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公开(公告)号：CN118685387A
公开(公告)日：2024-09-24
申请号：CN202411186633.6
申请日：2024-08-28
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N9/52 , C12N15/75 , C12N15/57 , C12N1/21 , A23K20/189
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种改进丝氨酸蛋白酶ScAprE的热稳定性的方法及突变体和应用。本发明对高温碱性蛋白酶ScAprE进行分子改良，以提升其热稳定性，对于提升蛋白酶的综合性能，降低蛋白酶的使用成本具有重要意义，为蛋白酶的性质改良提供了有效的技术方法。
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公开(公告)号：CN118638831A
公开(公告)日：2024-09-13
申请号：CN202411104027.5
申请日：2024-08-13
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 , 中农科睿生物科技研究有限公司
IPC: C12N15/70 , C12N1/21 , C12N15/31 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/60 , C07K14/245 , C12N9/10 , C12N9/88 , C12P13/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及生物技术领域，具体涉及具有噬菌体抗性生产甲基苹果酸的大肠杆菌工程菌株、构建及发酵生产方法。本申请通过筛选在大肠杆菌中调控甲基苹果酸合酶表达的启动子并检测酶活性和产物产量，建立了甲基苹果酸合酶筛选方法。通过敲除噬菌体在宿主菌株中繁殖的关键基因，过表达异源SspBCDE操纵子和甲基苹果酸合酶，构建了具有噬菌体抗性的大肠杆菌工程菌株。在此基础上，提高菌株内乙酰辅酶A的供给并增加其葡萄糖利用能力构建了具有噬菌体抗性的可高产甲基苹果酸的大肠杆菌工程菌株。该工程菌株在发酵罐水平的甲基苹果酸产量可达110.19 g/L。
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公开(公告)号：CN118325794A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410764579.2
申请日：2024-06-14
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及微生物领域，具体涉及诺卡氏菌LHY‑2及其降解呕吐毒素的应用。该菌株的保藏编号为CGMCC No.26558。该菌株对能够将有毒化合物脱氧雪腐镰刀菌烯醇完全降解，反应过程不可逆，反应条件温和，最终将其完全转化后，被自身利用，不会引起二次污染。本发明提供的菌株可用于制备DON的生物脱毒制剂。本发明能够有效解决谷物原料、饲料及加工副产物中的呕吐毒素污染问题。本发明提供的菌株可应用于被DON污染的土壤或水体等各种生态系统，达到生态体修复的目的。
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公开(公告)号：CN116891843A
公开(公告)日：2023-10-17
申请号：CN202311159482.0
申请日：2023-09-11
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N9/52
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种提高高温碱性蛋白酶AprThc的表达量的方法及突变体。本申请对高温碱性蛋白酶AprThc进行S105A、I151V、I297T或F366Y突变，对高温碱性蛋白酶AprThc进行表达量的提升，对降低蛋白酶的使用成本具有重要意义，为蛋白酶的性质改良提供了有效的技术方法。
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公开(公告)号：CN116814593A
公开(公告)日：2023-09-29
申请号：CN202310199723.8
申请日：2023-03-05
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 发明涉及基因工程和蛋白质工程领域，具体涉及一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3‑M6、7、8、9和应用。本发明以碱性蛋白酶PA3为亲本，分别将loop18区域优化后的突变体ThAPT3‑M2、α8‑helix区域优化后的突变体ThAPT3‑M4和loop19区域优化后的突变体ThAPT3‑M5分别进行双区域叠加和三区域叠加，产生了四个突变体。突变体的Tm值提高了7.2℃、4.3℃、5.7℃、7.5℃，55℃下的t1/2分别提高到亲本的10.6倍、6.9倍、8.5倍、12.2倍，60℃下的t1/2分别提高到亲本的21.2倍、13.2倍、17.6倍、39.7倍。突变体M6、M7、M8和M9的比活力相较于亲本分别提高了23％、25％、20％和62％。因此，本发明提供的碱性蛋白酶突变体相较于野生型有着更好的热稳定性和催化活性，具有更好的工业应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116218821A
公开(公告)日：2023-06-06
申请号：CN202310199721.9
申请日：2023-03-05
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明涉及基因工程和蛋白质工程领域。具体地，涉及到一种提高碱性蛋白酶热稳定性的方法及突变体ThAPT3‑M1、ThAPT3‑M2和应用。本发明以碱性蛋白酶PA3为亲本，通过区段替换和定点突变，从而获得了热稳定性显著提高的蛋白酶突变体。亲本PA3在60℃条件下处理10min和20min后，剩余酶活分别为1.9％和1.6％。突变体ThAPT3‑M1和ThAPT3‑M2在60℃下处理10min后，剩余酶活分别为62％和69％；突变体ThAPT3‑M1和ThAPT3‑M2在60℃下处理20min后，剩余酶活分别为39％和43％。此外，突变体ThAPT3‑M2的比活力提高了25％。因此，本发明提供的碱性蛋白酶突变体相较于野生型有着更好的热稳定性和催化活性，具有更好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN116083475A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202310243947.4
申请日：2023-03-15
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/81 , C12N15/62 , C07K19/00 , C07K14/475 , C12R1/84
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种在毕赤酵母中表达人IGF‑1或其类似物LR3IGF‑1的方法。为了提高人IGF‑1或其类似物LR3IGF‑1的重组表达能力，本发明在毕赤酵母中通过融合蛋白促进目的蛋白的表达，本申请在IGF‑1或LR3IGF‑1的N端融合木聚糖酶基因XynCDBFV，实现了XynCDBFV‑IGF‑1或LR3IGF‑1融合蛋白的表达。通过融合蛋白之间设计TEV蛋白酶位点，然后纯化时利用TEV蛋白酶切割实现了融合蛋白的分离，得到具有生物活性的人IGF‑1及LR3IGF‑1蛋白。另外，通过高密度发酵，实现了融合蛋白的高效表达。
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公开(公告)号：CN116083468A
公开(公告)日：2023-05-09
申请号：CN202211395400.8
申请日：2022-11-09
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
IPC: C12N15/74 , C12N15/54 , C12N15/31 , C12N15/61 , C12N15/53 , C12N9/12 , C12N1/21 , C12P7/02 , C12R1/01
Abstract: 本发明涉及农业生物技术领域，具体涉及构建以葡萄糖、甘油和CO2为碳源生产肌醇的罗尔斯通氏菌工程菌的方法及菌株。本申请通过对罗尔斯通氏菌基因组中编码N‑乙酰氨基葡萄糖特异性磷酸转移酶系统的基因nagE进行突变(G265R)、并敲除编码GntR家族的转录调节因子的nagR使罗尔斯通氏菌能够高效利用葡萄糖。在此基础上构建了一株以可再生底物(葡萄糖、甘油)以及可直接以CO2为碳源合成肌醇的罗尔斯通氏菌H16工程菌株。基于该项技术，不但能够实现生物活性物质的合成，同时也是一种高效消除大气中的温室气体的方法。
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公开(公告)号：CN114736881B
公开(公告)日：2022-09-27
申请号：CN202210648730.7
申请日：2022-06-09
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于饲料生物技术领域，具体涉及葡萄糖氧化酶GoxM10的酸稳定性提高的突变体A4D及其衍生突变体和应用。本发明以高热稳定性葡萄糖氧化酶GoxM10为研究材料，采用蛋白质工程改造技术对其进行酸稳定性的改良研究。最后获得酸稳定性提升的突变体，从而促进了Gox在饲料工业中的应用。
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公开(公告)号：CN114736880A
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202210648724.1
申请日：2022-06-09
Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
Abstract: 本发明属于饲料生物技术领域，具体涉及酸稳定性提高葡萄糖氧化酶GoxM10的突变体D497N及其衍生突变体和应用。本发明以高热稳定性葡萄糖氧化酶GoxM10为研究材料，采用蛋白质工程改造技术对其进行酸稳定性的改良研究。最后获得酸稳定性提升的突变体，从而促进了Gox在饲料工业中的应用。
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