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公开(公告)号：CN117721189A
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202311541767.0
申请日：2023-11-18
Applicant: 南昌大学
IPC: C12Q1/686
Abstract: 本发明提供了一种巢式位点特异性单引物PCR方法及其应用。本发明提供的方法从每个遗传位点上鉴定出3个引物，引物A、B、C，首先，在60℃条件下引物A在基因组的特定位置合成ssDNA，随后的25℃，使得引物A有机会退火至刚刚合成的靶ssDNA上未知区域的某些位点，这样便成功实现了引物A的步移。随后的第二轮和第三轮PCR中，引物B和引物C完成相同的步移，此方法成功建立；而非目标产物在第二轮和第三轮反应过程中被抑制。本发明提供的方法能够通过一段已知序列即可探索其侧翼的未知序列，同时本发明能够应用于基因测序中缺口的填补。
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公开(公告)号：CN110982855B
公开(公告)日：2022-10-11
申请号：CN201911105117.5
申请日：2019-11-13
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明提供了一种高效合成γ‑氨基丁酸的生物转化方法。该技术方案以前期选育的短乳杆菌CCTCC M2018462为发酵菌株，通过菌株、培养基、培养工艺三方面的协同配合达到了异常高水平的GABA产量。具体来看，本发明首先将短乳杆菌CCTCC M2018462接种于特定成分的种子培养基中，以30～35℃的温度摇床培养7～9h，使培养液OD600值达4～6之间，得到种子培养液；而后以10％的接种量接入特定成分的发酵培养基中，以30～35℃的温度静置培养36～72h，所得培养液中即累积了高含量的GABA。实验验证表明，本发明所得的乳酸菌发酵液中GABA含量高达280～320g/L，为目前报道的最高水平。本发明使GABA产量得到显著提升，为乳酸菌发酵产GABA的规模化应用奠定了良好的基础。
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公开(公告)号：CN113528488A
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN202110943295.6
申请日：2021-08-17
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明提供了一种树脂搅拌吸附制备高质量玻璃酸酶粗品的方法。提取过程采用氢离子化滤膜，通过弱酸型改性溶液处理制备的滤膜呈弱酸性，符合玻璃酸酶的存在环境，不会因长时间过滤影响玻璃酸酶的活性，还有效的降低了细菌内毒素的含量。利用稳定性好、吸附效率高的阳离子交换树脂进行提取，制备的玻璃酸酶效价达500IU/mg以上，比活在800 IU/mg.pr以上，细菌内毒素低至0.103EU。与沉淀提取法相比，用树脂吸附工艺大大提高了玻璃酸酶粗品的效价，为后序制备更高纯度的产品提供了高质量的原料，此外，利用本发明的杂质吸附剂进一步保障了玻璃酸酶的效价与使用安全性。
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公开(公告)号：CN109180512B
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN201811227086.6
申请日：2018-10-22
Applicant: 南昌大学
IPC: C07C227/40 , C07C229/08
Abstract: 本发明属于生物化工领域，具体涉及一种从γ‑氨基丁酸发酵液中高效除去谷氨酸的方法，本发明的核心是一种新型试剂的应用；以及基于该试剂的反复沉淀‑溶解操作，使谷氨酸‑GABA的相互作用逐步减弱，最终完全分离GABA与谷氨酸，所用的试剂A为:乙醇:乙酸乙酯为2:1(v/v)；试剂B为1M醋酸锌水溶液，本发明所采用的工艺可以完全回收GABA，可以除去谷氨酸，涉及常规操作，采用普通易得的试剂，除谷氨酸效果好，效率达100％。
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公开(公告)号：CN110982855A
公开(公告)日：2020-04-10
申请号：CN201911105117.5
申请日：2019-11-13
Applicant: 南昌大学
Abstract: 本发明提供了一种高效合成γ-氨基丁酸的生物转化方法。该技术方案以前期选育的短乳杆菌CCTCC M2018462为发酵菌株，通过菌株、培养基、培养工艺三方面的协同配合达到了异常高水平的GABA产量。具体来看，本发明首先将短乳杆菌CCTCC M2018462接种于特定成分的种子培养基中，以30～35℃的温度摇床培养7～9h，使培养液OD600值达4～6之间，得到种子培养液；而后以10％的接种量接入特定成分的发酵培养基中，以30～35℃的温度静置培养36～72h，所得培养液中即累积了高含量的GABA。实验验证表明，本发明所得的乳酸菌发酵液中GABA含量高达280～320g/L，为目前报道的最高水平。本发明使GABA产量得到显著提升，为乳酸菌发酵产GABA的规模化应用奠定了良好的基础。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109180512A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811227086.6
申请日：2018-10-22
Applicant: 南昌大学
IPC: C07C227/40 , C07C229/08
Abstract: 本发明属于生物化工领域，具体涉及一种从γ-氨基丁酸发酵液中高效除去谷氨酸的方法，本发明的核心是一种新型试剂的应用；以及基于该试剂的反复沉淀-溶解操作，使谷氨酸-GABA的相互作用逐步减弱，最终完全分离GABA与谷氨酸，所用的试剂A为:乙醇:乙酸乙酯为2:1(v/v)；试剂B为1M醋酸锌水溶液，本发明所采用的工艺可以完全回收GABA，可以除去谷氨酸，涉及常规操作，采用普通易得的试剂，除谷氨酸效果好，效率达100％。
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公开(公告)号：CN108850987A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810657910.5
申请日：2018-06-25
Applicant: 南昌大学
Abstract: 一种抑制风鹅氧化的香辛料盐制备方法，包括以下步骤：1）将丁香、良姜、花椒、肉蔻和八角的混合香辛料粉碎后过筛，加入香辛料粉重量10‑30倍的乙醇溶液在30‑80℃下浸泡2‑5h，压滤后，得香辛料浸提液；2）向食盐中加入食盐重量1‑6倍的香辛料浸提液，并分别加入食盐重量2‑10%的β‑环糊精和2‑10%的麦芽糊精，加热浓缩，回收乙醇，边加热边搅拌，直至水分收干，物料完全结晶，得到香辛料盐共结晶包埋物；3）粉碎，过30目筛。本发明能有效防止香辛料中抗氧化成分的损失，有效成分能随盐均匀分布在鹅体表面，渗入鹅体速度快，且鹅体表面无香辛料细屑，无须清洗，易于实现风鹅的标准化绿色生产。
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公开(公告)号：CN105087692A
公开(公告)日：2015-11-25
申请号：CN201510423896.9
申请日：2015-07-20
Applicant: 南昌大学
Abstract: 表面活性剂包衣菌体催化合成共轭α-亚麻酸异构体的方法，包括以下步骤：（1）将每克干酪乳杆菌CGMCC 1.574菌体重悬于5mL透性化处理液中，37℃处理20min，离心收集透性化菌体；（2）用60mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后，离心收集菌体，将每克湿菌体重悬于20mL60mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中，再滴加含1%谷氨酸双油醇酯核糖醇的丙酮溶液，边加边混匀，4-40℃处理2-6h，离心收集菌体，冷冻干燥后得包衣菌体；（3）将每克冻干包衣菌体加入到500mL正己烷中，搅拌均匀，加入正己烷体积百分比0.1-0.3%的α-亚麻酸，4-40℃下反应1-12h；（4）离心分离包衣菌体，回收正己烷，产物为c9,t11,c15-共轭α-亚麻酸异构体。本发明反应时间短，包衣菌体可重复使用多次，产量得到了显著提高，无环境污染，显著降低生产成本。
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公开(公告)号：CN105039444A
公开(公告)日：2015-11-11
申请号：CN201510423878.0
申请日：2015-07-20
Applicant: 南昌大学
IPC: C12P7/64
Abstract: 有机介质中生物合成共轭亚油酸异构体的方法，包括以下步骤：（1）将干酪乳杆菌CGMCC 1.574菌体重悬于脉冲介质中，经脉冲电场处理后，离心收集菌体；（2）用50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液洗涤后，离心收集菌体，将每克湿菌体重悬于20mL50mM、pH5.8的磷酸盐缓冲液中，加入菌悬液体积0.5-2.0%的吐温-80混合均匀，4-40℃处理2-6h，离心收集菌体，冷冻干燥后得到包衣菌体；（3）将每克包衣菌体加入到600mL正己烷中，搅拌均匀，加入正己烷体积0.1-0.3%的亚油酸，4-40℃下反应1-12h；（4）离心分离包衣菌体，回收正己烷，产物为c9,t11-共轭亚油酸异构体。本发明反应时间短，包衣菌体可重复使用多次，产量得到了显著提高，无环境污染，生产成本显著降低。
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公开(公告)号：CN101812486A
公开(公告)日：2010-08-25
申请号：CN201010045842.0
申请日：2010-01-18
Applicant: 南昌大学
IPC: C12P13/00 , C07C229/08 , C07C227/40 , C12R1/24
Abstract: 一种γ-氨基丁酸发酵液的脱盐方法，其特征是方法步骤为：(1)将短乳杆菌活化后，以10％的接种量接种于3L发酵培养基中，32℃培养36-72h；并于12h和24h分别补入1.5mol和0.7mol的L-谷氨酸钠；整个发酵过程用10N的硫酸控制pH 5.0；(2)将发酵液4℃离心除去菌体，在上清液中加入2％的活性炭，于80℃脱色30min，过滤回收滤液；(3)加热浓缩上述滤液，当开始瀑沸时立即停止加热，冷却后加入冰乙酸溶解浓缩物，当固形物不再溶解时，过滤回收滤液。本发明的优点是：脱盐率和目的产物回收率高；试剂可以回收反复使用，不污染环境。
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