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公开(公告)号：CN110890129B
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN201911149071.7
申请日：2019-11-21
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种单增李斯特菌血清型特异性SNP的挖掘方法及其应用。通过该方法成功挖掘到多种血清型特异性SNP。将不同血清型特异性SNP组合使用，通过将血清型特异性SNP置于引物的3′末端，使某种血清型高效扩增，而其他血清型扩增效率极低，达到区分出主要血清型的目的，另外，通过同时使用某一基因的两个SNP区域设计两个特异性引物，再设计一条共用引物，可以三条引物区分两种型，最大化节省引物的数量。因此，本发明从特异性碱基出发开发了一种用于鉴定单增李斯特菌主要血清型的方法，且相比现有的多重PCR方法实现了引物用量的减少，且准确率较高，与Doumith的方法对比，对60株单增李斯特分型一致性达100％。
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公开(公告)号：CN114384239B
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN202111501397.9
申请日：2021-12-09
Applicant: 深圳君和生物科技有限公司 , 华南理工大学
IPC: G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种免疫磁珠的保存体系以及免疫磁珠体系，免疫磁珠的保存体系包括保存液和凝胶产生剂，保存液包括稳定剂、防腐剂以及作为溶剂的缓冲液，保存液的pH为6.5～8.5。这种免疫磁珠的保存体系在使用时，将免疫磁珠与保存液混合，接着加入凝胶产生剂后，使得凝胶产生剂和保存液的混合液转变成凝胶体系，接着将凝胶体系转移至2℃～6℃的环境下保存，从而既可以避免由于干燥导致免疫磁珠的聚集以及免疫配基的失活，又可以使得免疫磁珠充分分散并且不会发生聚集，从而避免出现免疫磁珠结块的现象，可以用于免疫磁珠的长期保存。结合实施例部分的数据，这种免疫磁珠的保存体系在长时间保存免疫磁珠后，免疫磁珠上的免疫配基依然具有足够的活性。
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公开(公告)号：CN114736273A
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202210251931.3
申请日：2022-03-15
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K14/005 , C12N15/33 , C12N15/70 , C12N1/21 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，公开了一种噬菌体alpha3裂解蛋白E及其应用，所述裂解蛋白E与噬菌体phiX174的裂解蛋白一样拥有一个保守的跨膜区，能有效抑制大肠杆菌的生长，该裂解蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO:2所示，编码该裂解蛋白的多核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明通过将噬菌体alpha3的裂解蛋白E的基因克隆到表达载体上，进而得到可高效表达裂解基因E的重组大肠杆菌。实验证明，所述裂解蛋白E可以有效在大肠杆菌表面形成孔道，起始诱导OD高，裂解持续时间长，裂解效率可达99.99％，为进一步大规模制备大肠杆菌菌影提供基础。
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公开(公告)号：CN109021086B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN201810868364.X
申请日：2018-08-02
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , A61K38/17 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了一种抗菌肽天蚕素A突变体及其编码基因、制备方法和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID No：3所示。编码上述突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID No：4所示。根据设计处的抗菌肽突变体PEW300的基因序列进行分子克隆，将其基因克隆至重组表达载体中，通过与自聚集短肽ELK16融合表达，实现突变体PEW300的高效表达。然后对获得的突变体肽PEW300进行9种指示菌的抑菌性能测试，结果显示抗菌肽PEW300的抑菌性能大大提高。并且具有较强的pH、热稳定性。添加高浓度的抗菌肽PEW300也不会出现溶血现象。
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公开(公告)号：CN110938644A
公开(公告)日：2020-03-31
申请号：CN201911142081.8
申请日：2019-11-20
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于快速检测领域，公开了一种可视化的非细胞体外显色体系及其制备方法和应用，包括如下步骤：(1)工程菌的制备：利用Red重组法敲除大肠杆菌菌株中β-半乳糖苷酶基因，获得工程菌；(2)工程菌裂解液的制备：测定上述工程菌的生长曲线，制备工程菌裂解液；(3)显色体系的配制：配制显色体系，包括工程菌裂解液、能量供应体系、氨基酸混合液和其他蛋白质合成所需的底物混合液；所述能量供应体系含磷酸烯醇式丙酮酸。此非细胞显色体系可应用于病原微生物快速检测。本发明所建立的非细胞显色体系，操作简便，耗时短，成本低，微量化并可肉眼观察反应情况。以该体系为基础，可实现通过肉眼观察来判断反应情况，在可视化快速检测方面具有广泛的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106279410B
公开(公告)日：2019-08-20
申请号：CN201610864043.3
申请日：2016-09-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开一种二型登革热病毒NS1蛋白多价纳米抗体及制备方法，属于基因工程和生物制药技术领域。该多价纳米抗体是由VHH抗体片段通过连接肽连接构成；所述VHH抗体片段的氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示。通过构建表达载体pET‑22b‑VHH‑linker‑VHH、pET‑22b‑VHH‑linker‑VHH‑linker‑VHH，分别成功在大肠杆菌BL21(DE3)中高效可溶表达。与单价抗体相比，重复串联后得到的二价及多价VHH抗体的亲和力有显著提高。本发明实现了二型登革热病毒NS1蛋白多价纳米抗体的高效可溶表达，易于放大生产，成本低廉；具有更高稳定性和亲和力；更有大规模生产及应用的潜能。
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公开(公告)号：CN110079542A
公开(公告)日：2019-08-02
申请号：CN201910302244.8
申请日：2019-04-16
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/62 , C07K14/415 , A61K38/16 , A61P3/10
Abstract: 本发明属于基因工程和生物制药技术领域，具体公开了一种降糖肽Aglycin的重组表达方法及其应用，将Aglycin通过自剪切内含肽、连接肽与自组装肽进行连接，构建能在体外自剪切的重组表达载体，将重组表达载体在大肠杆菌体内表达，获得重组表达菌株；重组表达菌株加入诱导剂进行诱导表达，离心收集菌体，对菌体进行破碎离心后得到沉淀，经诱导剂切割并离心得到上清，然后对切割后上清进行纯化，获得高纯度Aglycin。本发明首次通过基因工程的方法实现了Aglycin的可溶性表达，并且多肽具有一定α-葡萄糖苷酶抑制的降糖活性，可用于制备降糖多肽药物。
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公开(公告)号：CN109021086A
公开(公告)日：2018-12-18
申请号：CN201810868364.X
申请日：2018-08-02
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , A61K38/17 , A61P31/04
CPC classification number: C07K14/43563 , A61K38/00 , A61P31/04 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种抗菌肽天蚕素A突变体及其编码基因、制备方法和应用，所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID No：3所示。编码上述突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID No：4所示。根据设计处的抗菌肽突变体PEW300的基因序列进行分子克隆，将其基因克隆至重组表达载体中，通过与自聚集短肽ELK16融合表达，实现突变体PEW300的高效表达。然后对获得的突变体肽PEW300进行9种指示菌的抑菌性能测试，结果显示抗菌肽PEW300的抑菌性能大大提高。并且具有较强的pH、热稳定性。添加高浓度的抗菌肽PEW300也不会出现溶血现象。
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公开(公告)号：CN104818227B
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201510155501.1
申请日：2015-04-02
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12N1/20 , C12N15/70 , C12N15/62 , A61K35/744 , A61P39/02 , C02F3/34 , B01D53/84 , C12R1/19 , C12R1/01 , C02F101/20
CPC classification number: Y02A50/2358
Abstract: 本发明涉及一种表面锚定人I型金属硫蛋白的食品级乳酸乳球菌及制备方法和应用，步骤如下：(1)通过重叠PCR将cA基因与hMT基因拼接，两基因之间引入linker，N端引入促表达标签，得到重组cA‑hMT基因；(2)将重组cA‑hMT基因和表达载体进行连接，得到的连接产物转化至大肠杆菌感受态细胞；(3)将步骤(2)得到的工程菌诱导表达重组融合蛋白，收获菌体超声破碎后离心，上清液直接与食品级乳酸乳球菌孵育，融合蛋白无需纯化则锚定至乳酸乳球菌表面。本发明方法制备的这种表面锚定有人I型金属硫蛋白的食品级乳酸菌，能够富集重金属，制备方法具有高效、安全无毒性、成本低、不需蛋白纯化等优点。
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公开(公告)号：CN105713823A
公开(公告)日：2016-06-29
申请号：CN201610176953.2
申请日：2016-03-25
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种萃取发酵生产异丙醇和丁醇的装置和方法，包括由管道依次串联的普通生物反应器、纤维床固定化反应器和液-液萃取器；所述纤维床固定化反应器跟普通生物反应器再由回流管道连接，构成第一个液体循环系统；所述萃取器跟生物反应器再由回流管道连接，构成第二个液体循环系统。先在生物反应器中培养产醇菌的种子液，待其至对数生长中期，将菌种固定至纤维床固定化反应器中，发酵至进入产醇阶段，将发酵液通入萃取器进行萃取，最后再回流到生物反应器。所述萃取器中加有萃取剂，萃取剂为溶解于有机介质的十二烷酸，所述有机介质为非水溶性液体。本发明可以有效地提高底物转化率，提高菌株的产醇量和产醇率。
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