一种用于催化制备非天然氨基酸的苯丙氨酸脱氢酶及其应用

    公开(公告)号:CN110592037A

    公开(公告)日:2019-12-20

    申请号:CN201910822218.8

    申请日:2019-08-30

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种用于催化制备非天然氨基酸的苯丙氨酸脱氢酶及其应用,其氨基酸序列如SEQ ID NO.01、02、03或04所示。本发明通过对获得自海洋菌株Bacillus nanhaiensis(CGMCC NO.8969)的苯丙氨酸脱氢酶进行C末端区域改造,获得的变体氨基酸脱氢酶可催化系列非天然氨基酸底物,提高其催化具有大疏水基团的非天然氨基酸的能力,扩展底物谱。

    一种胺脱氢酶及其应用
    23.
    发明公开

    公开(公告)号:CN110577941A

    公开(公告)日:2019-12-17

    申请号:CN201910820937.6

    申请日:2019-08-30

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种胺脱氢酶及其应用,对如SEQ ID NO.01所示的氨基酸脱氢酶进行突变而获得,上述突变包括如下至少之一:将第131位的G突变为L或M、将第262位的N突变为V或L、将第285位的Y突变为L或M和将第333位的M突变为D。本发明的胺脱氢酶的催化反应操作方便,具有产品光学纯度高、收率高等优点,设备简单,在生物催化制备手性胺和海洋生物资源高值化开发领域具有较好的工业应用前景。

    一种利用氧化石墨烯-金属离子配位固定化酶的方法

    公开(公告)号:CN106191025B

    公开(公告)日:2019-06-14

    申请号:CN201610541498.1

    申请日:2016-07-11

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用氧化石墨烯‑金属离子配位固定化酶的方法,属于固定化酶技术领域。在固定化过程中,过渡态金属离子可以与氧化石墨烯的羧基配位,并通过配位作用固定化甲酸脱氢酶。片层结构的氧化石墨烯是一种优良的固定化载体,表面带有环氧基、羰基、羧基等功能性基团,负载面积大。利用金属离子的配位作用,不仅可使氧化石墨烯均匀分散,增大酶的负载量,并且通过与酶组氨酸标签的配位相互作用,实现酶在石墨烯上的固定化。本发明的优点在于工艺简单、制备条件温和、固定化率高。所得固定化酶的温度稳定性、pH稳定和和重复使用稳定性明显增强,同时具有较高的酶活性回收率。

    一种胺脱氢酶电极及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN109813781A

    公开(公告)日:2019-05-28

    申请号:CN201910102754.0

    申请日:2019-02-01

    Applicant: 厦门大学

    Inventor: 王世珍 姚光晓

    Abstract: 本发明公开了一种胺脱氢酶电极及其制备方法和应用。本发明涉及生物传感器技术领域,尤其涉及一种酶电极、酶生物传感器及其制备方法和应用。该电极包括基底电极、电子传导层和胺脱氢酶层,可实现酶分子的有效固定和酶与电极之间的电子转移,提高酶分子催化活性和传感器的灵敏度。本发明的酶电极以具有良好生物相容性的导电高分子聚乙烯亚胺修饰石墨烯、碳纳米管做电极材料,具有制作方法简单、检测灵敏度高、快捷准确、稳定性和重复性好的优点,具有良好的应用前景。

    一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法

    公开(公告)号:CN105647835A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201610146280.6

    申请日:2014-08-08

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: C12R1/07 C12N1/20 C12P13/22

    Abstract: 一种海洋菌株催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法,涉及手性苯丙氨酸。将菌种接入2216L培养基中培养,得发酵液,离心获得细胞,用缓冲液重悬、洗涤,配制成细胞液;所述菌种为南海芽孢杆菌(Bacillus nanhaiensis)DSF-15A2,保藏中心登记入册编号为CGMCC No.8969;在细胞液中,加入苯丙酮酸和氨基供体作为底物,再加入辅助底物用于辅酶循环再生,反应后得到含有产物L-苯丙氨酸的反应液,离心去除沉淀,上清液加入等量的甲醇,震荡混合均匀,离心去除沉淀,上清液稀释后进行测定,苯丙酮酸的浓度用高效液相色谱检测,产物L-苯丙氨酸的浓度和对映体过量值用高效液相色谱测定。

    一种酶催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法

    公开(公告)号:CN104726514A

    公开(公告)日:2015-06-24

    申请号:CN201510165635.1

    申请日:2015-04-09

    Applicant: 厦门大学

    CPC classification number: Y02P20/584

    Abstract: 本发明公开了一种酶催化不对称还原制备手性苯丙氨酸的方法,包括以下步骤:(1)基因组DNA的提取;(2)基因克隆及工程菌的制备;(3)细胞液制备:(4)全细胞催化反应:在步骤3)的细胞液中,加入苯丙酮酸和氨基供体作为底物,加入辅助底物用于辅酶循环再生,利用全细胞催化不对称还原胺化得到产物手性苯丙氨酸。本发明的方法采用全细胞催化苯丙酮酸不对称还原胺化获得手性苯丙氨酸,具有反应路线简洁,易实现辅酶再生等优点。

    一种提高酶混杂性和催化反应性能的方法

    公开(公告)号:CN118726290A

    公开(公告)日:2024-10-01

    申请号:CN202410832574.9

    申请日:2024-06-26

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高酶混杂性和催化反应性能的方法。本发明方法包括以下步骤:1)氢键受体和供体在共熔温度下制备深共熔溶剂;其中,氢键受体和供体中的至少一种为酶的催化底物;2)将深共熔溶剂与酶溶液、缓冲液混合,得到反应体系溶液。本发明将底物制备成深共熔溶剂,从而使原先在缓冲液体系中不能反应的底物可以反应,提高了酶的混杂性,并且还提高了酶的催化活性。

    羊毛固定化酶的制备方法及羊毛固定化酶柱反应器

    公开(公告)号:CN114107274B

    公开(公告)日:2024-09-10

    申请号:CN202111363662.1

    申请日:2021-11-17

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了羊毛固定化酶的制备方法及羊毛固定化酶柱反应器,属于固定化酶技术领域。羊毛是一种天然的柔性材料,其中角蛋白含量占据羊毛的80%以上,经过处理和表面修饰后的羊毛会暴露出许多有效的功能化基团,比如端氨基、端羧基和巯基等,且具有较好的生物相容性和机械强度,有利于酶的固定化。柱反应器在分析和生产中应用广泛,有着优异的传质性能,制备方法简单且可以重复利用,适合多种组分的分离纯化以及工业生产应用。本发明所得的羊毛固定化酶及羊毛固定化酶柱反应器有较好的催化能力和稳定性。本发明的优点在于工艺简单、制备条件温和、便于连续化生产。

    一种苯丙氨酸脱氢酶及其制备方法与用途

    公开(公告)号:CN111893098B

    公开(公告)日:2022-05-13

    申请号:CN202010609009.8

    申请日:2020-06-29

    Applicant: 厦门大学

    Abstract: 本发明公开了一种苯丙氨酸脱氢酶及其制备方法与用途。涉及菌株培养、酶表达与分离纯化、酶的离子液体耐受性和有机溶剂体系耐受性的检测等。本发明获得了一种工业生物催化应用所需的耐有机溶剂、耐离子液体的高稳定性苯丙氨酸脱氢酶,该酶具有在非水相体系中抗逆性较好、稳定性较高的特性,在工业生产中能够有效延长半衰期,提高催化效率,达到降低生产成本的目的,具有重要的工业应用价值。

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