一种环介导等温扩增法鉴定木霉属真菌的方法及引物

    公开(公告)号:CN110982919A

    公开(公告)日:2020-04-10

    申请号:CN201911105127.9

    申请日:2019-11-13

    Abstract: 一种环介导等温扩增法鉴定木霉属真菌的方法及引物,包括上游外引物F3、下游外引物B3、正向内引物FIP、反向外引物BIP和环引物LB。LAMP反应条件:将所述LAMP反应体系的试剂都加入一反应容器内,然后再加入0.25 μL的SYBR Green I核酸凝胶染料;然后将反应容器置于温度为65℃条件下,温育60min;反应结果的测定:无特异性反应为橙色,无荧光;有特异性反应为黄绿色,有荧光。本发明的方法鉴定木霉属真菌与PCR方法相比,特异性更高;同时,采用等温扩增,不需要变性、退化、复性等热循环步骤,效率显著提高。

    一种筛选双孢蘑菇耐高温菌株的方法

    公开(公告)号:CN110257264A

    公开(公告)日:2019-09-20

    申请号:CN201910690248.8

    申请日:2019-07-29

    Abstract: 一种筛选双孢蘑菇耐高温菌株的方法,包括下列步骤:将双孢蘑菇的栽培菌株接种到PDA平板培养基上,培养5-7天后,分别用不同温度进行处理,确定双孢蘑菇菌株的致死温度为N℃;将待筛选的双孢蘑菇菌株接种到PDA平板培养基上生长5-7天,接种的双孢蘑菇菌株长出新鲜的菌丝;将步骤2得到的萌发的菌株连同PDA平板培养基一起在N+1℃条件下进行培养22-26h;将菌落颜色为白色或浅白色的菌落转接到新的PDA平板培养基上生长5-7天,然后在N+1℃条件下进行培养22-26h,接着在25℃条件下继续培养,如果在25℃条件下继续生长,则为双孢蘑菇耐高温菌种。本发明的方法用于鉴定双孢蘑菇耐高温菌株,具有耗时短,操作简便,精准度高,成本低的优点。

    一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基

    公开(公告)号:CN109258305A

    公开(公告)日:2019-01-25

    申请号:CN201811159102.2

    申请日:2018-09-30

    Abstract: 一种促进羊肚菌菌核形成的方法及其使用的液体培养基,包括下列步骤:第一步:在一容器中加入液体培养基,然后进行灭菌;第二步:冷却后,向所述液体培养基接入直径为0.8~1.2cm的羊肚菌原种PDA菌块,然后置于摇床培养箱于暗处培养;第三步:将第二步培养好的羊肚菌的液体种接种到固体培养基上,然后将接种后的培养包放在暗处培养。本发明的方法与现有培养羊肚菌菌核的方法相比,其操作简便,效果更突出,显著地提高了羊肚菌菌核生成的数量,同时为快速筛选生成菌核能力强的菌株提供简单便捷的方法,为后续羊肚菌育种提供筛选的预判依据。

    一种大球盖菇还原菌种的制作方法及栽培应用

    公开(公告)号:CN109220559A

    公开(公告)日:2019-01-18

    申请号:CN201811160855.5

    申请日:2018-09-30

    Abstract: 一种大球盖菇还原菌种的制作方法及栽培应用,该方法打破传统固体菌种的模式,采用液体菌种制作、菌种和培养基质分离、纯菌种运输、目的地加液体还原菌种的新模式,同时配合我们的还原菌种的液体配方:在1L的蒸馏水中加入酵母粉0.01-0.05%,K2HPO4 0.03-0.08%,KH2PO4 0.03-0.08%,MgSO4 0.01-0.05%,复合维生素溶液0.1%(复合维生素溶液为0.1%的盐酸硫胺素以及0.01%的核黄素混合后加水配而制成),即可进行大田或者林下喷洒接种。一方面液体栽培种播种过程简单、制作成本低且发菌快,显著地提高了栽培大球盖菇的效率;另一方面经分离后纯菌种体积小,运输方便,菌种与培养基分离,发热量少,有效避免了菌种运输过程中发热烧菌的发生。

    一种筛选双孢蘑菇温度敏感型菌株的方法

    公开(公告)号:CN107182554A

    公开(公告)日:2017-09-22

    申请号:CN201710520726.1

    申请日:2017-06-30

    CPC classification number: C12Q3/00 C12Q1/02 G01N2333/375

    Abstract: 本发明公开了利用温度筛选适合工厂化调控的双孢蘑菇菌株的方法与应用,属于食用菌育种领域。方法包括处理的温度和温度的处理方式等步骤。与传统方法相比,此方法操作简便,显著性地缩短选育双孢蘑菇菌株的时间。当得到以下双孢蘑菇菌株,只要在实验室提前验证这些菌株对不同温度处理下,菌丝生长速度和菌丝形态,就能初步判定那些菌株对工厂化的调控是比较敏感的,可能比较适合工厂化的生产,这样为后续的栽培实验的验证节省时间和工作量。

    一种获得大球盖菇高产蛋白新菌株的方法

    公开(公告)号:CN118726339A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202411069394.6

    申请日:2024-08-06

    Abstract: 一种获得大球盖菇高产蛋白新菌株的方法,本发明提供的方法操作简单、污染率低和通量高的优点。该方法具体操作步骤如下:(1)将大球盖菇菌丝体破碎静置培养5天;(2)利用均质仪将菌丝体破碎3‑4min;(3)将菌丝片段与10%甘油1:1混合进行ARTP诱变150s;(4)将诱变后的混合物涂布在PDA再生培养基上;(5)挑取单菌落进行培养,然后利用拮抗实验和RAPD技术筛选ARTP诱变的新菌株。进一步对新菌株群体进行高产蛋白筛选,获得新菌株‘Y43’较亲本蛋白含量提高7.8%。此外,本发明可用于多种用途的高通量筛选,例如:用于基质降解效率高、产量高或品质优良菌株的选育。

    一种筛选耐高温的羊肚菌杂交菌株的方法

    公开(公告)号:CN118325773A

    公开(公告)日:2024-07-12

    申请号:CN202410447216.6

    申请日:2024-04-15

    Abstract: 一种筛选耐高温的羊肚菌杂交菌株的方法,包括下列步骤:步骤1:将羊肚菌杂交菌株以及其亲本菌株分别接种于含PDA固体培养基的培养皿中,每培养皿接入直径为0.4‑0.6cm活化菌丝圆片,分别置于18‑22℃、23‑27℃和28‑32℃的条件下进行培养;步骤2:采用十字划线法在培养到第1.8‑2.2d和第2.5‑3.5d时分别进行划线,测量菌丝直径,将第1.8‑2.2d和第2.5‑3.5d的菌丝直径相加,除以生长时间得到平均生长速度;在18‑22℃条件下,筛选菌丝生长速度大于16.5mm/d的杂交菌株;在23‑27℃条件下,筛选菌丝生长速度大于18.5mm/d的杂交菌株;在28‑32℃条件下,筛选菌丝生长速度大于15.0mm/d的杂交菌株;将18‑22℃、23‑27℃和28‑32℃的条件下,属于快速生长的羊肚菌杂交菌株进行重合对照,最终筛选出耐高温的羊肚菌杂交菌株。本发明方的法用于预测羊肚菌杂交菌株的耐高温特性准确率很高。

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