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公开(公告)号:CN112472801A
公开(公告)日:2021-03-12
申请号:CN202011530474.9
申请日:2020-12-22
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/12 , A61P31/20 , C12N15/866 , C12N15/85 , C07K14/01
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟p30、p54、p72和B602L的DNA疫苗和亚单位疫苗及其制备方法与应用。所述的DNA疫苗包括编码非洲猪瘟病毒p30、p54、p72和B602L蛋白的四个重组pCAGGS真核表达质粒;亚单位疫苗包括利用重组杆状病毒表达系统的三个蛋白:单独表达的非洲猪瘟病毒p30蛋白、非洲猪瘟病毒p54蛋白,联合表达的非洲猪瘟病毒p72蛋白和非洲猪瘟病毒B602L蛋白,以及药学上可以接受的佐剂。针对亚单位疫苗及核酸疫苗免疫后仅能提供部分保护或者无保护力的问题,为提高亚单位疫苗和核酸疫苗的免疫效果,通过猪源及昆虫细胞的密码子优化,且采取“鸡尾酒”式混合免疫,用以提高疫苗的免疫效果。
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公开(公告)号:CN105331601B
公开(公告)日:2018-10-19
申请号:CN201510790960.7
申请日:2015-11-17
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法及应用,属于细菌遗传改造技术领域。本发明中通过在上游引物中添加USS序列ACCGCTTG,使的PCR产物含有这个USS序列,副猪嗜血杆菌会识别并带入菌体内部进行重组,无需构建突变常用的自杀质粒,本方法把抗性基因直接引入到PCR产物中,直接用PCR产物就能实现筛选,同时在引物中引入USS,细菌就会直接吞噬这个重组模版用于同源重组。本发明的基于自然转化的副猪嗜血杆菌高效遗传重组方法在构建副猪嗜血杆菌双组分系统突变体中应用。
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公开(公告)号:CN108531651A
公开(公告)日:2018-09-14
申请号:CN201810329155.8
申请日:2018-04-13
Applicant: 华南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开一种用于检测并鉴别FAdV-4和FAdV-8b的特异性引物及其应用,属于生物技术领域。本发明根据FAdV-4和FAdV-8b的保守序列设计了两对特异性引物,扩增的片段大小分别为138bp、122bp,解链温度分别为81.5℃、87.3℃,可根据荧光定量扩增曲线及溶解曲线对FAdV-4和FAdV-8b进行区分。特异性实验表明,本发明对其它家禽常见病毒AIV(H5N6,H9N2)、NDV、IBV、IBDV、ALV、ILTV等无交叉反应。本检测方法灵敏、高效,可对临床样品进行批量检测,因此大大节省了临床诊断FAdV-4和FAdV-8b的时间,给养鸡业带来了巨大经济效益。
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公开(公告)号:CN108244032A
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201711487040.3
申请日:2017-12-30
Applicant: 华南农业大学
IPC: A01K67/02
CPC classification number: A01K67/02
Abstract: 一种黄羽肉种鸡的免疫方法,接种如下:1日龄,马立克,2日龄,鸡痘;5日龄关节炎活苗;10日龄,法氏囊活疫苗;12日龄、36日龄、280日龄,分别取新支流三联疫苗;16日龄,禽流感疫苗;33日龄,支原体活苗;40、140日龄取禽流感疫苗;43、100日龄,喉气管炎疫苗;50、120日龄IC(鼻炎)疫苗;14、55、110、155、189、280日龄,新支二联活苗;60日龄,关节炎活苗;90、156、350日龄,新流二联疫苗;95日龄,脑炎鸡痘二联活疫苗;111日龄,新支减三联疫苗,130日龄支原体疫苗,145日龄,新支法呼四联疫苗,本发明能有效控制黄羽种鸡疾病发生的情况,减少了鸡的死亡率。
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公开(公告)号:CN107267665A
公开(公告)日:2017-10-20
申请号:CN201710369846.6
申请日:2017-05-23
Applicant: 华南农业大学 , 深圳出入境检验检疫局动植物检验检疫技术中心
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/6844 , C12Q2521/507 , C12Q2522/101 , C12Q2563/107
Abstract: 本申请公开了一种用于H5亚型禽流感病毒检测的试剂、检测方法和应用。本申请用于H5亚型禽流感病毒检测的试剂,包括引物对和探针,引物对上/下游引物分别为Seq ID No.1和Seq ID No.2所示序列,探针为Seq ID No.3所示序列或其反向互补序列;探针中,第27个碱基修饰BHQ1-dT,第30个碱基修饰6-FAM-dT,第28个碱基替换为dSpacer,3’端修饰C3Spacer。本申请的H5亚型检测试剂,能准确灵敏的从众多禽流感病毒中特异性检测出H5亚型,为H5亚型防控提供了一种有效的方法和途径。本申请的检测方法,耗时短、灵敏度高、硬件设备要求低,不需复杂的样本处理,特别适合现场快速检测。
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公开(公告)号:CN104561283B
公开(公告)日:2017-01-18
申请号:CN201410823091.9
申请日:2014-12-24
Applicant: 广东海大畜牧兽医研究院有限公司 , 华南农业大学
Abstract: 本发明通过比较副猪嗜血杆菌荚膜合成基因簇上的保守基因,并分析各血清型之间保守基因的差别,为15个血清型各设计多对引物,并从中各筛选一对作为血清分型PCR引物,并建立鉴别副猪嗜血杆菌15个血清分型PCR方法。本发明提供了一种准确度高、灵敏度高、特异性强的副猪嗜血杆菌血清分型PCR方法。
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公开(公告)号:CN105770883A
公开(公告)日:2016-07-20
申请号:CN201610237685.0
申请日:2016-04-14
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61K48/00 , A61P31/16 , C12N15/85 , C12N15/66
CPC classification number: A61K39/12 , A61K2039/53 , A61K2039/552 , C07K14/005 , C12N15/66 , C12N15/85 , C12N2760/16122 , C12N2760/16134 , C12N2800/107 , C12N2800/22
Abstract: 本发明公开了一种H9亚型禽流感DNA疫苗,该疫苗是由HA基因和真核表达载体组成。本发明还公开了一种H9亚型禽流感DNA疫苗的制备方法,包括以下步骤:S1:DNA疫苗野生型质粒pCAGGHA9的构建及鉴定,S2:DNA疫苗密码子优化型质粒pCAGGoptiHA9的构建及鉴定,S3:质粒的大量制备,S4:两种DNA疫苗质粒的293T细胞转染,S5:间接免疫荧光检测蛋白表达,S6:Western blot检测蛋白表达。使用本方法制备的DNA疫苗相较于目前使用的其他类型禽流感疫苗,安全性和稳定性更高,不存在毒力恢复和感染风险;运输方便,使用简便,生产成本低,周期短;免疫接种无副反应。
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公开(公告)号:CN105169383A
公开(公告)日:2015-12-23
申请号:CN201510559793.5
申请日:2015-09-02
Applicant: 华南农业大学
IPC: A61K39/145 , A61K39/385 , A61K39/39 , C12N15/866 , A61P31/16
Abstract: 本发明公开了一种以杆状病毒为载体的广谱禽流感疫苗及其制备方法和应用,属于生物技术领域。所述的疫苗是以杆状病毒为载体,在其表面展示有三拷贝的禽流感病毒基质蛋白M2胞外域和大肠杆菌热不稳定肠毒素B亚单位的融合蛋白,并能够表达上述融合蛋白的重组杆状病毒。禽流感病毒快速变异,而现有疫苗交叉保护力弱。本发明将禽流感病毒高度保守、具有交叉保护作用的抗原片段3M2e和粘膜佐剂LTB的编码基因插入杆状病毒基因组,制备成经呼吸道免疫的广谱禽流感疫苗。本发明还涉及使用所述广谱禽流感疫苗的免疫接种方案。该疫苗克服了传统禽流感疫苗在研制、生产以及应用方面的不足,从而实现对禽流感疫情经济、有效地防控。
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公开(公告)号:CN101586168B
公开(公告)日:2012-02-22
申请号:CN200910040395.7
申请日:2009-06-19
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种J亚群禽白血病病毒基因检测用引物组、检测方法和快速检测试剂盒,该引物组由外引物F3、外引物B3、内引物FIP和内引物BIP这四条引物组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1~4所示,其中,R为G或A,Y为T、U或C。本发明采用上述引物组,在优化的最佳体系下对待测样品DNA进行环介导等温扩增反应,阳性反应在琼脂糖凝胶电泳中显示梯状带,同时在反应产物中加入显色剂,阳性反应会发生明显的颜色变化。本发明的引物组和试剂盒均可高效高特异性地检测J亚群禽白血病病毒基因,在不足1h即可完成扩增反应,检测成本低、耗时短、产率高,特异性高,且阴阳性结果显色差异显著,验证率高,更加明显可靠。
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公开(公告)号:CN101857873A
公开(公告)日:2010-10-13
申请号:CN201010140195.1
申请日:2010-03-30
Applicant: 华南农业大学
Abstract: 本发明公开一种血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒基因及其感染性克隆的构建。本发明J亚群禽白血病病毒全长基因组序列如SEQ IDNO:1所示,然后采用特异性引物对SEQ ID NO:1所示血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒基因进行扩增,并采用pBlueskript SK(-)为载体,鸡胚成纤维细胞为宿主细胞,构建得到血管瘤病变型型J亚群禽白血病病毒基因的感染性克隆,这为后续研究血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒的ALV-J的致病机理、基因结构以及功能的关系、病毒的复制及遗传变异规律等奠定了基础。
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