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公开(公告)号:CN114908065A
公开(公告)日:2022-08-16
申请号:CN202210492200.8
申请日:2022-05-07
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N7/04 , C12N15/38 , C12N15/85 , C12N15/113 , A61K39/245 , A61P31/22 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了猪伪狂犬病病毒基因工程弱毒疫苗株及其建立方法和应用。本发明利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建得到猪伪狂犬病病毒基因工程弱毒疫苗株,即以猪伪狂犬病病毒(PRV)疫苗毒株Bartha‑K61为骨架包含变异毒株HB1201免疫保护基因gB、gC、gD的嵌合病毒,命名Bartha‑gBCDHB1201。该弱毒疫苗株遗传性质稳定,复制效率高且安全性好,同时能刺激机体产生针对国内流行的变异毒株的中和抗体,Bartha‑gBCDHB1201疫苗株能更好的阻止感染仔猪发病、降低组织病毒载量和减轻病毒感染造成的脏器损伤,提供100%完全免疫保护,适用于弱毒活疫苗与灭活疫苗的制备和使用。
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公开(公告)号:CN111593139B
公开(公告)日:2022-08-02
申请号:CN202010402843.X
申请日:2020-05-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测猪瘟病毒的RT‑RAA引物、探针和试剂盒及应用,所述检测猪瘟病毒的RT‑RAA引物和探针包括用于鉴定猪瘟病毒5’NTR基因的正向引物CSFV‑5’NTR‑F(SEQ ID NO.1)、反向引物CSFV‑5’NTR‑R(SEQ ID NO.2)和探针CSFV‑5’NTR‑Probe(SEQ ID NO.3)。通过上述引物和探针进行RT‑RAA核酸扩增所得到的扩增结果可以通过便携式蓝光仪进行肉眼可视化判断,可实现对CSFV进行快速、特异、灵敏、简便的检测,从而弥补现有检测技术的不足。
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公开(公告)号:CN114703179A
公开(公告)日:2022-07-05
申请号:CN202210482181.0
申请日:2022-05-05
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/70 , C12Q1/6844 , G01N33/543
Abstract: 本发明涉及动物疫病检测技术领域,具体涉及检测PDCoV的RT‑RAA‑LFD引物对、探针、试纸条、试剂盒及其应用。本发明以PDCoV的ORF1b基因为诊断靶标,设计、筛选、优化并最终获得了能够特异性检测PDCoV核酸的引物对与探针。使用本发明的引物对、探针、试剂盒和试纸条可以实现对PDCoV的快速检测,等温扩增所得产物用核酸检测试纸条检测后直接进行结果判读。整个检测过程无需昂贵的仪器设备,仅通过肉眼判读即可获得检测结果。本发明在基层和现场快速检测与甄别PDCoV感染方面具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号:CN111593139A
公开(公告)日:2020-08-28
申请号:CN202010402843.X
申请日:2020-05-13
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种检测猪瘟病毒的RT-RAA引物、探针和试剂盒及应用,所述检测猪瘟病毒的RT-RAA引物和探针包括用于鉴定猪瘟病毒5’NTR基因的正向引物CSFV-5’NTR-F(SEQ ID NO.1)、反向引物CSFV-5’NTR-R(SEQ ID NO.2)和探针CSFV-5’NTR-Probe(SEQ ID NO.3)。通过上述引物和探针进行RT-RAA核酸扩增所得到的扩增结果可以通过便携式蓝光仪进行肉眼可视化判断,可实现对CSFV进行快速、特异、灵敏、简便的检测,从而弥补现有检测技术的不足。
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公开(公告)号:CN104593336B
公开(公告)日:2019-05-17
申请号:CN201410823151.7
申请日:2014-12-25
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明提供了一种猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒RvHBJX及其应用,属于病毒基因工程技术领域。本发明的猪繁殖与呼吸综合征嵌合病毒RvHBJX是以低致病性PRRSV毒株HB‑1/3.9为骨架包含高致病性PRRSV毒株JXwn06结构蛋白编码区的嵌合病毒,该嵌合病毒经MARC‑145细胞体外连续传代80次,该病毒遗传性质表现稳定;病毒对宿主细胞的适应性随传代次数的增加逐渐增强;嵌合病毒传代60次(P60)及以上对本体动物具有较好的安全性,且接种后能够对高致病性PRRSV毒株感染提供100%的免疫保护,可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株,用于预防猪繁殖与呼吸综合征,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN108931642A
公开(公告)日:2018-12-04
申请号:CN201710391560.8
申请日:2017-05-27
Applicant: 中国农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/533 , G01N33/535
CPC classification number: G01N33/56983 , G01N33/533 , G01N33/535
Abstract: 本发明提供了一种检测猪伪狂犬病毒野毒抗体的试剂盒及检测方法。所述试剂盒包括以猪伪狂犬病病毒HB1201毒株为模板,利用上下游引物进行PCR扩增得到的重组蛋白;所述上游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述下游引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明提供的含有gE重组蛋白的猪伪狂犬病毒野毒抗体的试剂盒,与商品化ELISA试剂盒相比,具有更高的检测敏感性。本发明建立的PRV gE抗体检测间接化学发光酶免疫方法为我国猪群中猪伪狂犬病野毒感染情况调查提供了敏感的检测手段,可用于病毒感染的早期、快速诊断,具有较好的开发前景。
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公开(公告)号:CN116694789B
公开(公告)日:2024-06-14
申请号:CN202310559526.2
申请日:2023-05-18
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明提供一种检测猪格拉瑟氏菌的RAA引物对和探针组合及试剂盒,可以简单、快速、灵敏、特异性检测使猪格拉瑟氏菌。所提供的RAA引物对和探针,其中引物对中上游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:1,下游引物的核苷酸序列为SEQ ID NO:2,所述的探针的核苷酸序列为SEQ ID NO:3。本发明所提供的基于上述引物对和探针用于检测猪格拉瑟氏菌的RAA试剂盒,只需在42℃恒温条件下反应30min即可完成,整个反应过程对仪器设备要求低,耗时短,操作简单,结果可实现肉眼可视化,更适用于基层现场诊断和即时检测,真正意义上实现了便携式快速核酸检测,可为格拉瑟氏病的快速诊断、实时监测防控提供技术支持。
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公开(公告)号:CN113969267B
公开(公告)日:2024-02-27
申请号:CN202111369459.5
申请日:2021-11-15
Applicant: 中国农业大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/86 , C07K14/005 , A61K39/12 , A61P31/14
Abstract: 本发明涉及病毒基因工程技术领域,具体地,涉及一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1β‑VS19GG,并进一步公开其构建方法与应用。本发明所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1β‑VS19GG,利用反向遗传操作技术,通过将高致病性PRRSV毒株JXwn06在非结构蛋白nsp1β的第19位缬氨酸和20位丝氨酸均突变为甘氨酸,进而构建得到所需突变病毒。所述突变病毒不仅遗传性状稳定,并且由于关键氨基酸位点的突变明显改变了亲本毒株诱导炎症反应的能力,使得所述突变病毒感染宿主细胞诱导强烈炎症反应,可以作为疫苗研发的候选毒株,为设计增强细胞免疫疫苗提供新的思路。
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公开(公告)号:CN113583980B
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202110989500.2
申请日:2021-08-26
Applicant: 中国农业大学
Abstract: 本发明属于病毒基因工程技术领域,具体涉及一种猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1α‑G90A,并进一步公开其应用。本发明所述猪繁殖与呼吸综合征突变病毒RvJXwn‑nsp1α‑G90A,通过将高致病性的PRRSV毒株JXwn06非结构蛋白nsp1α的第90位氨基酸由甘氨酸突变为丙氨酸获得突变病毒,获取了诱导降解其靶细胞‑猪肺泡巨噬细胞(PAMs)PAMs细胞表面SLA‑I分子功能受损的突变毒株。该突变病毒感染宿主细胞后,可诱导降解靶细胞表面SLA‑I分子的功能严重受损,且该突变病毒遗传性质表现稳定,可作为猪繁殖与呼吸综合征的疫苗侯选株,用于预防猪繁殖与呼吸综合征,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN117159708A
公开(公告)日:2023-12-05
申请号:CN202210581036.8
申请日:2022-05-25
Applicant: 中国农业大学
IPC: A61K45/00 , A61K31/4709 , A61K31/496 , A61P31/14 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12Q1/70
Abstract: 本发明涉及病毒抑制剂技术领域,尤其涉及靶向3CLpro的化合物在抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用。本发明以3CLpro作为靶点,综合筛选针对猪繁殖与呼吸综合征病毒和冠状病毒的多种化合物,发现靶向3CLpro的化合物具备不同程度的猪繁殖与呼吸综合征病毒和冠状病毒的抑制效果,尤其是西咪匹韦、LLY‑507和盐酸氟哌噻吨,这三种化合物均具有显著的抗猪繁殖与呼吸综合征病毒活性,并且除了靶向3CLpro之外,LLY‑507和盐酸氟哌噻吨可能还作用于细胞上的其他靶点来抑制猪繁殖与呼吸综合征病毒的复制。本发明提供的三种化合物在抗PRRSV药物的开发上具有良好的应用前景。
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