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公开(公告)号：CN102121032A
公开(公告)日：2011-07-13
申请号：CN201010577432.0
申请日：2010-12-03
Applicant: 浙江大学 , 浙江省淡水水产研究所
IPC: C12N15/85 , C12N15/65 , A01K67/027 , C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种利用pRC/CMV-EGFP创制转绿色荧光蛋白基因叉尾斗鱼方法。是先构建带有绿色荧光蛋白基因的pRC/CMV-EGFP质粒，利用显微注射技术将这种质粒导入到叉尾斗鱼受精卵内，使绿色荧光蛋白基因导入到叉尾斗鱼基因组内，并得到稳定遗传和表达，从而创制成一种转基因叉尾斗鱼，这种转基因叉尾斗鱼既能够用于基因功能研究又提升了其观赏价值。
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公开(公告)号：CN101177692B
公开(公告)日：2010-10-13
申请号：CN200710164477.3
申请日：2007-12-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种利用A3启动子缺陷piggyBac转座子创制转基因家蚕方法。是先切除带有荧光标志基因的piggyBac转座子中A3启动子，利用转基因技术将这种启动子缺陷转座子插入家蚕功能基因的启动子后面，借助功能基因启动子的作用表达荧光标志基因，创制成一种转基因家蚕，这种转基因家蚕能够用于组织特异性表达启动子的筛选和基因功能研究，达到育成具有特异性功能家蚕新品种。
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公开(公告)号：CN101011047A
公开(公告)日：2007-08-08
申请号：CN200710067189.6
申请日：2007-02-06
Applicant: 浙江大学 , 湖州市农业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种利用转基因技术创制抗病毒病家蚕品种的方法。是通过利用piggyBac转座子能够随机插入家蚕基因组的特性，破坏或突变家蚕病毒受体蛋白基因，改变病毒受体蛋白的结构和功能，削弱和降低病毒对家蚕细胞的附着和侵染能力，获得抗病毒病家蚕，再采用抗病毒病的家蚕与经济性状优良的家蚕品种回交、或直接采用优良经济性状的家蚕品种为转基因家蚕材料，各代选种时按标志基因或结合抗病性、以及经济性状双重标准选择，达到在短时间内育成既抗家蚕病毒病、经济性状又优良的家蚕新品种的目的。
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公开(公告)号：CN1912140A
公开(公告)日：2007-02-14
申请号：CN200610052821.5
申请日：2006-08-07
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种转基因昆虫荧光基因表达相对量无损伤测定方法。是通过荧光体视显微镜观察转基因昆虫个体，用数码相机或数码CCD摄影设备摄取图像，利用图像处理软件，将所得图像进行预处理，再将所摄取的RGB彩色图像转化为相应颜色分量的灰度图像，确定二值化分割图像的阈值和用于消除图像二值化后斑点的中值滤波的邻域大小，用matlab应用数学软件计算所得昆虫形体部分荧光值的平均值，作为转基因昆虫荧光基因表达量的相对数值。它可在不损伤昆虫、不需分子生物学或生化测试的情况下，通过荧光观察和数码照像，可获得转基因昆虫荧光基因表达相对量，达到定量地估量转基因效率、估量外源基因与标志基因结合构成的融合蛋白表达量的目的。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1117875C
公开(公告)日：2003-08-13
申请号：CN01103272.3
申请日：2001-01-19
Applicant: 浙江大学 , 浙江省湖州蚕桑科学研究所
IPC: C12Q1/68
Abstract: 用DNA指纹判别家蚕杂交率的鉴定方法，是以蚕卵或蚁蚕为材料，以每一品种的亲本和杂交种为一个组合，分别快速提取DNA模板，与适当的DNA合成引物构成反应体系，扩增特异性的DNA片断，建立每一品种的亲本和杂交种的特征性DNA片段电泳参照图谱，作为杂交率鉴别的依据。再抽取100～1000粒的蚕卵或蚁蚕构成样本，用上述方法建立每一个体的DNA片段电泳图谱，并与参照图谱比较，判断是否是杂交种子，算出样本的杂交率。用数理统计的原理算出由样本杂交率推断总体杂交率的正确性，并设定其为95～99%。
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公开(公告)号：CN111518832B
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202010392628.6
申请日：2020-05-11
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种蜘蛛梨状腺丝蛋白基因序列的应用及其改良家蚕丝性能的方法。蜘蛛梨状腺丝蛋白基因的碱基为由花园银蛛梨状腺丝重复片段单元、络新妇蛛梨状腺丝重复片段单元构成的重复序列，具有改良家蚕丝性能等应用；构建家蚕合成分泌蜘蛛梨状腺丝蛋白基因的载体，再利用显微注射将带有蜘蛛梨状腺丝蛋白基因的质粒与辅助质粒导入到家蚕受精卵内，利用转座子使荧光蛋白基因和蜘蛛梨状腺丝蛋白基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，育成分泌蜘蛛梨状腺丝蛋白的转基因家蚕。本发明发现了一种蜘蛛梨状腺丝蛋白基因的用途，并开发了一种新型家蚕蜘蛛仿生丝的改良家蚕丝性能的生产方法，显著提高了蚕丝的机械性能。
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公开(公告)号：CN106399363B
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201610290166.0
申请日：2016-05-04
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种家蚕中部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒及其构建方法和应用。获得丝胶蛋白1基因启动子、18s rRNA基因启动子、His 6序列、DDDDK、丝素轻链蛋白信号肽、丝素轻链基因3’末端序列、家蚕肌动蛋白基因A3启动子、EGFP基因和SV40的3’末端序列，然后再顺序连接构建成质粒，第一表达框包括A3启动子、EGFP基因和SV40序列，第二表达框包括丝胶蛋白1基因启动子、18s rRNA基因启动子、丝素轻链蛋白信号肽、His 6序列、DDDDK和丝素轻链基因3’末端序列，且在DDDDK和丝素轻链基因3’末端序列之间含有ApaI和NheI两个酶切位点。本发明质粒减少了构建donor质粒的工作量，提高了家蚕丝腺生物反应器工作效率，提高了外源蛋白的表达量。
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公开(公告)号：CN105907786B
公开(公告)日：2019-12-20
申请号：CN201610296590.6
申请日：2016-05-04
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用于表达T4连接酶的家蚕中部丝腺生物反应器双启动子通用型质粒及其应用与方法。质粒以piggyBac转座子为基础并带有Amp抗性基因，包含有作为外源基因的T4连接酶基因和作为标记基因的绿色荧光EGFP基因的功能表达框，质粒用分子生物学方法构建，且DDDDK与丝素轻链基因polyA之间含有ApaI和NheI专一性的两个酶切位点，采用ApaI和NheI双酶切通用型质粒，与T4连接酶基因连接后，与辅助质粒共同注射到家蚕受精卵内，利用转座子特性使绿色荧光蛋白基因和T4连接酶基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，获得转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕丝腺细胞特异地合成分泌T4连接酶蛋白。
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公开(公告)号：CN105969801A
公开(公告)日：2016-09-28
申请号：CN201610290824.6
申请日：2016-05-04
Applicant: 浙江大学
CPC classification number: C12N15/8509 , A01K67/04 , A01K2217/206 , A01K2227/706 , A01K2267/01 , C12N9/93 , C12N15/66 , C12N2800/105 , C12N2800/90 , C12Y605/01001
Abstract: 本发明公开了一种用于表达T4连接酶的家蚕中部丝腺生物反应器通用型质粒及其应用与方法。质粒以piggyBac转座子为基础并带有Amp抗性基因，包含有作为外源基因的T4连接酶基因和作为标记基因的绿色荧光EGFP基因的功能表达框，质粒用分子生物学方法构建，且DDDDK与丝素轻链基因polyA之间含有ApaI和NheI专一性的两个酶切位点，采用ApaI和NheI双酶切通用型质粒，与T4连接酶基因连接后，与辅助质粒共同注射到家蚕受精卵内，利用转座子特性使绿色荧光蛋白基因和T4连接酶基因导入到家蚕基因组内，并稳定遗传和表达，获得转基因家蚕。本发明借助荧光标志基因筛选转基因家蚕，利用该家蚕丝腺细胞特异地合成分泌T4连接酶蛋白。
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