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公开(公告)号：CN118256446A
公开(公告)日：2024-06-28
申请号：CN202410446996.2
申请日：2024-04-15
Applicant: 扬州大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/34 , C12N7/00 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/91 , C12R1/93
Abstract: 本发明涉及一种稳定表达非洲猪瘟病毒(ASFV)p30抗原的MA104‑p30细胞系及其构建方法和应用，属于基因工程领域，构建的细胞系不仅能用于ASFV抗体的检测，还可用于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的病毒快速增殖。所述的细胞系构建时以慢病毒作为ASFV CP204L基因传递载体，通过药物筛选、细胞克隆，获得稳定表达ASFV p30抗原的MA104‑p30细胞系，可用于ASFV抗体的间接免疫荧光检测；除此之外，该MA104‑p30细胞系中PIAS1基因表达高于正常的MA104细胞系，可促进PRRSV的增殖，在猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)疫苗生产上有应用前景。
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公开(公告)号：CN109254155B
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN201811112387.4
申请日：2018-09-25
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种检测非洲猪瘟病毒抗原胶体金免疫层析试纸及制备方法和应用，属于病毒疫病诊断技术和动物检疫领域，包括PVC底板，在PVC底板上按顺序依次固定有样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水垫。其中胶体金垫内有胶体金标记的抗ASFV p30抗原的一个表位的单克隆抗体Mab1；硝酸纤维素膜表面划有检测线和质控线，检测线为针对ASFVp30抗原另一表位的单克隆抗体Mab2，质控线为羊抗小鼠IgG抗体。本发明建立的胶体金免疫层析试纸条具有方便、快速、灵敏和特异等优点，可用于感染ASFV细胞直接检测，适合ASFV感染诊断、流行病学调查和生猪国际贸易检疫检验。
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公开(公告)号：CN105906719B
公开(公告)日：2019-06-11
申请号：CN201610301779.X
申请日：2016-05-09
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术研究领域，具体涉及一种自聚肽融合CD151蛋白及其制备方法和应用。所述的自聚肽融合CD151蛋白由猪CD151蛋白PRRSV结合片段和ELK16自聚肽组成，其制备方法包括表达载体构建、融合蛋白表达与纯化、PRRSV结合片段确定以及病毒浓缩、纯化和检测。所述自聚肽融合CD151蛋白可用于猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)浓缩、纯化和环境监测中。与其他方法相比，用本发明的自聚肽融合CD151蛋白浓缩、纯化和检测PRRSV具有敏感、简单和经济等优点，不仅可用于组织样品的PRRSV浓缩和纯化，还可用于环境样品的PRRSV检测和分离培养。
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公开(公告)号：CN109295010A
公开(公告)日：2019-02-01
申请号：CN201811178904.8
申请日：2018-10-10
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及一种利用鸡肝细胞进行坦布苏病毒高效扩增的方法，包括以下步骤：（1）细胞培养：将鸡肝细胞用含体积浓度为10%胎牛血清的DMEM-F12培养基进行培养，待细胞长满单层后，用PBS洗涤一遍后，以质量浓度为0.25%的胰酶进行消化、传代至细胞培养板中；（2）鸡肝细胞高效扩增坦布苏病毒：将鸡肝细胞接种至细胞培养板内培养，在汇合度为60%到70%时，将坦布苏病毒AHRD2018株接种鸡肝细胞，MOI为0.01，以2ml含体积浓度为2%胎牛血清的培养基培养4天，定时收集200μl上清冻存于-80℃冰箱备用，同时每孔补200μl含体积浓度为2%胎牛血清的培养基。本发明利用鸡肝细胞可以更早产生高滴度病毒的特性，利用病毒复制速率显著高于DF-1细胞和BHK-21细胞的鸡肝细胞来扩增坦布苏病毒。
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公开(公告)号：CN108802382A
公开(公告)日：2018-11-13
申请号：CN201810641006.5
申请日：2018-06-21
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/535
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/535 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种检测鹅星状病毒抗体的ELISA试剂盒及制备方法，包括酶标板、酶标二抗、鹅星状病毒阳性对照血清、鹅星状病毒阴性对照血清、稀释液、10×洗涤液、TMB底物溶液、终止液；该试剂盒中包被酶标板的抗原为鹅星状病毒Cap蛋白；鹅星状病毒为禽星状病毒3型。本发明以表达纯化新发生的鹅星状病毒（禽星状病毒3型）Cap蛋白为包被抗原，利用间接ELISA方法检测待检鹅血清样品，并组装成用于测定血清中星状病毒抗体的试剂盒。该试剂盒可用于近来发生鹅星状病毒感染血清学诊断以及抗体的水平的监测、流行病学调查等，为鹅星状病毒防制提供一种简便、快捷的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104725515B
公开(公告)日：2017-11-14
申请号：CN201510124638.0
申请日：2015-03-20
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明属于生物技术研究领域，具体涉及一种类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合蛋白及其制备方法和在重组腺病毒浓缩和纯化中的应用。所述类弹性蛋白多肽(ELP)与柯萨奇腺病毒受体(CAR)融合蛋白(ELP‑CAR)，由ELP、间隔区和CAR‑D1区组成。其制备方法包括类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合表达载体的构建、融合蛋白的表达与纯化以及重组腺病毒的纯化与洗脱。与其他方法相比，用本发明的类弹性蛋白多肽与柯萨奇腺病毒受体融合蛋白浓缩和纯化重组腺病毒具有简单、快速和经济等优点，制备的重组腺病毒可以用于动物实验研究和基因工程疫苗。
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公开(公告)号：CN103525775A
公开(公告)日：2014-01-22
申请号：CN201310485894.3
申请日：2013-10-16
Applicant: 扬州大学
Abstract: 本发明涉及表达猪繁殖与呼吸综合征病毒游离受体重组腺病毒组及其制备与应用。所述重组腺病毒组，是由表达猪唾液酸粘附素前四个IgV结构域和与猪IgG Fc片段融合蛋白的重组腺病毒，及表达脱衣壳受体CD163第5-9个SRCR结构域与猪IgG Fc片段融合蛋白的重组腺病毒组成。该重组腺病毒组应用于制备防治猪繁殖与呼吸综合征制剂。与现有的疫苗相比，本发明制备的重组腺病毒为复制缺陷性病毒，不能在猪体内扩散传播，不存在散毒和毒力返强风险，表达的两种游离受体的协同作用能显著抑制不同毒株PRRSV感染，可以作为防控PRRS的新型制剂进行开发。
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公开(公告)号：CN1858235A
公开(公告)日：2006-11-08
申请号：CN200610038813.5
申请日：2006-03-14
Applicant: 扬州大学
Abstract: 一种致奶牛乳房炎大肠杆菌培养液的配制方法及其用途，属于动物疫病诊断和防治领域。先将10g蛋白胨、1.5g三号胆盐、10g乳糖、5g氯化钠和5g柠檬酸钠溶于1000ml水中，再用氢氧化钠溶液调整pH值至7.2，再向溶液中加入无菌1％结晶紫水溶液0.5ml和0.4％酚红水溶液4ml，在121℃下灭菌，最后置于4℃保存，制成的培养液可用于快速鉴别致奶牛乳房炎大肠杆菌和抗生素药敏试验。
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公开(公告)号：CN108802382B
公开(公告)日：2021-04-06
申请号：CN201810641006.5
申请日：2018-06-21
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/558 , G01N33/535
Abstract: 本发明涉及一种检测鹅星状病毒抗体的ELISA试剂盒及制备方法，包括酶标板、酶标二抗、鹅星状病毒阳性对照血清、鹅星状病毒阴性对照血清、稀释液、10×洗涤液、TMB底物溶液、终止液；该试剂盒中包被酶标板的抗原为鹅星状病毒Cap蛋白；鹅星状病毒为禽星状病毒3型。本发明以表达纯化新发生的鹅星状病毒（禽星状病毒3型）Cap蛋白为包被抗原，利用间接ELISA方法检测待检鹅血清样品，并组装成用于测定血清中星状病毒抗体的试剂盒。该试剂盒可用于近来发生鹅星状病毒感染血清学诊断以及抗体的水平的监测、流行病学调查等，为鹅星状病毒防制提供一种简便、快捷的方法。
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