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公开(公告)号:CN107400652A
公开(公告)日:2017-11-28
申请号:CN201710553940.7
申请日:2017-07-09
Applicant: 东北林业大学
CPC classification number: C07K14/32 , C12N9/0006 , C12N9/93 , C12N15/70 , C12Y604/01002
Abstract: 本发明涉及了一种动态调控3-羟基丙酸(3HP)合成的工程菌构建方法,其特征在于:基于枯草芽孢杆菌的转录因子FapR具有与丙二酸单酰CoA应答的特性,将3HP合成通路中合成丙二酸单酰CoA的acc基因和转化丙二酸单酰CoA为3HP的mcr基因设置在启动子下游,根据丙二酸单酰CoA浓度动态调控这两个基因的转录,通过丙二酸单酰CoA浓度动态调节3HP合成的工程菌,解决目前丙二酸单酰CoA对菌体的毒害、3HP合成效率低的问题,为大规模生产3HP提供技术支持。
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公开(公告)号:CN102907318B
公开(公告)日:2015-09-09
申请号:CN201110217125.6
申请日:2011-08-01
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明主要提供一种高效无性快繁三七再生植物的方法利--用生物反应器大量培养三七体细胞胚。从不定根诱导获得的三七胚性愈伤组织增殖后,在含有0.5mg/L 2,4-D的MS条件下,100%的愈伤组织都产生了球形体细胞胚,且产生的体细胞胚数量最多。10.0g(约1.65×104个)球形胚培养在3L生物反应器内,反应器内装有1.5L不加任何植物生长调节剂的1/2MS液体培养基,空气通入量为0.15vvm。4周后球形胚都发育为子叶体细胞胚,且生物生长量增加约为原来的8倍。液体或固体培养获得的子叶体细胞胚在含加有2.0mg/LGA3的1/2MS培养基中萌发成正常体细胞胚苗,继而在不含任何植物生长调节剂的1/2MS培养基中继代。生长良好的幼苗移栽入装有人工土壤(泥煤苔和泥质岩(3∶1,v∶v))的营养杯中,温室训化成活率较高。
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公开(公告)号:CN102898493B
公开(公告)日:2015-07-29
申请号:CN201110214567.5
申请日:2011-07-29
Abstract: 本发明提供了一种利用3~10L小型玻璃生物反应器培养人参不定根的方法。装有1.5L1/2SH+3.0mg/LIBA+20g/L蔗糖培养基的3L反应器内接种8g长度约1.0cm的人参不定根;5和10L生物反应器中分别装有3L和6L上述同样培养基,分别接种15g和30g同样的人参不定根;同样都培养7周进行收获,人参不定根中三种人参皂苷Rg1、Re、Rb1的累积最佳。本发明可为人参不定根的小规模和进一步扩大化培养提供技术支持和参数,也可以为大规模生产提供生产人参不定根种子的方法。
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公开(公告)号:CN102161971B
公开(公告)日:2013-06-19
申请号:CN201110107458.3
申请日:2011-04-26
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用天然木质纤维素材料产纤维素酶和半纤维素酶的菌剂。该产纤维素酶和半纤维素酶的菌剂活性成分为Achromobacter xylosoxidans、Alcaligenes faecalis、Fusarium sporotrichioides、Fusarium poae。本发明的用于产纤维素酶和半纤维素酶的菌剂中的微生物具有高度的协同作用,自体形成稳定的生态系统。本发明中的菌剂为专门针对于能源作物柳枝稷开发,但不仅限于利用柳枝稷生产纤维素酶及半纤维素酶,还可用于废弃农作物秸秆生产纤维素酶及半纤维素酶。
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公开(公告)号:CN102925413A
公开(公告)日:2013-02-13
申请号:CN201210310304.9
申请日:2012-08-23
Applicant: 大庆麦伯康生物技术有限公司 , 东北林业大学大庆生物技术研究院 , 李玉花
IPC: C12N5/20 , C07K16/40 , G01N33/577 , G01N33/545 , C12R1/91
Abstract: 抗t-PSA单克隆抗体产生的杂交瘤及检测t-PSA试剂盒的制备,属于免疫分析医学领域。本发明提供了一种特异性识别t-PSA的单克隆抗体,产生该单克隆抗体的杂交瘤,以及使用该单克隆抗体检测t-PSA的高灵敏度的方法;还提供了前列腺特异性抗原t-PSA化学发光免疫分析检测试剂盒及其制备方法,该试剂盒包括:t-PSA检测反应板、酶结合物、发光底物、标准品、质控品、浓缩洗涤液。本发明用细胞融合和杂交瘤技术研发出灵敏度高、特异性好的抗体;同时用自主研发抗体将免疫学与化学发光技术相结合,研制出检测范围宽、灵敏度高、操作方便、生产成本低的试剂盒。临床检测人血清中t-PSA的含量,用于前列腺癌早期筛查、制定治疗方案和评估预后提供重要参考依据。
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公开(公告)号:CN102907318A
公开(公告)日:2013-02-06
申请号:CN201110217125.6
申请日:2011-08-01
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明主要提供一种高效无性快繁三七再生植物的方法利--用生物反应器大量培养三七体细胞胚。从不定根诱导获得的三七胚性愈伤组织增殖后,在含有0.5mg/L 2,4-D的MS条件下,100%的愈伤组织都产生了球形体细胞胚,且产生的体细胞胚数量最多。10.0g(约1.65×104个)球形胚培养在3L生物反应器内,反应器内装有1.5L不加任何植物生长调节剂的1/2MS液体培养基,空气通入量为0.15vvm。4周后球形胚都发育为子叶体细胞胚,且生物生长量增加约为原来的8倍。液体或固体培养获得的子叶体细胞胚在含加有2.0mg/LGA3的1/2MS培养基中萌发成正常体细胞胚苗,继而在不含任何植物生长调节剂的1/2MS培养基中继代。生长良好的幼苗移栽入装有人工土壤(泥煤苔和泥质岩(3∶1,v∶v))的营养杯中,温室训化成活率较高。
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公开(公告)号:CN1754422A
公开(公告)日:2006-04-05
申请号:CN200410043906.8
申请日:2004-09-28
IPC: A01G1/04
Abstract: 本发明涉及一种松口蘑人工菌塘的诱导方法,其特征在于:a)容器先用洗涤剂洗净、冲洗并晾干;b)在经70%酒精表面消毒的工作台上,用70%酒精和0.05-1.0%次氯酸钠溶液先后对容器以及容器盖进行喷雾消毒,并保留消毒液5-20分钟,用量为5-20ml消毒液/100ml容器;c)将容器口朝下,放置于经表面消毒的工作台上,自然干燥30-40分钟;d)容器干燥后,将含水量为20%(v/v)、添加了事先用无水乙醇(1.4%,v无水乙醇/v干土)混溶过橄榄油—油浓度为0.5-2.0%(油v/干土v)并经高压灭菌的培养土直接装入容器中,再接入松口蘑菌块或菌液,加盖或封口,在20-30℃黑暗条件下进行诱导培养。本发明成功地进行了松口蘑人工菌塘的诱导,它具有方法简便,适合非实验室操作;成本低廉,适合在松口蘑产区进行实际推广应用,以增加该食用菌的产量。
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公开(公告)号:CN118581137B
公开(公告)日:2025-05-09
申请号:CN202410763908.1
申请日:2024-06-14
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 露地菊甲基转移酶基因CmCMT2和CmCMT2cd在控制露地菊花色中的应用,属于基因工程技术领域。为挖掘能够调控露地菊CmMYB6基因启动子甲基化水平的DNA甲基转移酶,进而对露地菊的花色进行育种,本发明克隆出了能够调控露地菊CmMYB6基因启动子甲基化水平的甲基转移酶基因CmCMT2,并获得了只保留CmCMT2活性域的截短蛋白CmCMT2cd的序列,然后利用失活的Cas9融合CmCMT2或CmCMT2cd,并靶向修饰CmMYB6启动子区特定的区域,通过农杆菌介导的遗传转化方法确定了CmCMT2和CmCMT2cd的功能,并成功地创制了表现出露地菊新花色的突变体,实现了露地菊花色的表观遗传育种。
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公开(公告)号:CN118599892A
公开(公告)日:2024-09-06
申请号:CN202410763906.2
申请日:2024-06-14
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 露地菊甲基转移酶基因CmDRM2a和CmDRM2b在控制露地菊花色中的应用,属于基因工程技术领域。为挖掘能调控露地菊CmMYB6基因启动子甲基化水平的甲基转移酶,对露地菊花色进行育种,本发明克隆了能够调控露地菊CmMYB6基因启动子甲基化水平的甲基转移酶基因CmDRM2a和CmDRM2b,并获得只保留甲基转移酶CmDRM2a活性域的截短蛋白CmDRM2a‑cd,然后利用dCas9融合DNA甲基转移酶靶向修饰CmMYB6启动子区特定的区域,通过遗传转化方法确定甲基转移酶基因CmDRM2a、CmDRM2b和CmDRM2a‑cd的功能,成功地创制了表现出露地菊新花色的突变体,实现了花色表观遗传育种。
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公开(公告)号:CN113136397B
公开(公告)日:2022-05-20
申请号:CN202110326289.6
申请日:2021-03-26
Applicant: 东北林业大学
Abstract: 本发明提供了一种提高草原龙胆基因编辑效率的重组载体及其制备方法与应用,属于生物技术领域。为了提高草原龙胆基因的编辑效率。提高草原龙胆基因编辑效率的重组载体的构建方法是以pGmU6‑GmCRISPR/Cas9载体为原始载体,以草原龙胆的截短EgU6启动子替换原始载体的U6启动子,连接待编辑的草原龙胆基因的SgRNA序列或者以含有Cas9的表达载体1300为原始载体,按顺序依次连接EgU6启动子、待编辑的草原龙胆基因的SgRNA和gRNAscaffold得到重组片段,将重组片段与含有Cas9的表达载体1300连接。草原龙胆高效基因编辑载体为草原龙胆基因功能的研究及新品种的开发提供重要的技术平台。
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