃粉末结合TRIzol试剂实现对线虫的快速充分研磨,具有操作简便、无需特殊仪器设备和可靠性高等优点,应用该方法能够提取高质量的总RNA。该方法可在不同实验条件的实验室进行推广应用,在植物线虫分子生物学研究中具有极高的应用价值。

    一种罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取方法及其应用

    公开(公告)号:CN102382819B

    公开(公告)日:2013-08-07

    申请号:CN201110340265.2

    申请日:2010-02-25

    Abstract: 本发明“一种罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取液、提取方法及其应用”,涉及植物病害的分子生物学检测技术。所述DNA提取液其组分及各组分的终浓度如下:Tris-HCl200mM,PH 8.0;NaCl 400mM;EDTA 10mM,PH 8.0;CTAB 3%(W/V);β-巯基乙醇4%(V/V)。该提取液作为罹病植物香蕉穿孔线虫DNA的裂解液,能够将感染植物组织的极少量的香蕉穿孔线虫的DNA完好地提取出来,而不受植物组织的酚类、蛋白酶类、解酶等物质的降解。本发明提供的DNA提取液及提取方法是采用PCR等分子生物学手段早期监测香蕉穿孔线虫感染以便于早期治理预防感染的重要基础。

    一种禾谷孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用

    公开(公告)号:CN103045751A

    公开(公告)日:2013-04-17

    申请号:CN201310020383.4

    申请日:2013-01-20

    Abstract: 本发明涉及一种禾谷孢囊线虫LAMP快速检测方法及应用。根据克隆得到的禾谷孢囊线虫RAPD序列,设计筛选5条LAMP引物HA5-F3、HA5-B3、HA5-FIP、HA5-BIP和HA5-LB;配制并优化了LAMP反应体系。通过对禾谷孢囊线虫DNA提取,环介导等温扩增、扩增产物显色和观察,从而快速检测出禾谷孢囊线虫。本发明的检测方法特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便,在禾谷孢囊线虫快速检测和禾谷孢囊线虫病的早期和田间诊断方面具有很高的应用价值。

    一种象耳豆根结线虫LAMP快速检测方法及应用

    公开(公告)号:CN102174650A

    公开(公告)日:2011-09-07

    申请号:CN201110034960.6

    申请日:2011-02-09

    Abstract: 本发明涉及“一种象耳豆根结线虫LAMP快速检测方法及应用”。根据克隆测序的象耳豆根结线虫ITS序列,在其序列保守区域设计了5条LAMP引物MEF3、MEB3、MEFIP、MEBIP和MELB;并配制了LAMP反应体系。通过对象耳豆根结线虫DNA提取,象耳豆根结线虫等温扩增、扩增产物显色检测,从而快速检测出象耳豆根结线虫。本发明的检测方法特异性强、灵敏度高、成本低廉、操作简便,在象耳豆根结线虫现场快速检测和象耳豆根结线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。

    一种香蕉穿孔线虫早期分子检测方法

    公开(公告)号:CN101792755A

    公开(公告)日:2010-08-04

    申请号:CN201010113930.X

    申请日:2010-02-25

    Abstract: 本发明为“一种香蕉穿孔线虫早期分子检测方法”,属生物技术领域。本发明涉及罹病植物组织中香蕉穿孔线虫DNA提取液配方和提取方法;香蕉穿孔线虫特异性引物RsF1/RsR1序列;香蕉穿孔线虫特异性引物和D3A和D3B的引物结合的一步双重PCR的反应液的配方和快速特异性扩增程序的检测技术方法。本发明的检测方法在提高分子检测灵敏度的同时且快速准确,在香蕉穿孔线虫检测和香蕉穿孔线虫病的早期诊断方面具有很高的应用价值。

    一种Aeu8-dsRNA在防控象耳豆根结线虫中的应用

    公开(公告)号:CN119876170A

    公开(公告)日:2025-04-25

    申请号:CN202510369492.X

    申请日:2025-03-27

    Abstract: 本发明公开了一种Aeu8‑dsRNA在防控象耳豆根结线虫中的应用,属于生物技术领域。本发明以象耳豆根结线虫为实验材料,通过体外合成dsRNA技术,筛选获得能够显著致死象耳豆根结线虫的基因Aeu8,并采用dsRNA与纳米材料复配技术,将dsRNA和纳米载体SPc按照特定比例复配制备生物农药纳米制剂,通过盆栽灌根实验发现,其相比单独使用dsRNA显著提高了防控象耳豆根结线虫的目的。本发明为象耳豆根结线虫防控药物筛选提供了新的靶标基因,并为防控象耳豆根结线虫提供了新的生物农药纳米制剂组合,为有效防控象耳豆根结线虫提供了新方法。

    甜菜孢囊线虫Hs8H07蛋白、编码基因及其应用

    公开(公告)号:CN114891083B

    公开(公告)日:2023-07-14

    申请号:CN202210448128.9

    申请日:2022-04-26

    Abstract: 本发明公开了甜菜孢囊线虫Hs8H07蛋白、编码基因及其应用,涉及生物技术领域。所述蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示。本发明还提供一种编码该蛋白的基因。本发明提供的编码该蛋白的基因Hs8H07,在甜菜孢囊线虫食道腺表达;亚细胞定位实验结果表明Hs8H07蛋白定位于烟草叶片细胞的细胞核和细胞膜上。利用寄主介导的RNAi沉默处理沉默Hs8H07基因后,甜菜孢囊线虫的白雌虫量与对照野生型植株相比,显著降低。而在拟南芥中过表达Hs8H07基因,甜菜孢囊线虫的白雌虫量与对照野生型植株相比,显著增加。表明该基因在甜菜孢囊线虫寄生致病过程中具有重要作用,可作为植物抗线虫工程的靶标基因。

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