公开(公告)号：CN116083475A

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN202310243947.4

申请日：2023-03-15

Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

Inventor： 张红莲 ,  黄火清 ,  路泽群 ,  王苑 ,  杨浩萌 ,  柏映国 ,  张杰 ,  秦星 ,  涂涛 ,  苏小运 ,  王晓潞 ,  王亚茹 ,  于会民 ,  罗会颖 ,  姚斌

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  C07K14/475 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种在毕赤酵母中表达人IGF‑1或其类似物LR3IGF‑1的方法。为了提高人IGF‑1或其类似物LR3IGF‑1的重组表达能力，本发明在毕赤酵母中通过融合蛋白促进目的蛋白的表达，本申请在IGF‑1或LR3IGF‑1的N端融合木聚糖酶基因XynCDBFV，实现了XynCDBFV‑IGF‑1或LR3IGF‑1融合蛋白的表达。通过融合蛋白之间设计TEV蛋白酶位点，然后纯化时利用TEV蛋白酶切割实现了融合蛋白的分离，得到具有生物活性的人IGF‑1及LR3IGF‑1蛋白。另外，通过高密度发酵，实现了融合蛋白的高效表达。

公开(公告)号：CN118652926A

公开(公告)日：2024-09-17

申请号：CN202410914066.5

申请日：2024-07-09

Applicant: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所

Inventor： 张红莲 ,  黄火清 ,  路泽群 ,  曾湘艺 ,  王苑 ,  姚斌 ,  罗会颖 ,  王亚茹 ,  柏映国 ,  苏小运 ,  秦星 ,  田健 ,  涂涛 ,  张杰 ,  王晓璐 ,  于会民

IPC: C12N15/81 ,  C12N15/62 ,  C12N15/16 ,  C12R1/84

Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种在毕赤酵母中表达动物源IGF‑1与IGFBP3的IGF‑1结合区段复合物的方法。本申请在IGF‑1的N端融合它的内源结合蛋白IGFBP3的IGF‑1结合区段，获得正确折叠并稳定的蛋白复合物。本发明发现融合内源结合蛋白IGFBP3的IGF‑1结合区段,并在两个蛋白之间利用内源蛋白酶KEX2,在毕赤酵母系统直接实现了了IGFBP3的IGF‑1结合区段与IGF‑1的复合物的表达，该复合物具有细胞增殖活性，并且表达量达到0.5g/L表达水平。