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公开(公告)号:CN107058363A
公开(公告)日:2017-08-18
申请号:CN201710148456.6
申请日:2017-03-14
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/435 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于淀粉样蛋白实现小分子肽类高效分泌表达的方法及其应用。该方法包括如下步骤:将自剪切短肽通过一个连接肽与自聚集肽进行拼接,得到融合蛋白;然后将信号肽连接到融合蛋白的N端,得到表达载体I;再将小分子肽类连接到表达载体I上,得到分泌表达载体II;敲除细菌基因组中的csgBAC基因,构建突变株,得到表达宿主;将分泌表达载体II转化到表达宿主中,再将得到的工程菌通过诱导表达,离心收集菌体,加入诱导剂,再离心收集上清,得到小分子肽类。本发明将融合蛋白表达至菌体表面,利用自剪切短肽的自剪切特性,无需细胞破碎、蛋白纯化等繁琐操作,且得到的小分子肽类与化学合成的小分子肽类具有相同的抑菌活性。
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公开(公告)号:CN114853881B
公开(公告)日:2023-06-16
申请号:CN202210567560.X
申请日:2022-05-24
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K14/78 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12N15/53 , C12N1/21 , C12P21/02 , C07K1/22 , C07K1/18 , C07K1/34 , C07K1/36 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种重组人源融合胶原蛋白及其高效羟基化方法与应用。该重组人源融合胶原蛋白的基酸序列如SEQ ID No.1所示,其细胞活性比单一蛋白的高。通过将来源于炭疽芽孢杆菌的脯氨酸羟化与人源胶原基因构建双质粒共表达,先诱导表达来源于炭疽芽孢杆菌的脯氨酸羟化酶,待胞内羟化酶积一定量后,再诱导强启动子控制下的胶原蛋白快速表达,通过调控酶和胶原蛋白的表达时间点,实现大子量融合胶原的表达及同步高效羟基化,羟化率达到63%,羟化率更高的胶原蛋白其稳定性更好且生物性更高。
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公开(公告)号:CN116041437A
公开(公告)日:2023-05-02
申请号:CN202211221193.4
申请日:2022-10-08
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K7/08 , A23L3/3526 , A61K38/10 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了一种人工合成抗菌肽及其应用。该抗菌肽的氨基酸序列为FLFRVASKVFKALIGKFKKK,分子量为2355.98Da,等电点为11.43,净电荷数为7。该抗菌肽相比于原始抗菌肽D51显著提升了对蜡样芽孢杆菌的抗菌活性,更高效地抑制蜡样芽孢杆菌的芽孢萌发及生物被膜的形成,能有效控制食品中蜡样芽孢杆菌的污染。其还具有稳定性好,溶血性低,不易引起耐药性,合成难度小和生产成本低等优点。
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公开(公告)号:CN114853881A
公开(公告)日:2022-08-05
申请号:CN202210567560.X
申请日:2022-05-24
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K14/78 , C12N15/12 , C12N15/70 , C12N15/53 , C12N1/21 , C12P21/02 , C07K1/22 , C07K1/18 , C07K1/34 , C07K1/36 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种重组人源融合胶原蛋白及其高效羟基化方法与应用。该重组人源融合胶原蛋白的基酸序列如SEQ ID No.1所示,其细胞活性比单一蛋白的高。通过将来源于炭疽芽孢杆菌的脯氨酸羟化与人源胶原基因构建双质粒共表达,先诱导表达来源于炭疽芽孢杆菌的脯氨酸羟化酶,待胞内羟化酶积一定量后,再诱导强启动子控制下的胶原蛋白快速表达,通过调控酶和胶原蛋白的表达时间点,实现大子量融合胶原的表达及同步高效羟基化,羟化率达到63%,羟化率更高的胶原蛋白其稳定性更好且生物性更高。
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公开(公告)号:CN112220959A
公开(公告)日:2021-01-15
申请号:CN202011176184.9
申请日:2020-10-29
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明公开了一种铜基MOF水凝胶功能化抗菌膜及其制备方法与应用。本发明先合成天然高分子大单体,所述的天然高分子大单体为乙烯基壳聚糖衍生物、乙烯基壳聚糖衍生物和甲基丙烯酸酯化明胶中任意一种或多种,将铜离子以铜基金属有机骨架纳米粒子的形式负载于天然高分子‑g‑N‑异丙基丙烯酰胺的交联水凝胶中,借助水凝胶基体表面的活性基团与改性隔菌膜表面异氰酸酯基之间的亲核加成反应,制备出铜基MOF水凝胶功能化抗菌膜。本发明结合了铜基MOF功能化水凝胶温敏性、抗菌性与隔菌膜阻隔细菌的能力,通过物理化学作用来达到隔菌膜与功能化水凝胶之间的有效粘结,实现抗菌膜在具备隔菌抑菌效果的同时,还具有较好的物理机械性能。
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公开(公告)号:CN107058363B
公开(公告)日:2020-12-22
申请号:CN201710148456.6
申请日:2017-03-14
Applicant: 华南理工大学
IPC: C12N15/70 , C07K14/435 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种基于淀粉样蛋白实现小分子肽类高效分泌表达的方法及其应用。该方法包括如下步骤:将自剪切短肽通过一个连接肽与自聚集肽进行拼接,得到融合蛋白;然后将信号肽连接到融合蛋白的N端,得到表达载体I;再将小分子肽类连接到表达载体I上,得到分泌表达载体II;敲除细菌基因组中的csgBAC基因,构建突变株,得到表达宿主;将分泌表达载体II转化到表达宿主中,再将得到的工程菌通过诱导表达,离心收集菌体,加入诱导剂,再离心收集上清,得到小分子肽类。本发明将融合蛋白表达至菌体表面,利用自剪切短肽的自剪切特性,无需细胞破碎、蛋白纯化等繁琐操作,且得到的小分子肽类与化学合成的小分子肽类具有相同的抑菌活性。
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公开(公告)号:CN114106197B
公开(公告)日:2023-06-16
申请号:CN202111298440.6
申请日:2021-11-04
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程和生物制药技术领域,公开了一种窄谱抗菌肽及其应用,窄谱抗菌肽(G2)的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。所述的窄谱抗菌肽在制备抗微生物感染药物中的应用,所述微生物主要为肠道及食源性致病菌。结果显示本发明G2抗菌肽抗菌谱窄,对艰难梭菌(Clostridium difficile)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)及大肠杆菌(Escherichia coli)O157具有较强的抗菌活性,并且具有良好的温度、pH和血清稳定性;生物安全性实验显示G2抗菌肽无明显的溶血活性及细胞毒性。
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公开(公告)号:CN109021086B
公开(公告)日:2021-05-14
申请号:CN201810868364.X
申请日:2018-08-02
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , A61K38/17 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了一种抗菌肽天蚕素A突变体及其编码基因、制备方法和应用,所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID No:3所示。编码上述突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID No:4所示。根据设计处的抗菌肽突变体PEW300的基因序列进行分子克隆,将其基因克隆至重组表达载体中,通过与自聚集短肽ELK16融合表达,实现突变体PEW300的高效表达。然后对获得的突变体肽PEW300进行9种指示菌的抑菌性能测试,结果显示抗菌肽PEW300的抑菌性能大大提高。并且具有较强的pH、热稳定性。添加高浓度的抗菌肽PEW300也不会出现溶血现象。
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公开(公告)号:CN109021086A
公开(公告)日:2018-12-18
申请号:CN201810868364.X
申请日:2018-08-02
Applicant: 华南理工大学
IPC: C07K14/435 , C12N15/12 , C12N15/70 , A61K38/17 , A61P31/04
CPC classification number: C07K14/43563 , A61K38/00 , A61P31/04 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种抗菌肽天蚕素A突变体及其编码基因、制备方法和应用,所述突变体的氨基酸序列如SEQ ID No:3所示。编码上述突变体的基因的核苷酸序列如SEQ ID No:4所示。根据设计处的抗菌肽突变体PEW300的基因序列进行分子克隆,将其基因克隆至重组表达载体中,通过与自聚集短肽ELK16融合表达,实现突变体PEW300的高效表达。然后对获得的突变体肽PEW300进行9种指示菌的抑菌性能测试,结果显示抗菌肽PEW300的抑菌性能大大提高。并且具有较强的pH、热稳定性。添加高浓度的抗菌肽PEW300也不会出现溶血现象。
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公开(公告)号:CN114106197A
公开(公告)日:2022-03-01
申请号:CN202111298440.6
申请日:2021-11-04
Applicant: 华南理工大学
Abstract: 本发明属于蛋白质工程和生物制药技术领域,公开了一种窄谱抗菌肽及其应用,窄谱抗菌肽(G2)的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示。所述的窄谱抗菌肽在制备抗微生物感染药物中的应用,所述微生物主要为肠道及食源性致病菌。结果显示本发明G2抗菌肽抗菌谱窄,对艰难梭菌(Clostridium difficile)、鼠伤寒沙门氏菌(Salmonella typhimurium)及大肠杆菌(Escherichia coli)O157具有较强的抗菌活性,并且具有良好的温度、pH和血清稳定性;生物安全性实验显示G2抗菌肽无明显的溶血活性及细胞毒性。
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