非洲猪瘟p30、p54、p72和B602L的DNA疫苗和亚单位疫苗及其制备方法与应用

    公开(公告)号:CN112472801A

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN202011530474.9

    申请日:2020-12-22

    Inventor: 樊惠英 张枫 廖明

    Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟p30、p54、p72和B602L的DNA疫苗和亚单位疫苗及其制备方法与应用。所述的DNA疫苗包括编码非洲猪瘟病毒p30、p54、p72和B602L蛋白的四个重组pCAGGS真核表达质粒;亚单位疫苗包括利用重组杆状病毒表达系统的三个蛋白:单独表达的非洲猪瘟病毒p30蛋白、非洲猪瘟病毒p54蛋白,联合表达的非洲猪瘟病毒p72蛋白和非洲猪瘟病毒B602L蛋白,以及药学上可以接受的佐剂。针对亚单位疫苗及核酸疫苗免疫后仅能提供部分保护或者无保护力的问题,为提高亚单位疫苗和核酸疫苗的免疫效果,通过猪源及昆虫细胞的密码子优化,且采取“鸡尾酒”式混合免疫,用以提高疫苗的免疫效果。

    一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用

    公开(公告)号:CN105331601B

    公开(公告)日:2018-10-19

    申请号:CN201510790960.7

    申请日:2015-11-17

    Abstract: 本发明公开了一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用,属于细菌遗传改造技术领域。本发明中通过在上游引物中添加USS序列ACCGCTTG,使的PCR产物含有这个USS序列,副猪嗜血杆菌会识别并带入菌体内部进行重组,无需构建突变常用的自杀质粒,本方法把抗性基因直接引入到PCR产物中,直接用PCR产物就能实现筛选,同时在引物中引入USS,细菌就会直接吞噬这个重组模版用于同源重组。本发明的基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法在构建副猪嗜血杆菌双组分系统突变体中应用。

    一种用于检测并鉴别FAdV-4和FAdV-8b的特异性引物及其应用

    公开(公告)号:CN108531651A

    公开(公告)日:2018-09-14

    申请号:CN201810329155.8

    申请日:2018-04-13

    Abstract: 本发明公开一种用于检测并鉴别FAdV-4和FAdV-8b的特异性引物及其应用,属于生物技术领域。本发明根据FAdV-4和FAdV-8b的保守序列设计了两对特异性引物,扩增的片段大小分别为138bp、122bp,解链温度分别为81.5℃、87.3℃,可根据荧光定量扩增曲线及溶解曲线对FAdV-4和FAdV-8b进行区分。特异性实验表明,本发明对其它家禽常见病毒AIV(H5N6,H9N2)、NDV、IBV、IBDV、ALV、ILTV等无交叉反应。本检测方法灵敏、高效,可对临床样品进行批量检测,因此大大节省了临床诊断FAdV-4和FAdV-8b的时间,给养鸡业带来了巨大经济效益。

    一种黄羽肉种鸡免疫方法
    24.
    发明公开

    公开(公告)号:CN108244032A

    公开(公告)日:2018-07-06

    申请号:CN201711487040.3

    申请日:2017-12-30

    CPC classification number: A01K67/02

    Abstract: 一种黄羽肉种鸡的免疫方法,接种如下:1日龄,马立克,2日龄,鸡痘;5日龄关节炎活苗;10日龄,法氏囊活疫苗;12日龄、36日龄、280日龄,分别取新支流三联疫苗;16日龄,禽流感疫苗;33日龄,支原体活苗;40、140日龄取禽流感疫苗;43、100日龄,喉气管炎疫苗;50、120日龄IC(鼻炎)疫苗;14、55、110、155、189、280日龄,新支二联活苗;60日龄,关节炎活苗;90、156、350日龄,新流二联疫苗;95日龄,脑炎鸡痘二联活疫苗;111日龄,新支减三联疫苗,130日龄支原体疫苗,145日龄,新支法呼四联疫苗,本发明能有效控制黄羽种鸡疾病发生的情况,减少了鸡的死亡率。

    以杆状病毒为载体的广谱禽流感疫苗及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN105169383A

    公开(公告)日:2015-12-23

    申请号:CN201510559793.5

    申请日:2015-09-02

    Inventor: 樊惠英 廖明 张杰

    Abstract: 本发明公开了一种以杆状病毒为载体的广谱禽流感疫苗及其制备方法和应用,属于生物技术领域。所述的疫苗是以杆状病毒为载体,在其表面展示有三拷贝的禽流感病毒基质蛋白M2胞外域和大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位的融合蛋白,并能够表达上述融合蛋白的重组杆状病毒。禽流感病毒快速变异,而现有疫苗交叉保护力弱。本发明将禽流感病毒高度保守、具有交叉保护作用的抗原片段3M2e和粘膜佐剂LTB的编码基因插入杆状病毒基因组,制备成经呼吸道免疫的广谱禽流感疫苗。本发明还涉及使用所述广谱禽流感疫苗的免疫接种方案。该疫苗克服了传统禽流感疫苗在研制、生产以及应用方面的不足,从而实现对禽流感疫情经济、有效地防控。

    J亚群禽白血病病毒基因检测用引物组、检测方法和快速检测试剂盒

    公开(公告)号:CN101586168B

    公开(公告)日:2012-02-22

    申请号:CN200910040395.7

    申请日:2009-06-19

    Abstract: 本发明公开一种J亚群禽白血病病毒基因检测用引物组、检测方法和快速检测试剂盒,该引物组由外引物F3、外引物B3、内引物FIP和内引物BIP这四条引物组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示,其中,R为G或A,Y为T、U或C。本发明采用上述引物组,在优化的最佳体系下对待测样品DNA进行环介导等温扩增反应,阳性反应在琼脂糖凝胶电泳中显示梯状带,同时在反应产物中加入显色剂,阳性反应会发生明显的颜色变化。本发明的引物组和试剂盒均可高效高特异性地检测J亚群禽白血病病毒基因,在不足1h即可完成扩增反应,检测成本低、耗时短、产率高,特异性高,且阴阳性结果显色差异显著,验证率高,更加明显可靠。

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