一种从转基因哺乳动物乳液中分离重组人抗体的方法

    公开(公告)号:CN102311498A

    公开(公告)日:2012-01-11

    申请号:CN201110240626.6

    申请日:2011-08-19

    Abstract: 本发明涉及抗体分离纯化领域,具体地,涉及一种从转基因哺乳动物乳液中分离重组人抗体的方法。该方法包括如下步骤:(1)将转基因哺乳动物乳液进行脱脂预处理,获得脱脂乳;(2)将所得脱脂乳进行去除酪蛋白处理,获得含目标抗体的乳清液;(3)将所得乳清液进行免疫亲和层析,从洗脱峰中获得目标抗体,其中,免疫亲和层析介质的配基为针对人抗体种属特征区域的单克隆抗体或其可变区。本方法还包括将免疫亲和层析中穿透峰进行精分离处理。本发明生产工艺稳定,适于乳腺生物反应器表达的重组人抗体的规模化生产,产品纯度高,工艺回收率高。

    一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法

    公开(公告)号:CN101948529A

    公开(公告)日:2011-01-19

    申请号:CN201010252608.5

    申请日:2010-08-13

    Abstract: 本发明一种高效纯化金属离子结合蛋白的疏水层析分离纯化方法,其步骤为:选取含有金属离子结合蛋白的待分离物料,添加沉淀剂进行沉淀粗分离获得蛋白混合物。在蛋白混合物中添加过量的螯合剂去除目标蛋白的辅基金属离子I,透析去除螯合剂后添加适量不易沉淀的金属离子II,以保持目标蛋白的三级结构。将处理所得蛋白混合物进行疏水层析分离操作,并在层析缓冲液中添加适量的金属离子II,由于金属离子辅基II可以有效地保持目标蛋白的天然结构,因此可以有效地提高目标蛋白与杂蛋白在疏水层析中的分辨率。进一步通过凝胶过滤层析可以得到高纯度、高回收率的金属离子结合蛋白的纯品,生产工艺稳定,适于规模化生产。

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