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公开(公告)号：CN105219830A
公开(公告)日：2016-01-06
申请号：CN201410260748.5
申请日：2014-06-12
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种头孢霉素C的制备方法及其所用的基因工程菌，还公开了该基因工程菌的制备方法。所述孢霉素C的制备方法包括以下步骤：(1)将携带如序列表中SEQ ID NO：1所示的核酸的重组表达载体转染顶头孢霉菌(Acremonium chrysogenum)，获得重组表达转化体；(2)发酵培养所得重组表达转化体，从培养物中分离头孢霉素C即得。本发明通过在顶头孢霉CPC高产菌株额外引入AcveA基因，有效提高了CPC合成基因的转录水平，从而通过导入CPC合成调控基因AcveA提高了CPC的产量。
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公开(公告)号：CN104804074A
公开(公告)日：2015-07-29
申请号：CN201410043713.6
申请日：2014-01-29
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
CPC classification number: C07K14/37 , A61K38/00 , C07K2319/20 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种菌丝霉素突变体，编码该菌丝霉素突变体的基因以及该菌丝霉素的制备方法及其应用，所述菌丝霉素突变体的氨基酸序列如序列表中SEQ ID No:2所示，所述菌丝霉素突变体的编码基因的核苷酸序列如序列表中SEQ ID No:3所示。本发明还公开了所述菌丝霉素突变体的融合蛋白以及融合蛋白的编码基因。与现有的菌丝霉素相比，本发明制备所得的菌丝霉素突变体具有更高的抑菌活性，所述菌丝霉素具有用量少，抑菌效果更强的技术效果，具有广阔的医药应用前景。
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公开(公告)号：CN103045575A
公开(公告)日：2013-04-17
申请号：CN201110312977.3
申请日：2011-10-14
Applicant: 上海医药工业研究院 , 中国医药工业研究总院
Abstract: 本发明公开了一种重组L-阿拉伯糖异构酶(L-arabinose isomerase，L-AI)及其基因和制备方法，以及利用该酶制备D-塔格糖(D-tagatose)的方法。尤其用枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)表达L-阿拉伯糖异构酶，获得了具有生物活性的重组L-阿拉伯糖异构酶，该酶更有利于塔格糖的工业化生产。本发明的方法具有简单、高效、周期短的特点。
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公开(公告)号：CN106148313B
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201510167678.3
申请日：2015-04-09
Applicant: 中国医药工业研究总院 , 上海欣生源药业有限公司
IPC: C12N11/08
Abstract: 本发明公开了一种固定化头孢菌素C酰化酶及其制备方法。所述固定化头孢菌素C酰化酶包括ES‑1树脂和固定于ES‑1树脂上的头孢菌素C酰化酶。所述制备方法包括下述步骤：将ES‑1树脂和头孢菌素C酰化酶溶于0.5‑1.0mol/L，pH 7.0‑10.5的磷酸盐缓冲液中，15‑35℃固定化8‑20h。本发明提供了一种与现有技术相比固定化时间短、酶活回收率高的固定化头孢菌素C酰化酶的方法，解决了现有技术高生产成本的问题，更适用于工业生产。
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公开(公告)号：CN106148313A
公开(公告)日：2016-11-23
申请号：CN201510167678.3
申请日：2015-04-09
Applicant: 中国医药工业研究总院 , 上海欣生源药业有限公司
IPC: C12N11/08
Abstract: 本发明公开了一种固定化头孢菌素C酰化酶及其制备方法。所述固定化头孢菌素C酰化酶包括ES-1树脂和固定于ES-1树脂上的头孢菌素C酰化酶。所述制备方法包括下述步骤：将ES-1树脂和头孢菌素C酰化酶溶于0.5-1.0mol/L，pH 7.0-10.5的磷酸盐缓冲液中，15-35℃固定化8-20h。本发明提供了一种与现有技术相比固定化时间短、酶活回收率高的固定化头孢菌素C酰化酶的方法，解决了现有技术高生产成本的问题，更适用于工业生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101935341B
公开(公告)日：2013-07-03
申请号：CN200910054340.1
申请日：2009-07-03
Applicant: 上海医药工业研究院
Abstract: 本发明公开了一种具有β-内酰胺酶抑制活性的多肽及其制备方法和应用。该多肽的氨基酸序列如序列表中SEQ ID NO.6所示，其中，第25位的“Xaa”表示非极性氨基酸残基。该多肽包括36个氨基酸残基，比现有的β-内酰胺酶抑制多肽活性更高，对临床耐药菌肺炎克雷伯氏菌有抑制作用，可以用来与β-内酰胺类抗生素合用来治疗细菌感染。该多肽可以采用基因工程方法制备，适合开发成为临床使用的药物，可以满足生物医药领域发展的需要，具有良好的医药前景。本发明还公开了该多肽的编码基因及其重组表达载体和转化子。
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公开(公告)号：CN101768594B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN200810205094.0
申请日：2008-12-30
Applicant: 上海医药工业研究院
Abstract: 本发明公开一种编码头孢菌素C酰基转移酶的核苷酸序列、其重组表达载体及其转化子。该核苷酸序列是选自下组之一的核苷酸序列：a)序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列；b)与序列表中SEQ ID NO.1所述的核苷酸序列的同源性≥94.4％的核苷酸序列；c)与a)或b)中所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。本发明还公开一种生产7-氨基头孢烷酸的方法，该方法包括培养上述转化子，从中获得7-ACA。本发明首次采用生物工程技术，由工程菌直接生产7-ACA，与现有的化学合成方法以及生物酶催化方法相比，该方法步骤简单，原料广泛，生产过程中无化工污染，大大降低生产成本，将带来巨大的经济效益，具有优良的工业化前景。
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公开(公告)号：CN102453708A
公开(公告)日：2012-05-16
申请号：CN201010514324.9
申请日：2010-10-21
Applicant: 上海医药工业研究院
Abstract: 本发明公开了一种提高天蓝淡红链霉菌(Streptomyces coeruleorubidus)的柔红霉素产量的方法，包括以下步骤：1)构建dauW基因敲除质粒，其含有dauW基因同源重组左臂、标记基因和dauW基因同源重组右臂；2)将步骤1)所得的dauW基因敲除质粒接合转移入天蓝淡红链霉菌，制备天蓝淡红链霉菌的dauW基因敲除(knockout)工程菌；3)培养步骤2)所得的天蓝淡红链霉菌的dauW基因敲除工程菌，从培养物中分离柔红霉素。本发明还提供该天蓝淡红链霉菌的dauW基因阻断突变菌及其制备方法。dauW基因被敲除，dauW基因的表达被完全阻断，而所得的天蓝淡红链霉菌柔红霉素的产量却大大提高，比dauW基因被插入非完全阻断的产量还高，从而为柔红霉素产量的提高提供一个更直接、有效的途径。
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公开(公告)号：CN102443593A
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201010505226.9
申请日：2010-10-13
Applicant: 上海医药工业研究院
IPC: C12N15/63 , C12N15/62 , C12N1/15 , C12N1/19 , C12N1/21 , C12N5/10 , C07K14/00 , C07K1/22 , C07K1/16 , C07K19/00 , A61K38/16 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了一种制备β-内酰胺酶抑制多肽的方法及其中所用的表达载体、融合蛋白等。本发明制备β-内酰胺酶抑制多肽的方法包括以下步骤：1)构建一种表达His tag融合蛋白的重组表达载体，该His tag融合蛋白是β-内酰胺酶抑制多肽-TEV蛋白酶切割位点-His tag的融合蛋白；2)转化宿主细胞，得转化子；3)培养转化体，表达所述的His tag融合蛋白；4)用金属螯合亲和层析法纯化获得His tag融合蛋白；5)用TEV蛋白酶酶切His tag融合蛋白；和6)用凝胶柱层析法分离纯化获得β-内酰胺酶抑制多肽。本发明中TEV蛋白酶的酶切效果理想，并且所用的TEV蛋白酶的价格相对较低，因此β-内酰胺酶抑制多肽的纯化难度以及成本都大大降低。
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公开(公告)号：CN102443047A
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201010503369.6
申请日：2010-10-12
Applicant: 上海医药工业研究院
Abstract: 本发明公开了一种顶头孢霉蛋白质组的制备方法，包括以下步骤：将顶头孢霉菌体用液氮研磨成粉末状后，用TCA-丙酮沉淀法提取总蛋白样品；将所得的总蛋白样品与水化溶液混合后，水化上样，采用IPG固相胶条，然后进行等电聚焦，等电聚焦完成后，将胶条平衡后转移至SDS-PAGE凝胶上，进行电泳，当溴酚蓝指示剂到达底部边缘时停止电泳，得凝胶；将所得的凝胶经染色后，用凝胶扫描仪透射扫描，将得到的图像用软件进行分析。头孢菌素C在生产头孢类抗生素中具有重要地位，可由此开展对顶头孢霉的蛋白质组学研究，为优化头孢菌素产生菌的分子育种及代谢工程打下基础，具有重要的意义。
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