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公开(公告)号:CN107375922B
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN201710597663.X
申请日:2017-07-20
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开一种新的水溶性复合免疫佐剂及猪圆环病毒病疫苗,本发明筛选并设计了CP974S、CP934S、CP974M和CP四种水性佐剂,制备PCV2灭活疫苗,小鼠和猪体免疫试验结果显示,CP974S和CP934S佐剂对PCV2灭活抗原具有较强免疫佐剂作用,CP974S水佐剂疫苗猪体免疫保护效力优于PCV2进口ISA206佐剂灭活疫苗。以杆状病毒表达的PCV2Cap重组蛋白为基础,配制不同佐剂疫苗,小鼠和猪体免疫试验发现,CP974S和CP934S两种水性佐剂对PCV2Cap重组蛋白也有较强免疫佐剂作用,CP974S佐剂疫苗猪体免疫效果优于进口PCV2Cap亚单位疫苗。CP974S水佐剂填补了我国猪用水溶性佐剂的空白,以此研制的PCV2疫苗安全有效,具有重要应用前景。
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公开(公告)号:CN106834236A
公开(公告)日:2017-06-13
申请号:CN201610097514.2
申请日:2016-02-23
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N7/00 , C12N15/85 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
CPC classification number: C12N7/00 , C07K14/005 , C12N2710/16721 , C12N2710/16722 , C12N2710/16734 , C12N2710/16751
Abstract: 本发明涉及一种猪伪狂犬病毒(PRV)变异株ZJ01的TK/gE/gI基因缺失毒株及其应用,所述毒株为PRV ZJ01毒株的TK/gE/gI基因缺失毒株ZJ01ΔTK/gE/gI(简称ZJ01R),体外传代试验结果显示,重组病毒ZJ01R和PRV ZJ01毒株的gE/gI基因缺失毒株ZJ01ΔgE/gI与亲本病毒ZJ01产生的细胞病变一致,病毒滴度与ZJ01毒株相仿;重组病毒ZJ01R目的基因缺失区持续稳定存在,没有出现回复性突变,猪体免疫及攻毒保护试验表明,重组病毒ZJ01R免疫后,猪体无临床症状及病理变化产生,免疫21天后即可产生较高水平的PRV中和抗体,能够抵御致死性PRV变异毒株ZJ01的攻击感染。
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公开(公告)号:CN102174086B
公开(公告)日:2014-04-02
申请号:CN201110053536.6
申请日:2011-03-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,公开了一种猪圆环病毒2型重组Cap蛋白和亚单位疫苗。一种重组大肠杆菌表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白,该蛋白系将截除N端富含精氨酸的核定位信号区域的猪圆环病毒2型Cap蛋白克隆入原核表达载体得到重组表达载体,将该重组表达载体转染大肠杆菌BL21(DE3),经该重组大肠杆菌BL21(DE3)表达获得。试验证明,本发明构建的重组菌株对外源蛋白表达稳定。使用本发明表达的重组蛋白制备亚单位疫苗,抗原纯度高,安全性好,且对猪等动物没有致病性,容易通过安全性评价。
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公开(公告)号:CN102363770A
公开(公告)日:2012-02-29
申请号:CN201110309066.5
申请日:2011-10-13
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,涉及融合表达猪圆环病毒2型Cap蛋白和生长抑素SS的重组杆状病毒及重组亚单位疫苗。融合表达猪圆环病毒2型Cap蛋白和生长抑素SS的重组杆状病毒保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏日期:2010年12月17日,保藏号:CGMCC No.4459的。一种亚单位疫苗,含有所述的重组杆状病毒rAc-Cap-SS表达的PCV2Cap-SS融合蛋白BCap-SS和佐剂。本发明首次提出了用杆状病毒表达系统融合表达PCV2 Cap蛋白与生长抑素SS该重组杆状病毒对外源蛋白表达稳定,表达的重组蛋白能诱导产生了针对PCV2的特异抗体,并可促进增重。
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公开(公告)号:CN102174086A
公开(公告)日:2011-09-07
申请号:CN201110053536.6
申请日:2011-03-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,公开了一种猪圆环病毒2型重组Cap蛋白和亚单位疫苗。一种重组大肠杆菌表达的猪圆环病毒2型Cap蛋白,该蛋白系将截除N端富含精氨酸的核定位信号区域的猪圆环病毒2型Cap蛋白克隆入原核表达载体得到重组表达载体,将该重组表达载体转染大肠杆菌BL21(DE3),经该重组大肠杆菌BL21(DE3)表达获得。试验证明,本发明构建的重组菌株对外源蛋白表达稳定。使用本发明表达的重组蛋白制备亚单位疫苗,抗原纯度高,安全性好,且对猪等动物没有致病性,容易通过安全性评价。
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公开(公告)号:CN101665781A
公开(公告)日:2010-03-10
申请号:CN200910181983.2
申请日:2009-08-06
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明高滴度猪圆环病毒2型(PCV2)培养细胞、制备方法及其用法,属于生物技术领域。为获得能稳定产生高滴度PCV2的PK15细胞系,对PK15母细胞进行有限稀释后进行了连续的细胞克隆和亚克隆,利用IFA筛选,获得1株对PCV2具有高敏感性的PK15-B1细胞系。该细胞系生物学特性稳定,无外源微生物污染。该细胞接种100TCID 50 /ml PCV2后,37℃培养3-4天,病毒滴度达10 7.0 TCID 50 /ml,比接种PK15母细胞的病毒滴度高100倍,表明PK15-B1细胞系对PCV2更为敏感,更利于PCV2的复制。本研究筛选的PK15-B1克隆细胞株及高滴度PCV2制备方法可用于PCV2疫苗和相关诊断试剂的研究与产品生产。
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公开(公告)号:CN1769435A
公开(公告)日:2006-05-10
申请号:CN200510038694.9
申请日:2005-04-07
Applicant: 南京农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , A61K39/235 , A61P31/12
Abstract: 本发明猪II型圆环病毒(PCV-2)重组腺病毒和疫苗属于高新生物技术领域。通过PCR技术扩增PCV-2编码Cap蛋白的ORF2全基因序列,并把该基因序列克隆入腺病毒载体系统的穿梭载体pShuttle-CMV中,与腺病毒载体系统的骨架载体pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183菌株获得重组质粒,重组质粒转染HEK293-A细胞获得了重组腺病毒并成功的进行了噬斑纯化,通过RT-PCR、间接ELISA、Western-blot和IPMA证明构建成功表达了PCV-2Cap蛋白的重组腺病毒rAd-Cap。在该重组毒中可以使PCV-2的Cap蛋白获得正确表达和表达量提高,从而能更有效的刺激机体的免疫保护反应。
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公开(公告)号:CN113384588B
公开(公告)日:2022-03-08
申请号:CN202110810019.2
申请日:2021-07-17
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K31/567 , A61P31/22 , A61K31/05
Abstract: 本发明公开了米非司酮在制备抗猪伪狂犬病毒药物中的应用。本发明研究了米非司酮在对PRV在N2a细胞上的抑制作用和及其初步的作用机理,并通过体内实验研究了米非司酮在小鼠体内的抗病毒效应,以及与另一种抗PRV药物‑氢醌的协同作用。研究结果表明,米司非酮有抑制PRV复制的作用,与氢醌联合使用,具有明显的协同抗病毒作用。本发明为PRV抗病毒药物的研究和临床应用奠定了基础。
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公开(公告)号:CN111803634B
公开(公告)日:2021-04-23
申请号:CN202010628194.5
申请日:2020-07-02
Applicant: 南京农业大学
IPC: A61K45/00 , A61K31/7004 , A61K31/198 , A61K31/366 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了糖酵解抑制剂在制备防治猪繁殖与呼吸综合征病毒感染的药物中的应用。本发明研究发现糖酵解抑制剂可用于防治猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,尤其是通过口服乳酸脱氢酶抑制剂草氨酸钠或培黄素可显著抑制PRRSV在猪体内复制,首次发现糖酵解抑制剂尤其是乳酸脱氢酶抑制剂(草氨酸钠或培黄素)作为PRRSV拮抗药物的新用途,其抗PRRSV的药效成分明确,质量可控,安全无毒,在猪繁殖与呼吸综合征防治方面具有很好的应用前景。
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公开(公告)号:CN107841507A
公开(公告)日:2018-03-27
申请号:CN201711177363.2
申请日:2017-11-23
Applicant: 南京农业大学
CPC classification number: C07K14/005 , A61K39/12 , C07K2319/02 , C07K2319/10 , C12N7/00 , C12N15/86 , C12N2710/14021 , C12N2710/14043 , C12N2750/10022 , C12N2750/10034
Abstract: 本发明公开一种高效表达的猪圆环病毒2型Cap-穿膜肽融合蛋白基因及其应用,该融合蛋白的编码基因为(1)~(3)中的任意一种:(1)融合穿膜肽TAT基因序列的Cap基因;(2)融合穿膜肽ppTG20基因序列的Cap基因;(3)融合蜜蜂信号肽HBM基因序列的Cap基因。本课题组研究发现,穿膜肽与pVAX-Cap质粒混合制备的DNA疫苗能提高其在小鼠体内的免疫应答水平。本研究将TAT、ppTG20,HBM与PCV2 Cap蛋白N端融合,成功构建重组杆状病毒,实现了Cap蛋白有效表达,为PCV2基因工程疫苗研究奠定了基础。
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