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公开(公告)号：CN108300791B
公开(公告)日：2021-09-14
申请号：CN201810129683.9
申请日：2018-02-08
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686
Abstract: 本发明公开了一种烟草根结线虫病中三种主要病原线虫的同步检测鉴定方法。包括PCR引物设计、DNA模板制备、PCR扩增、产物检测步骤。本发明根据南方根结线虫、花生根结线虫和爪哇根结线虫的种类特异区序列设计了包含6条PCR引物用于上述3种根结线虫的种类鉴定，鉴定的稳定性好、准确性高；所设计的6条引物组合使用，可以实现1次PCR反应完成3种烟草根结线虫病病原线虫的同步检测，鉴定方便、省时；采用普通PCR仪和常规试剂，检测成本，利于推广应用；本发明包含设计了针对病根样品和土壤样品的DNA制备方法，可以以包括卵、幼虫和成虫在内的各发育阶段的根结线虫为对象进行种类鉴定，具有广泛的使用范围。
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公开(公告)号：CN111172294A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN202010116491.1
申请日：2020-02-25
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Inventor： 童治军 , 隋学艺 , 肖炳光 , 王丙武 , 方敦煌 , 宋中邦 , 高玉龙 , 李文正 , 赵璐 , 谢贺 , 白戈 , 李梅云 , 李永平 , 焦芳婵 , 吴兴富 , 袁诚 , 黄昌军 , 孔光辉 , 师君丽
IPC: C12Q1/6888 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与烟草尼古丁合成主效调控基因nic1紧密连锁的共显性SSR标记及其应用，所述的与烟草尼古丁合成主效调控基因nic1紧密连锁的共显性SSR标记的编号为TM22038、TM23004和TM22041，其PCR扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.2、SEQ ID No.3和SEQ ID No.4、SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示。所述的应用为所述的与烟草尼古丁合成主效调控基因nic1紧密连锁的共显性SSR标记在检测烟草基因组DNA中是否存在纯合基因型nic1而具有低尼古丁含量烟草品种中的应用。本发明所述的共显性SSR标记具有稳定、可靠、简便、快捷和低成本的特点，因此该分子标记可以作为烟草品质育种中低尼古丁含量基因nic1分子标记辅助选择的应用。
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公开(公告)号：CN106498068B
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201610994749.1
申请日：2016-11-11
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与烟草TMV抗性基因N紧密连锁的共显性SSR标记及其应用，所述的与烟草TMV抗性基因N紧密连锁的共显性SSR标记的编号为TM508‑007和TM508‑118，其扩增产物核苷酸序列分别为SEQ ID No.1和SEQ ID No.3、SEQ ID No.2和SEQ ID No.4所示。所述的应用为所述的与烟草TMV抗性基因N紧密连锁的共显性SSR标记在检测烟草基因组DNA中是否存在烟草抗TMV病基因N中的应用。本发明所述的共显性SSR标记具有稳定、可靠、简便、快捷和低成本的特点，因此该分子标记可以作为烟草TMV病抗病育种中N基因分子标记辅助选择的应用。
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公开(公告)号：CN110643616A
公开(公告)日：2020-01-03
申请号：CN201911005068.8
申请日：2019-10-22
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Inventor： 隋学艺 , 王丙武 , 宋中邦 , 高玉龙 , 李文正 , 李梅云 , 赵璐 , 袁诚 , 张洪博 , 师君丽 , 李永平 , 孔光辉 , 曾建敏 , 邹聪明 , 刘勇 , 黄昌军 , 吴兴富
Abstract: 本发明公开了烟草降烟碱合成调控基因NtERF91及其克隆方法与应用，降烟碱合成调控基因NtERF91核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示，其编码的氨基酸序列如SEQ ID：No.2所示。本发明还公开了降烟碱合成调控基因NtERF91的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtERF91基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtERF91基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物；E、构建了含NtERF91基因的过表达载体。将过表达载体通过农杆菌介导的转化在烟草中过表达，制备转基因植株。结果显示，转基因植株的上部、中部、下部烟叶中降烟碱含量分别相比对照增加了2.4倍、1.6倍和1.8倍，说明烟草NtERF91基因在培育高降烟碱含量的烟草方面具有较大的应用前景。
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公开(公告)号：CN108374014A
公开(公告)日：2018-08-07
申请号：CN201810126177.4
申请日：2018-02-08
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种提高烟草叶片钾含量的基因NtTPKa及其克隆方法与应用。提高烟草叶片钾含量的基因NtTPKa核苷酸序列如SEQ ID：No.1所示。本发明还公开了提高烟草叶片钾含量的基因NtTPKa的克隆方法，具体步骤包括：A、确定NtTPKa基因序列；B、提取烟草RNA，反转录得到第一链cDNA；C、根据NtTPKa基因序列设计合成特异性引物，以cDNA作为模板，进行PCR扩增；D、回收和纯化PCR产物并与pTOPO载体连接；构建了含NtTPKa基因的RNAi表达载体。将RNAi载体通过农杆菌介导法转化烟草，制备转基因植株。获得的转基因植株钾含量比对照提高20%以上。说明烟草NtTPKa基因在培育高钾含量的烟草方面具有重大的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107557447A
公开(公告)日：2018-01-09
申请号：CN201711048490.2
申请日：2017-10-31
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种鉴别烟草镉转运基因NtHMA4野生型和突变体的分子标记与应用。与NtHMA4野生型位点检测相关的标记，其核苷酸序列如Seq No.1所示；与NtHMA4突变体位点检测相关的标记，其核苷酸序列如Seq No.2所示。应用，其特征在于所述的鉴别烟草镉转运基因NtHMA4野生型和突变体的分子标记在利用突变体hma-2h23改良烟草低镉特性回交转育过程中的应用。本发明的分子标记具有简单、快速的优势。该分子标记可以应用于利用突变体hma2-2h23对烟草品种的低镉改良的回交过程中。
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公开(公告)号：CN107058335A
公开(公告)日：2017-08-18
申请号：CN201710082839.8
申请日：2017-02-16
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00
CPC classification number: C07K14/415 , C12N15/8283
Abstract: 本发明公开了一种产生PVY抗性的NteIF4E‑1基因突变体及其应用。所述的产生PVY抗性的NteIF4E‑1基因突变体，相对于核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的NteIF4E‑1基因，所述的产生PVY抗性的NteIF4E‑1基因突变体含有的NteIF4E‑1基因序列中159位的G被A取代发生了点突变，所述的产生PVY抗性的NteIF4E‑1基因突变体的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。应用为所述的产生PVY抗性的NteIF4E‑1的基因突变体在获得具有PVY抗性的烟草植株中的应用。本发明经烤烟品种云烟87的EMS突变体创制，利用Tilling技术筛选NteIF4E‑1基因突变株，突变材料中目标突变的测序验证及NteIF4E‑1基因纯合终止突变体材料的PVY抗性分析。采用本方法获得NteIF4E‑1基因发生终止突变的烤烟材料能够抗PVY病毒。
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公开(公告)号：CN102498878B
公开(公告)日：2014-04-09
申请号：CN201110343658.9
申请日：2011-11-03
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种新的烟草黑胫病抗性快速鉴定方法，包括育苗、烟苗移植及日常管理、接种体制备及烟苗切茎接种黑胫菌、病情调查与分级等步骤。本发明直接采用漂浮育苗，不需要移栽缓苗，用漂浮池恒温水培接种鉴定结果代替传统的土壤盆栽和大田鉴定结果，采用茎部切断创伤接种法代替传统的茎基部创伤接种法。减少环境温度和湿度对鉴定结果的影响，避免其他病害对鉴定结果的干扰，提高鉴定结果的准确性，减少菌种培养和接种后发病调查时间，采用茎部切断创伤法接种伤口大小基本一致，接种时易于操作，避免由于不同人员操作引起的伤口大小差异，从而减少人为误差。
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公开(公告)号：CN102498878A
公开(公告)日：2012-06-20
申请号：CN201110343658.9
申请日：2011-11-03
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种新的烟草黑胫病抗性快速鉴定方法，包括育苗、烟苗移植及日常管理、接种体制备及烟苗切茎接种黑胫菌、病情调查与分级等步骤。本发明直接采用漂浮育苗，不需要移栽缓苗，用漂浮池恒温水培接种鉴定结果代替传统的土壤盆栽和大田鉴定结果，采用茎部切断创伤接种法代替传统的茎基部创伤接种法。减少环境温度和湿度对鉴定结果的影响，避免其他病害对鉴定结果的干扰，提高鉴定结果的准确性，减少菌种培养和接种后发病调查时间，采用茎部切断创伤法接种伤口大小基本一致，接种时易于操作，避免由于不同人员操作引起的伤口大小差异，从而减少人为误差。
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公开(公告)号：CN101671720A
公开(公告)日：2010-03-17
申请号：CN200910094995.1
申请日：2009-09-22
Applicant: 云南省烟草农业科学研究院
Abstract: 一种病圃中烟草黑胫病菌的生理小种鉴定方法，采用鉴别寄主在田间的抗病反应与采集菌株在TTC固体培养基平板上的颜色变化相结合的方法，可以尽快鉴定出对所测病圃中烟草黑胫病菌的生理小种，实现了对现有病圃中烟草黑胫病菌的生理小种类型进行鉴定，然后有针对性地开展烟草抗病种质资源筛选和烟草新品种选育等研究，为烟草黑胫病的综合防治和确立抗病育种的目标提供依据；是一种较为经济实用的方法，具有良好的市场应用前景。
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