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公开(公告)号:CN111088379A
公开(公告)日:2020-05-01
申请号:CN202010046938.2
申请日:2020-01-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种用于检测马流产沙门氏菌的特异性引物组及其用途。所述的引物组由上游引物以及下游引物组成,其中所述的上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示,所述的下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。特异性实验结果表明该引物组只与马流产沙门氏菌反应,而与其他马、驴常见传染病病原均无交叉反应,具有良好的特异性。灵敏度实验表明,该引物组检测马流产沙门氏菌的最低限度为4.7×103CFU/ml,具有良好的敏感性。本发明的提出为马流产沙门氏菌的检测或诊断提供了一种有效技术手段,通过本发明的方法,使马流产沙门氏菌的检出率极大提高,诊断更精确,对于马流产沙门氏菌病的防控具有重要意义。
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公开(公告)号:CN105861555B
公开(公告)日:2019-05-14
申请号:CN201610309169.4
申请日:2016-05-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用。本发明的一种双向转录/表达质粒是以真核表达载体pEF4/myc‑His B为骨架进行改造得到的。为了建立马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)的反向遗传操作系统,本发明使用构建得到的双向转录/表达质粒双向分别表达马流感病毒PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、NS以及M基因,通过共转染、测序、生长曲线的绘制和酶切鉴定,成功拯救得到一株EIV及其突变体。同时与现有的pBD系统进行产毒量的比较,表明本发明建立的反向遗传操作系统优于pBD系统。本发明的提出为流感病毒的反向遗传研究提供了一种新的技术手段,同时也为日后深入研究马流感病毒的传播,致病机理,乃至疫苗候选株的筛选奠定了坚实基础。
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公开(公告)号:CN105861555A
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201610309169.4
申请日:2016-05-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
CPC classification number: C12N15/85 , C12N7/00 , C12N2760/16121 , C12N2760/16151 , C12N2800/107
Abstract: 本发明公开了一种高效的双向转录/表达质粒及其在流感病毒反向遗传学中的应用。本发明的一种双向转录/表达质粒是以真核表达载体pEF4/myc?His B为骨架进行改造得到的。为了建立马流感病毒(Equine influenza virus,EIV)的反向遗传操作系统,本发明使用构建得到的双向转录/表达质粒双向分别表达马流感病毒PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、NS以及M基因,通过共转染、测序、生长曲线的绘制和酶切鉴定,成功拯救得到一株EIV及其突变体。同时与现有的pBD系统进行产毒量的比较,表明本发明建立的反向遗传操作系统优于pBD系统。本发明的提出为流感病毒的反向遗传研究提供了一种新的技术手段,同时也为日后深入研究马流感病毒的传播,致病机理,乃至疫苗候选株的筛选奠定了坚实基础。
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公开(公告)号:CN104020294B
公开(公告)日:2016-03-30
申请号:CN201410239152.7
申请日:2014-05-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于检测马传染性贫血病毒p26蛋白的试剂盒及其用途。本发明所述试剂盒中包含由保藏号CGMCC NO.9106以及保藏号为CGMCC NO.9107的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体,其中任选一种单克隆抗体是用辣根过氧化物酶或异硫氰酸荧光素或生物素标记的。本发明发明人制备并筛选得到的两株杂交瘤细胞株能够识别马传染性贫血病毒p26蛋白不同抗原表位,且实验证明该两株杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体只与马传染性贫血病毒而不与其他马源病毒反应,使用本发明的方法检测马传染性贫血病毒p26蛋白抗原,其最低检测下限为98pg。本发明为马传染性贫血病毒的检测提供了一种有效的,准确性高的新的检测手段,同时为马传染性贫血病毒的防治提供了技术支撑。
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公开(公告)号:CN103073629B
公开(公告)日:2014-07-09
申请号:CN201310001962.4
申请日:2013-01-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种可抑制逆转录病毒粒子释放的蛋白,其编码序列及在抑制病毒从细胞释放中的应用。本发明研究了该蛋白与马传染性贫血病毒(EIAV)、人免疫缺陷病毒(HIV-1)及猴免疫缺陷病毒(SIV)的相互作用关系,并确定他们相互作用的关键位点。本发明通过分子克隆技术,获得了该蛋白基因和EIAV病毒样颗粒的真核表达载体,经测序分析,克隆的该蛋白基因与该基因的预测序列的同源性为99%,相对应的氨基酸序列同源率为94.0%。该蛋白具有限制人免疫缺陷病毒1型、马传染性贫血病毒、以及猴免疫缺陷病毒病毒粒子从细胞释放的能力,进一步的研究发现,EIAV的env蛋白能够拮抗该蛋白对病毒的限制作用。
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公开(公告)号:CN101818204B
公开(公告)日:2013-03-27
申请号:CN201010163049.0
申请日:2010-04-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 , 广东蓝岛生物技术有限公司
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种检测猕猴属动物TRIM5基因座突变的PCR方法,包括:(1)从猕猴属动物毛发中提取DNA;(2)以SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2为引物进行PCR扩增;(3)如果扩增产物为一条2300-2400bp片段,则待检测动物TRIM5基因座没有发生突变;如果扩增产物分别为2300-2400bp和3000-3150bp的两条片段,则TRIM5基因发生杂合突变;如果扩增产物仅为一条3000-3150bp的片段,则TRIM5基因座发生纯合突变。本发明方法能够准确的检测出猕猴属动物的TRIMCyp基因型,可以用于调查TRIMCyp在中国地区猕猴中分布,筛选阳性个体。
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公开(公告)号:CN117843773A
公开(公告)日:2024-04-09
申请号:CN202410059115.1
申请日:2024-01-15
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 珠海泰诺麦博制药股份有限公司
Inventor: 王亚玉 , 林跃智 , 廖化新 , 王晓钧 , 郑伟宏 , 郭巍 , 王月明 , 胡哲 , 袁晓辉 , 杜承 , 刘彤 , 王雪峰 , 王孝丽 , 刘荻萩 , 吴昌文 , 孙留克 , 贾振兴
Abstract: 本发明公开了一种能够中和马流感病毒的全马源单克隆抗体及其应用。所述的全马源单克隆抗体由轻链和重链组成,其中轻链的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,重链的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。细胞实验以及动物实验均证明该全马源单克隆抗体具有很好的中和马流感流行毒株JL89的能力。因此,该全马源单克隆抗体具有极高的研究价值,可以在大流行早期进行被动免疫保护,以减轻病毒在疫苗生产期间的危害。同时,本发明重点分析了该全马源单克隆抗体与HA蛋白的结合表位,为保护性流感疫苗的开发提供了基础。
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公开(公告)号:CN117388501A
公开(公告)日:2024-01-12
申请号:CN202311169354.4
申请日:2023-09-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/68 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种马血清淀粉样蛋白A双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。所述的试剂盒中含有抗马SAA单克隆抗体6F1包被的酶标板以及HRP标记的抗马SAA单克隆抗体3H5;所述的抗马SAA单克隆抗体6F1由杂交瘤细胞株SAA‑6F1分泌产生,所述的杂交瘤细胞株SAA‑6F1的保藏编号为CGMCCNo.45628;所述的抗马SAA单克隆抗体3H5由杂交瘤细胞株SAA‑3H5分泌产生,所述杂交瘤细胞株SAA‑3H5的保藏编号为CGMCC No.45627。相比于国外试剂盒,本发明建立的马SAA双抗体夹心ELISA试剂盒检测血清中SAA浓度的范围更大且所需要的试验次数更少,因此在实际应用中更加简便。本发明的提出为马SAA的检测提供了一种新的、有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN112746133B
公开(公告)日:2023-05-26
申请号:CN202110143614.5
申请日:2021-02-02
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia virus,EIAV)荧光PCR检测试剂盒及其应用。所述的检测试剂盒中含有用于特异性检测马传染性贫血病毒的引物和探针。相较于现有的检测方法,使用本发明的试剂盒能够检测到更多的EIAV毒株,具有广谱性的特点,而使用OIE推荐的引物探针组合仅能检测到美洲毒株EIAVUK3及其序列相似的毒株。并且本发明的试剂盒灵敏度高、特异性好,检测毒株范围广。本发明的提出为马传染性贫血病毒的检测提供了一种更为有效的技术手段。
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公开(公告)号:CN114437235A
公开(公告)日:2022-05-06
申请号:CN202210002017.5
申请日:2022-01-04
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了一种马链球菌马亚种8种蛋白的重组融合蛋白及其制备方法和应用。所述的重组融合蛋白是由马链球菌马亚种的cne、eag、SclC、SclI、SclF、eq5、eq8和ideE 8种蛋白依次以蛋白接头Gly‑Gly‑Gly连接后得到。其中,优选的,所述的重组融合蛋白命名为SE8,其氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。实验证明,本发明制备的重组融合蛋白SE8具有良好的抗原性和免疫原性,免疫小鼠能够有效诱导机体产生高水平的特异性抗体,并对S.equi感染小鼠起到保护作用。此外,该重组融合蛋白是通过大肠杆菌纯化制得的菌体蛋白,不含其它成分,具有较高的安全性,避免了感染发病的现象。
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