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公开(公告)号：CN119061119A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411227127.7
申请日：2024-09-03
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6809
Abstract: 本发明公开了一种筛选和研究调节鸡性别决定和分化关键因素功能的方法，通过构建E0‑E18.5的转录组文库，进一步分析性别决定和分化的关键因素，以期深入揭示性别决定的复杂机制。从转录水平上系统的阐述鸡性别决定过程中全基因组水平上的表达和转录情况，并结合小分子激活剂和抑制剂处理E18.5d性腺，通过观察性腺组织切片的形态学变化，qRT‑PCR检测性别相关基因的表达，ELISA检测性腺的性激素分泌变化，论证相关因素对于性别控制的影响，为鸡的性别决定机制的相关研究提供有力的参考，也为后续进一步验证能量代谢和表观遗传修饰在鸡性别决定和分化过程中的功能奠定基础。
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公开(公告)号：CN118979088A
公开(公告)日：2024-11-19
申请号：CN202410927510.7
申请日：2024-07-11
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明公开了一种筛选鸡原始生殖细胞发生过程中泛素化修饰靶蛋白的方法，包括以下步骤：提取蛋白并进行胰酶消化；对胰酶消化中得到的肽段进行亲和富集；通过LC‑MS/MS分析亲和富集得到的修饰肽段并进行数据库搜索；样品重复性检验和蛋白差异修饰分析；泛素化功能及泛素化修饰靶点分析。本发明能够高效筛选鸡PGCs发生过程中泛素化修饰靶蛋白；方法简便高效，成本低廉；为研究鸡PGCs发生过程中泛素化的调控机制提供研究思路和理论基础，以解决体外获取鸡PGCs数量不足的问题，为家禽PGCs高效应用作铺垫；具有推广生产潜能和经济效益。
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公开(公告)号：CN113186303B
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202110639335.8
申请日：2021-06-08
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888
Abstract: 本发明涉及一种鸡的品种鉴定方法，包括以下步骤：提取鸡基因组DNA；通过15对微卫星位点对鸡基因组DNA进行STR基因分型测序，统计出测得的等位基因，与该微卫星位点特有等位基因型进行比对，从而鸡品种的品种鉴定；本发明通过使用分子标记技术对纯种和杂交品种实行科学的品种特异性鉴定，操作简单且结果可靠，可以为地方鸡遗传资源保护和合理利用提供科学依据。
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公开(公告)号：CN116855444A
公开(公告)日：2023-10-10
申请号：CN202310819378.3
申请日：2023-07-06
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种鸡原始生殖细胞单克隆细胞系建立的方法，属于畜牧学和生物技术领域；通过自制简易口吸管，用FAcs培养基对PGCs进行稀释，用口吸管分选单个PGCs，在5%CO2、饱和湿度的37℃培养箱中进行培养，每三天换一次培养液，建立PGCs的单克隆细胞系；本发明提供的方法可以在普通实验室高效稳定建立鸡PGCs单克隆细胞系，且不需要复杂昂贵的仪器，分选和建系效率高，为研究鸡PGCs生物学特性提供了一种新的途径，为家禽的良种扩繁、基因修饰及修饰后筛选、家禽分子设计育种和种质资源冷冻保存等提供了新的方法、奠定了实验基础。
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公开(公告)号：CN111650327B
公开(公告)日：2023-06-02
申请号：CN202010685235.4
申请日：2020-07-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N30/88
Abstract: 本发明涉及一种基于非标定量蛋白质组学技术寻找如皋黄鸡不同细胞或组织间差异表达蛋白的方法，包括以下步骤：（1）鸡不同细胞或组织的组织或细胞蛋白提取；（2）对步骤（1）中得到的不同组的细胞或组织蛋白进行胰酶酶解；（3）酶解后的细胞或组织蛋白进行液相色谱‑质谱联用分析；（4）对分析结果进行数据库搜库和注释分析。通过本发明，本发明的优越性在于：1、本发明能够较快的获得不同组织和细胞之间的差异表达蛋白。2、方法简单可行，可重复性强，结果准确。3、该方法适用于其他物种。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116179670A
公开(公告)日：2023-05-30
申请号：CN202310096548.X
申请日：2023-02-10
Applicant: 扬州大学 , 江苏省家禽科学研究所
IPC: C12Q1/6876 , C12N15/11 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明属于基因检测技术领域，本发明提供了一种快速鉴定外源cop‑GFP的方法。本发明根据cop‑GFP的DNA序列设计合成地高辛探针，使用离心柱纯化法提取待测样本的DNA，将所述待测样本的DNA进行煮沸处理后加到薄膜上，将膜DNA面与预杂交液混合进行预杂交，再取出与含地高辛探针的杂交液混合进行杂交过夜，漂洗得探针交联膜，最后使用核酸检测试剂盒对所述探针交联膜进行显影实验，判定结果。本发明可以较快地检测到cop‑GFP绿色荧光在细胞内的表达。且本发明可以一次检测多个样品，并且后续可以通过斑点印迹分析cop‑GFP在细胞内的表达量。
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公开(公告)号：CN114015786A
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202111348108.6
申请日：2021-11-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6851 , G01N33/58 , G01N33/68 , G01N15/14
Abstract: 本发明涉及一种探究胚胎期肌肉细胞形成时间的方法,利用实时荧光定量PCR、流式细胞分析、间接免疫荧光等技术共同探索肌肉细胞形成时间，方法切实可行，可用以大量分析胚盘内肌肉细胞占多个细胞的比例，以及何时肌肉细胞形成并表达标记蛋白，对研究胚盘发育、肌肉细胞形成、建立肌肉细胞形成调控网络等有重要指导意义，极大地丰富了胚胎发育生物学研究；本发明可推广到采用不同种类家禽的胚胎期胚盘，分析胚盘内各种细胞何时形成并分化发育，为研究整体胚胎发育，解密遗传规律奠定基础；本发明鉴定方法更为简便、灵敏和高效，可以检测胚胎期基因和蛋白的微弱表达，能更加真实地反映目的细胞形成情况，也可以应用于其他禽类研究中。
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公开(公告)号：CN113671194A
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN202110965416.7
申请日：2021-08-23
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明涉及一种筛选鸡目的蛋白互作转录因子的方法，本方法适用于建立4.5d鸡胚生殖嵴的cDNA文库，筛选已知基因的互作蛋白。可大量捕捉获得和PGCs形成相关的转录因子，完善相应的信号通路，绘制PGCs的形成调控网络，为大量体外诱导获取PGCs奠定实验数据和理论基础。该方法成本低、易操作、高通量、可达到全基因组水平，弥补了其他探讨蛋白互作方式的不准确性和不全面性，为后期深入探究新蛋白的功能、研究蛋白与蛋白的互作依赖关系等进行铺垫。适用于建立4.5d鸡胚生殖嵴的cDNA文库，筛选已知基因的互作蛋白。采用本方法，可大量捕捉获得和PGCs形成相关的转录因子，完善相应的信号通路，绘制PGCs的形成调控网络，为大量体外诱导获取PGCs奠定实验数据和理论基础。
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公开(公告)号：CN113265450A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110651659.3
申请日：2021-06-11
Applicant: 扬州大学
IPC: C12Q1/6858 , C12Q1/66
Abstract: 本发明涉及一种研究组蛋白H3K4me2酶/转录因子复合体调控靶基因转录的方法，查找目的样本中MLL2/ASH2L/DPY30/WDR5/RBBP5共同富集的基因，筛选出与目的样本相关的候选基因X用作后续实验；构建X基因启动子截短片段的双荧光素酶报告载体，转染293T细胞后，培养48h，收集样本进行双荧光素酶报告检测，确定核心启动区域；对核心启动区域进行生物信息学分析，利用jaspar在线网站，对核心区域可能存在的转录因子进行分析，获得与组蛋白甲基化酶结合区域相同的转录因子，作为候选复合蛋白；分别构建5个组蛋白甲基化酶的标签载体和转录因子的标签载体，利用pulldown实验，检测组蛋白甲基化酶与转录因子的结合；通过本发明，实验设计严谨，应用广泛，在不同生物学过程均适用。
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公开(公告)号：CN111965094A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010853561.1
申请日：2020-08-24
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种比较体外诱导的PGC-like细胞迁移效率的方法，属于生物技术领域。前期通过不同的诱导体系将ESCs或iPS细胞诱导分化形成PGC-like细胞，将获得的PGC-like细胞进行PKH26细胞膜表面标记，然后注射至孵化2.5天的受体鸡胚血管，封口后继续孵化至4.5天，分离鸡胚生殖嵴，进行冰冻切片后在荧光显微镜下观察红色荧光，并通过流式细胞术分析PKH26红色荧光的比例，从而比较不同体系诱导形成的PGC-like细胞的迁移能力。结果发现能够明确对比出体外不同体系诱导的PGC-like细胞的迁移能力的差异。本发明切实可靠，严谨准确，成效显著，为研究分析体外诱导的PGCs迁移归巢至生殖嵴的能力提供了一种新颖可行且高效的实验方法。
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