公开(公告)号：CN114875046B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202210598346.0

申请日：2022-05-30

Applicant: 福州大学

Inventor： 林峻 ,  燕天鹤

IPC: C12N15/31 ,  C12N15/55 ,  C12N15/80 ,  C12N15/66 ,  C12N15/64

Abstract: 本发明公开了一种丝状真菌复制子，所述复制子的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。所述复制子是以19种真菌基因组为模板构建宏基因组文库，转化黑曲霉孢子筛选得到，来自厚孢根霉内生菌伯克霍尔德氏菌HKI454基因组。本发明的复制子可以在黑曲霉表达系统中发挥复制功能，并且可以提供比AMA1复制子更高的稳定性，为首次在除构巢曲霉以外的真菌中发现的复制子，丰富了复制子元件库，拓展了丝状真菌利用复制子的选择多样性。

公开(公告)号：CN113388597B

公开(公告)日：2022-06-03

申请号：CN202110624544.5

申请日：2021-06-04

Applicant: 福州大学

Inventor： 林峻 ,  黄佳敏

IPC: C12N9/42 ,  C12N15/56 ,  A01N63/50 ,  A01P3/00

Abstract: 本发明提供了一种具有抗真菌活性的几丁质酶及其基因。所述几丁质酶为几丁质酶Chi136787，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。编码几丁质酶Chi136787的基因，其DNA序列如SEQ ID NO.1所示。几丁质酶Chi136787对真菌具有显著的抑制作用。

公开(公告)号：CN108359746B

公开(公告)日：2021-10-22

申请号：CN201810252672.X

申请日：2018-03-26

Applicant: 福州大学

Inventor： 林峻

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了检测由Hela细胞引起的细胞交叉污染的方法及引物，包括A组引物对和B组引物对，所述方法为：1）以待检细胞培养物上清液作为第一轮PCR模板，以Hela细胞纯培养的上清液作为PCR阳性对照，用A组引物对进行第一轮PCR；2）以第一轮PCR产物作为第二轮PCR模板，用B组引物对进行第二轮PCR；3）琼脂糖凝胶电泳检测第二轮PCR产物，判断待检细胞是否被Hela细胞污染。本发明耗时短、成本低，灵敏度高，传统的STR鉴定法灵敏度低，在作为污染源的细胞数量低于总细胞数量的10%时，STR无法检测到细胞污染，而本发明灵敏度提高到了1%，是STR的10倍。本发明无需提取核酸，无需破坏细胞，可以直接检测，是“无损无创”的检测方法。

公开(公告)号：CN107217064B

公开(公告)日：2019-09-10

申请号：CN201710626682.0

申请日：2017-07-28

Applicant: 福州大学

Inventor： 林峻

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02

Abstract: 本发明公开了一种超氧化物歧化酶基因及其编码蛋白，所述超氧化物歧化酶基因的DNA序列如SEQ ID NO.1所示，该超氧化物歧化酶基因的编码蛋白具有如SEQ ID NO.2所示的蛋白序列。本发明SOD基因编码的超氧化物歧化酶兼具良好的耐热性和抗冻融性，能够广泛应用于化妆品、食品、医药学、环境保护等领域。

公开(公告)号：CN108642084A

公开(公告)日：2018-10-12

申请号：CN201810499834.X

申请日：2018-05-23

Applicant: 福州大学

Inventor： 陈鲤群 ,  刘国娟 ,  林峻 ,  蔡伟文

IPC: C12N15/85

Abstract: 本发明提供一种调控基因表达的方法，包括：确定靶基因以及该靶基因的转录因子结合位点；设计一具有与该转录因子结合位点相同序列的寡聚核苷酸探针；将该寡聚核苷酸探针导入含该靶基因的系统中进行基因表达，在该基因表达过程中，该寡聚核苷酸探针通过对该靶基因转录因子结合位点的竞争性干扰从而调控靶基因表达。本发明基于转录因子能够与DNA序列特异性结合调控基因表达的转录和起始的理论为基础，实验设计一段与转录因子结合位点序列相同的寡聚脱氧核苷酸双链为竞争性探针。该探针由于与细胞内染色体上转录因子结合位点序列相同，则探针和细胞内原有转录因子结合位点产生竞争性结合细胞内转录因子，影响基因的转录即调控基因表达。

公开(公告)号：CN108359746A

公开(公告)日：2018-08-03

申请号：CN201810252672.X

申请日：2018-03-26

Applicant: 福州大学

Inventor： 林峻

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明公开了检测由Hela细胞引起的细胞交叉污染的方法及引物，包括A组引物对和B组引物对，所述方法为：1）以待检细胞培养物上清液作为第一轮PCR模板，以Hela细胞纯培养的上清液作为PCR阳性对照，用A组引物对进行第一轮PCR；2）以第一轮PCR产物作为第二轮PCR模板，用B组引物对进行第二轮PCR；3）琼脂糖凝胶电泳检测第二轮PCR产物，判断待检细胞是否被Hela细胞污染。本发明耗时短、成本低，灵敏度高，传统的STR鉴定法灵敏度低，在作为污染源的细胞数量低于总细胞数量的10%时，STR无法检测到细胞污染，而本发明灵敏度提高到了1%，是STR的10倍。本发明无需提取核酸，无需破坏细胞，可以直接检测，是“无损无创”的检测方法。

公开(公告)号：CN106399379A

公开(公告)日：2017-02-15

申请号：CN201610813633.3

申请日：2016-09-09

Applicant: 福州大学

Inventor： 林峻

IPC: C12N15/87

CPC classification number: C12N15/87

Abstract: 本发明公开了一种在总状毛霉休眠孢子中表达蛋白质的方法，包括总状毛霉培养和孢子收集、总状毛霉孢子预处理以及使用HDEN法电击总状毛霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在总状毛霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速，效果极佳，转化率达到90%以上。

公开(公告)号：CN106381308A

公开(公告)日：2017-02-08

申请号：CN201610813661.5

申请日：2016-09-09

Applicant: 福州大学

Inventor： 林峻

IPC: C12N15/80 ,  C12R1/83

CPC classification number: C12N15/80 ,  C12N2800/10

Abstract: 本发明公开了一种利用外源RNA在扩展青霉休眠孢子中制造蛋白质的方法，包括扩展青霉培养和孢子收集、扩展青霉孢子预处理以及使用HDEN法电击扩展青霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在扩展青霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速，效果极佳，转化率达到90%以上。

公开(公告)号：CN106381307A

公开(公告)日：2017-02-08

申请号：CN201610813520.3

申请日：2016-09-09

Applicant: 福州大学

Inventor： 林峻

IPC: C12N15/80 ,  C12R1/77

CPC classification number: C12N15/80 ,  C12N2800/10

Abstract: 本发明公开了一种直接将外源DNA导入串珠镰刀菌休眠孢子的方法，包括串珠镰刀菌培养和孢子收集、串珠镰刀菌孢子预处理以及使用HDEN法电击串珠镰刀菌孢子三个步骤，得到导入待转化质粒的串珠镰刀菌孢子。本发明用未萌发的孢子来作为导入外源分子的起始材料，并且应用HDEN电转化技术将外源DNA导入串珠镰刀菌休眠孢子，可以省去做孢子萌发这一复杂的步骤，省去传统方法中制备原生质体或农杆菌转化的步骤等，并且转化率高，每个转化反应体系，至少可以达到不少于6000个阳性转化子的效果。

公开(公告)号：CN106244630A

公开(公告)日：2016-12-21

申请号：CN201610812864.2

申请日：2016-09-09

Applicant: 福州大学

Inventor： 林峻

IPC: C12N15/87 ,  C12R1/685

CPC classification number: C12N15/87 ,  C12R1/685

Abstract: 本发明公开了一种使用外源单链RNA在黑曲霉休眠孢子中表达蛋白质的方法，包括黑曲霉培养和孢子收集、黑曲霉孢子预处理以及使用HDEN法电击黑曲霉孢子三个步骤，该方法绕过真菌孢子萌发这个步骤，采用HDEN电转化技术，将体外的单链编码蛋白RNA递送穿过细胞壁和细胞膜，在黑曲霉休眠孢子内表达蛋白质。本发明方法步骤简便快速，效果极佳，转化率达到90%以上。