公开(公告)号：CN104894024B

公开(公告)日：2018-01-12

申请号：CN201510317461.6

申请日：2015-06-11

Applicant: 中南大学

Inventor： 何海伦 ,  武翠玲 ,  杨兴昊 ,  刘丹 ,  张姜 ,  吴日帮 ,  黄雅雯

IPC: C12N1/20 ,  C12P21/06 ,  C12N9/52 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明属于微生物技术领域，具体公开了一株假交替单胞菌突变菌株Pseudoalteromonas sp.CSN423‑M及其应用。所述Pseudoalteromonas sp.CSN423‑M菌株已于2015年1月9日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏编号为CCTCC No.M 2015024。该菌株的16S rDNA核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明的假交替单胞菌CSN423‑M能够产胞外蛋白酶，经测定，该菌培养96h后，胞外蛋白酶活性达1461.33U/mL，因此,可用于生产蛋白酶，对蛋白酶的研究和利用具有重要的价值。

公开(公告)号：CN106896093A

公开(公告)日：2017-06-27

申请号：CN201710115976.7

申请日：2017-03-01

Applicant: 中南大学

Inventor： 何海伦 ,  黄嘉丰 ,  吴日帮 ,  马昌杯 ,  刘丹 ,  张姜 ,  廖斌强

IPC: G01N21/64

Abstract: 本发明提供了一种利用疏水荧光探针ANS检测蛋白质结构域与线性生物大分子相互作用的方法，属于生物技术领域。该方法利用线性生物大分子底物与蛋白质结构域的相互作用，来封闭蛋白质结构域表面的疏水区域，从而阻断疏水荧光探针ANS与蛋白质结构域表面疏水区结合，造成荧光强度降低。该方法可应用于蛋白质结构域与线性生物大分子相互作用的定性定量分析，为研究线性生物大分子与蛋白质结构域相互作用提供新的实验思路及技术手段。

公开(公告)号：CN103105427A

公开(公告)日：2013-05-15

申请号：CN201310018497.5

申请日：2013-01-18

Applicant: 中南大学

Inventor： 何海伦 ,  陈淑华 ,  刘丹 ,  杨兴昊 ,  黄嘉丰

IPC: G01N27/447

Abstract: 本发明提供了一种蛋白酶谱电泳检测方法，属于生物技术技术领域。该方法包括制胶、加样、电泳、洗胶、反应显色步骤，其中制胶时没有向凝胶里加入蛋白酶底物，而在显色之前将胶在1%的底物溶液中浸泡。避免了底物在胶中对蛋白迁移率的影响,不需要价格昂贵的电转设备,可以用于各种蛋白酶谱的检测，应用广泛。

公开(公告)号：CN113652413B

公开(公告)日：2023-08-29

申请号：CN202110868389.1

申请日：2021-07-30

Applicant: 中南大学

Inventor： 何海伦 ,  黄嘉丰 ,  颜晓涛 ,  殷婷婷 ,  饶海潋 ,  肖逊

IPC: C12N9/52 ,  C12N1/20 ,  A61L31/04 ,  A61L31/14 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及一种细菌蛋白酶及其制备方法和应用，本发明所述的细菌蛋白酶为假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)CSN423‑M，保藏编号为CCTCC No.M 2015024所产的胞外蛋白酶E423。采用发酵罐发酵工艺制备，包括斜面培养、种子培养和发酵罐发酵。利用本发明发酵培养基制备的发酵液提高了产酶量，缩短了产酶时间，且本发明的蛋白酶在胶原蛋白膨胀中，具有优异的效果。本发明为实现海洋菌蛋白酶的应用及胶原蛋白膨胀改性奠定了基础，具有巨大的经济效益和市场价值。

公开(公告)号：CN113652413A

公开(公告)日：2021-11-16

申请号：CN202110868389.1

申请日：2021-07-30

Applicant: 中南大学

Inventor： 何海伦 ,  黄嘉丰 ,  颜晓涛 ,  殷婷婷 ,  饶海潋 ,  肖逊

IPC: C12N9/52 ,  C12N1/20 ,  A61L31/04 ,  A61L31/14 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明涉及一种细菌蛋白酶及其制备方法和应用，本发明所述的细菌蛋白酶为假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.)CSN423‑M，保藏编号为CCTCC No.M 2015024所产的胞外蛋白酶E423。采用发酵罐发酵工艺制备，包括斜面培养、种子培养和发酵罐发酵。利用本发明发酵培养基制备的发酵液提高了产酶量，缩短了产酶时间，且本发明的蛋白酶在胶原蛋白膨胀中，具有优异的效果。本发明为实现海洋菌蛋白酶的应用及胶原蛋白膨胀改性奠定了基础，具有巨大的经济效益和市场价值。

公开(公告)号：CN112940967A

公开(公告)日：2021-06-11

申请号：CN202110165341.4

申请日：2021-02-06

Applicant: 中南大学

Inventor： 何海伦 ,  艾晓娟 ,  殷婷婷 ,  颜晓涛 ,  饶海潋 ,  蒋利玲 ,  张好

IPC: C12N1/20 ,  C12P1/04 ,  A23L33/10 ,  A23L7/10 ,  A23L7/104 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一株来源米粉发酵废水的乳酸杆菌(Lactobacillus fermentum)MF423及应用。本发明的乳酸杆菌(Lactobacillus fermentum)MF423发酵米糠提取物在体内和体外均具有改善胰岛素抵抗的功效。经测定，在细胞和动物水平上，该菌发酵米糠提取物均有较高的抗氧化活性，能够显著增加细胞对培养基中葡萄糖的消耗量、降低小鼠血糖，明显清除小鼠脂质积聚，抑制低度炎症的发生，对后续高效利用低值资源米糠和其在临床2型糖尿病治疗应用中具有重要价值。

公开(公告)号：CN104122317B

公开(公告)日：2017-03-29

申请号：CN201410309658.0

申请日：2014-07-01

Applicant: 中南大学

Inventor： 何海伦 ,  刘丹 ,  武翠玲 ,  杨兴昊 ,  吴日帮 ,  黄嘉封 ,  黄雅雯

IPC: G01N27/447

Abstract: 本发明公开了一种蛋白酶谱电泳检测方法在快速鉴定蛋白酶种类上的应用，包括以下步骤：a.制备不含蛋白酶底物的SDS聚丙烯酸胺凝胶；b.蛋白酶样品与不含β-巯基乙醇的加样缓冲液混匀后加样，且加样时样品不在沸水浴中加热；c.电泳；d.洗胶；e.将胶在含有不同蛋白酶抑制剂的底物溶液中浸泡；f.反应显色。本发明方法能对不同蛋白酶进行定性，比传统方法在耗时上明显缩短；省去了分离纯化蛋白酶的繁琐步骤；重复性好，灵敏度高，活性条带测定准确，非常有利于后续的蛋白酶鉴定及有目的的纯化工作；可以用于各种蛋白酶类型的检测，有广阔的应用空间。

公开(公告)号：CN103105427B

公开(公告)日：2015-04-22

申请号：CN201310018497.5

申请日：2013-01-18

Applicant: 中南大学

Inventor： 何海伦 ,  陈淑华 ,  刘丹 ,  杨兴昊 ,  黄嘉丰

IPC: G01N27/447

Abstract: 本发明提供了一种蛋白酶谱电泳检测方法，属于生物技术技术领域。该方法包括制胶、加样、电泳、洗胶、反应显色步骤，其中制胶时没有向凝胶里加入蛋白酶底物，而在显色之前将胶在1%的底物溶液中浸泡。避免了底物在胶中对蛋白迁移率的影响,不需要价格昂贵的电转设备,可以用于各种蛋白酶谱的检测，应用广泛。