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公开(公告)号：CN119592410A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411683826.2
申请日：2024-11-22
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开一种基于脱氧核酶和光子晶体技术的微流控芯片及其应用，属于分析检测技术领域。本发明基于脱氧核酶和光子晶体技术的微流控芯片主要由脱氧核酶进样口，大肠杆菌样品进样口，蛇形反应流道，磁珠富集腔室和信号检测腔室组成，聚苯乙烯球作为光子晶体组装在信号检测腔室，磁铁固定在磁珠富集腔室底部。在反应流道中，偶联在磁珠上的脱氧核酶与大肠杆菌靶标发生反应后，带有FAM荧光基团的底物链断裂，随着流体的流动进入到信号检测腔室，在488nm激发光照射下，使用荧光显微镜观察荧光图像，荧光强弱与大肠杆菌靶标的含量成正比，检测时间需要约25min。本发明的微流控芯片轻巧便携、检测迅速、灵敏度高、选择性好，可实现对待测物的现场定量检测。
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公开(公告)号：CN114058678B
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202111282785.2
申请日：2021-11-01
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12Q1/6816 , C12Q1/10 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种脱氧核酶探针在大肠杆菌耐药表型高通量传感中的应用，属于分析检测领域。所述脱氧核酶探针包括如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的脱氧核苷酸链，以SEQ ID NO.2为底物链，SEQ ID NO.2含有一个RNA碱基A，且在该碱基两侧的T碱基上分别连接荧光基团F和荧光猝灭基团Q。在识别特异性目标蛋白后，SEQ ID NO.1将SEQ ID NO.2链切割至短链，进而产生荧光。该检测原理与具有高通量检测能力的液滴微流控系统相结合，可实现大肠杆菌的快速、高通量检测，并可有效区分耐药型和非耐药型大肠杆菌，进行细菌耐药表型分析，实现准确测定，可广泛应用于实际样本中大肠杆菌的耐药类型诊断，对实现污染控制、进一步防止抗生素滥用、阻止多药耐药菌的形成等方面具有重大意义。
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公开(公告)号：CN115094061B
公开(公告)日：2024-05-28
申请号：CN202210779158.8
申请日：2022-06-30
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , G01N33/569 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种酸性条件下识别大肠杆菌的链状脱氧核酶探针与应用，属于脱氧核酶探针技术领域。将磷酸化的文库酶链、底物链和连接链在T4DNA连接酶的作用下连接，构建链状DNA文库，进行反向筛选，分离纯化未切割底物RNA位点的DNA条带，所得的DNA条带作为链状DNA文库，进行正向筛选，分离纯化切割底物RNA位点的DNA条带，进行PCR扩增，回收正义链，进行多轮重复筛选，得到链状脱氧核酶探针，该探针能够高特异性、快速地检测大肠杆菌，具有在生物传感应用方面发挥优势的潜力。
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公开(公告)号：CN114107295B
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202111364446.9
申请日：2021-11-17
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/10 , C12Q1/00
Abstract: 本发明公开了一种金属离子响应型环状脱氧核酶探针，属于脱氧核酶探针技术领域。将磷酸化的底物链、文库酶链和连接链I混合后连接，构建线状DNA文库，进行反向筛选，分离纯化未切割底物RNA位点的DNA条带，所得的DNA条带通过连接链II进行成环，构建环状DNA文库，进行正向筛选，分离纯化切割底物RNA位点的DNA条带，进行PCR扩增，回收正义链，进行重复筛选，得到环状脱氧核酶探针，该探针在线状时催化效率较低，但在环状时催化效率较高，本发明的脱氧核酶探针具有优异的稳定性，可以在生物传感应用方面发挥优势。
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公开(公告)号：CN116287125A
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN202211617923.2
申请日：2022-12-15
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12Q1/6811 , C12Q1/6858 , C12Q1/6883
Abstract: 本发明公开了一种基于VPCR‑Cas13a的CYP2C19基因多态性检测方法，属于分析检测技术领域。本发明首次提出通过结合“V型”聚合酶链式扩增反应(VPCR)、T7RNA聚合酶转录以及CRISPR‑Cas13a系统，大大缩短传统PCR扩增所需要的时间，构建了针对氯吡格雷相关代谢基因CYP2C19基因多态性的快速、高特异性检测方法。本发明通过对CRISPR‑Cas13a体系中crRNA的设计，在与等位基因结合位点的两侧引入错配，大幅提高了Cas13a对目标基因识别的特异性，可区分单碱基错配；对CYP2C19*2、*3、*17野生型等位基因响应信噪比可分别高达～44、～6、～39倍，对其突变型等位基因响应信噪比可分别高达～7、～5、～39倍。同时，本发明的检测方法可以在60分钟内完成全部操作，具有快速响应的特点，有望用于临床样本快速检测的潜力。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113311094A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110744002.1
申请日：2021-07-01
Applicant: 大连理工大学
Abstract: 本发明公开了一种液相色谱串联质谱法测定保健食品中雄激素化合物的方法，属于保健食品安全检测技术领域。包括以下步骤(1)超声提取；(2)涡旋离心萃取；(3)液相色谱‑串联质谱检测。本发明以乙腈为提取溶剂，涡旋，离心萃取，将保健食品中的雄激素化合物富集到有机相溶液中，之后上清液经氮吹浓缩后用乙腈复溶，利用液相色谱‑串联质谱多反应监测模式检测，内标法定量。该方法操作简便，灵敏度高，能同时检测保健食品中10种雄激素化合物。
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公开(公告)号：CN112946266A
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN202110153261.7
申请日：2021-02-03
Applicant: 大连理工大学
IPC: G01N33/573 , G01N33/543 , G01N21/64
Abstract: 本发明公开了一种具有荧光信号放大功能的三维DNA微球及其制备方法与应用，属于分析检测领域。一种三维DNA微球与β‑内酰胺酶抗体结合形成Ab‑DNF材料，能特异性识别耐药菌产生的β‑内酰胺酶。本发明还公开了一种利用上述Ab‑DNF材料构建单分子检测平台的方法，在384孔板上通过三明治夹心免疫反应，使Ab‑DNF材料与抗原结合并被荧光染料染色形成均匀的荧光点。荧光点数与β‑内酰胺酶浓度之间存在线性关系，从而实现对β‑内酰胺酶的定量检测。此方法灵敏度高，特异性好，简便快速，对β‑内酰胺酶的检测线性范围为100aM～1pM，最低检出限为100aM；对β‑内酰胺类耐药菌的检出限为10CFU/mL，检测时间30min，达到了快速检测的要求。
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公开(公告)号：CN112899143A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110184577.2
申请日：2021-02-08
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12M1/34 , C12M1/00 , C12Q1/6806 , C12Q1/68 , C12Q1/02
Abstract: 本发明公开了一种用于遗传毒性评估的集成化三维折纸器件与应用，属于分析检测领域。在该发明过程中，构建了一种集成化三维折纸器件，通过依次折纸的方式实现样本、洗涤缓冲液和荧光标记试剂连续引入与引出，加样区用来从细胞中提取基因组并作为后续标记反应的反应区。该设备集细胞裂解、基因组提取和基因组损伤检测等过程于一体，避免了传统方法复杂耗时的操作过程，具有便携、简单、快捷、低成本等分析性能，对环境水样、食品安全、药品毒性安全分析具有潜在的应用价值。
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公开(公告)号：CN112266915A
公开(公告)日：2021-01-26
申请号：CN202011139723.1
申请日：2020-10-22
Applicant: 大连理工大学
IPC: C12N15/115 , G01N33/569 , G01N21/78 , G01N21/77
Abstract: 本发明公开了一种用于检测艰难梭菌的核酸适配体及应用，属于分析检测领域。一种通过体外筛选获得的适配体检测艰难梭菌的方法，能够特异性识别艰难梭菌毒素B蛋白降解片段。本发明还公开了一种利用上述适配体构建纸基分析器件的方法，用疏水蜡打印图案纸构建工作区域，在工作区域内以3D DNA适配体作为识别元件，通过其与蛋白降解片段特异性结合释放探针，引发滚环扩增反应，产物使底物颜色发生变化。颜色信号与蛋白降解片段浓度之间存在线性关系，从而实现对毒素B的定量检测。此方法灵敏度高，特异性好，可以对艰难梭菌毒素B进行有效测量，检出限为60pM，检测效果优于现有酶联免疫法检测试剂盒(150pM)，达到了快速检测的要求。
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