公开(公告)号：CN107385052A

公开(公告)日：2017-11-24

申请号：CN201710671363.1

申请日：2017-08-08

Applicant: 中国林业科学研究院热带林业研究所

Inventor： 周长品 ,  李昌荣 ,  李发根 ,  翁启杰 ,  陈升侃 ,  王莉 ,  甘四明

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了用于鉴定桉树无性系的STR引物及其应用。本发明通过大量的STR标记分型检测，筛选出了8对多态性高、扩增条带清晰的桉树STR引物用于鉴定桉树无性系，并建立了多重荧光检测体系。将该STR引物组用于鉴定桉树无性系，具有效率高、检测准确、操作方便等优势。本发明可有效甄别假冒和错乱的无性系，切实保障良种培育人和营林种植者的权益；并可为今后快速进行桉树种质资源遗传评价、遗传图谱构建、分子标记辅助育种、无性系指纹图谱构建和鉴定提供重要的技术支撑。

公开(公告)号：CN101899520B

公开(公告)日：2013-01-02

申请号：CN201010239919.8

申请日：2010-07-28

Applicant: 中国林业科学研究院热带林业研究所

Inventor： 甘四明 ,  李发根 ,  翁启杰 ,  李梅 ,  周长品 ,  于晓丽

IPC: C12Q1/68 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明提供了一种基于荧光dUTP的自动检测SSR分子标记的方法，包括以下步骤：(1)配制PCR反应体系：取1.0μL 10×buffer、dNTP 25～50μM、MgCl22.0mM、前向引物0.5μM、后向引物0.5μM、Taq酶1个单位、荧光dUTP10pmol和基因组DNA 5ng混合，加超纯水补至10μL；(2)进行降落PCR：94℃4min；20个循环：94℃30s、70～60℃或者66～56℃30s且每个循环降低0.5℃、72℃1min；再26个循环：94℃30s、60或者56℃30s、72℃1min；最后72℃10min，得PCR产物；(3)取PCR产物1.0μL加入9.34μL超纯甲酰胺、0.16μL分子量内标，95℃5min后放置冰上快速冷却，在测序仪上进行标记检测。