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公开(公告)号：CN111073859A
公开(公告)日：2020-04-28
申请号：CN201911280787.0
申请日：2019-12-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种检测牛细小病毒的双抗体夹心ELISA试剂盒及其应用。本发明使用纯化后的兔抗BPV VP2蛋白多克隆抗体作为捕获抗体，使用由保藏号为:CGMCC No.18896的杂交瘤细胞株分泌产生的单克隆抗体作为检测抗体，建立了双抗体夹心ELISA方法。特异性试验结果表明该方法特异性良好，与BRV、PRV、PEDV和TGEV均不发生反应。灵敏性试验表明该方法对病毒的最低检出量为3.125×102.8TCID50/mL。重复性试验表明该方法变异系数均小于10％，确定该方法具有良好的重复性。通过对临床样品的检测发现，双抗体夹心ELISA方法与PCR方法的检测结果一致，符合率为100％。本发明的提出可用于牛细小病毒的诊断，并为牛细小病毒感染的防控提供了一种快速检测方法和监测手段。
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公开(公告)号：CN110734879A
公开(公告)日：2020-01-31
申请号：CN201911107985.7
申请日：2019-11-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N1/20 , A23K10/18 , A23K50/30 , A61K35/747 , A61P1/00 , A61P37/04 , A61P31/14 , A61P31/04 , C12R1/225
Abstract: 本发明提供了一株罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR-CO21及其应用，涉及益生菌技术领域。该罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR-CO21，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No.M 2019601。该罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR-CO21在肠道内定植性能好，黏附性好，定植后能有效抑制TGEV感染，提高仔猪抵抗病毒侵染、抵抗细菌感染的能力和免疫力。此外，本发明还提供了罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR-CO21株在提高仔猪抗传染病能力中应用的方法。
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公开(公告)号：CN110607282A
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201910788857.7
申请日：2019-08-26
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明公开了一种牛细小病毒单克隆抗体及其在检测牛细小病毒感染中的应用。所述的单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.18301的杂交瘤细胞株分泌产生。此外本发明还提出了用于检测牛细小病毒感染的间接竞争ELISA试剂盒，并建立了相应的间接竞争ELISA检测方法。实验证明，本发明建立的间接竞争ELISA方法具有良好的敏感性、特异性和重复性，比间接ELISA方法和夹心ELISA方法的检测敏感度高出一个数量级。通过对临床样品检测，与PCR结果一致，表明该方法检测结果准确可靠。因此本发明可用于牛细小病毒感染的临床检测，尤其适用于检测早期感染和隐性感染时病毒含量低的病料，同时，也为牛细小病毒流行病学调查及疫情监控提供了一种可靠的方法。
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公开(公告)号：CN108169492B
公开(公告)日：2019-12-17
申请号：CN201711382428.7
申请日：2017-12-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括从左到右依次连接的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水滤纸，还包括位于下方的PVC底板，其中PVC底板的作用是提供组装平台，硝酸纤维素膜上具有山羊抗鼠IgG喷涂的质控线，以及兔抗牛轮状病毒多克隆抗体喷涂的检测线，胶体金垫上涂覆有胶体金颗粒标记的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体，样品垫提供了待测样品加入的位置；其中，所述的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体是由保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会微生物中心的，菌种保藏编号为CGMCC NO.14726的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明制备的试纸条，灵敏度好，特异性高，操作简单、快速，适用于现地检测。
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公开(公告)号：CN108169492A
公开(公告)日：2018-06-15
申请号：CN201711382428.7
申请日：2017-12-15
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种用于检测牛轮状病毒的胶体金免疫层析试纸条及其制备方法和应用。所述的试纸条包括从左到右依次连接的样品垫、胶体金垫、硝酸纤维素膜以及吸水滤纸，还包括位于下方的PVC底板，其中PVC底板的作用是提供组装平台，硝酸纤维素膜上具有山羊抗鼠IgG喷涂的质控线，以及兔抗牛轮状病毒多克隆抗体喷涂的检测线，胶体金垫上涂覆有胶体金颗粒标记的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体，样品垫提供了待测样品加入的位置；其中，所述的鼠抗牛轮状病毒VP6蛋白的单克隆抗体是由保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会微生物中心的，菌种保藏编号为CGMCC NO.14726的杂交瘤细胞株分泌产生。本发明制备的试纸条，灵敏度好，特异性高，操作简单、快速，适用于现地检测。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119530134A
公开(公告)日：2025-02-28
申请号：CN202510103996.7
申请日：2025-01-23
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪肠类器官与淋巴细胞共培养体系及其构建方法和应用，属于病毒培养技术领域。所述的共培养体系是由猪回肠类器官与猪小肠上皮内淋巴细胞通过共培养后得到。使用所述的共培养体系在不添加胰酶的情况下，PEDV仍然可以感染类器官，且使用该共培养体系分离培养PEDV野毒株，在盲传第四代时可观察到类器官病变，而此时其在Vero细胞上没出现病变。RT‑PCR鉴定发现，PEDV野毒株在该共培养体系上连续传代五代均可扩增出条带，而无论是否添加胰酶，PEDV在Vero细胞上连续盲传五代均没有扩增出条带。本发明的提出对了解PEDV发病机制及开发预防PEDV感染的新药物以及疗法具有重要意义。
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公开(公告)号：CN118460584A
公开(公告)日：2024-08-09
申请号：CN202410433277.7
申请日：2024-04-10
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于CRISPR‑Cas9系统的营养缺陷型乳酸菌基因编辑系统及应用，所述的营养缺陷型乳酸菌基因编辑系统包括以pLCNICK为骨架构建得到的基因编辑质粒，所述的基因编辑质粒中含有识别特异性靶序列的sgRNAs以及所要插入或敲除位点的上下游同源序列，其连接顺序为上游同源序列‑下游同源序列‑sgRNAs。所述的系统用于外源基因插入时，还包括在上、下游同源序列中间插入外源基因序列。本发明利用CRISPR‑Cas9系统和营养缺陷型选择标记建立了一套在乳酸菌基因组任意位点进行插入、缺失或突变操作的基因组编辑系统，实现了对不同乳酸菌菌株的不同基因位点高效、精确敲除及插入，实现了乳酸菌系统复制的人工控制。
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公开(公告)号：CN110734879B
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN201911107985.7
申请日：2019-11-13
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12N1/20 , A23K10/18 , A23K50/30 , A61K35/747 , A61P1/00 , A61P37/04 , A61P31/14 , A61P31/04 , C12R1/225
Abstract: 本发明提供了一株罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR‑CO21及其应用，涉及益生菌技术领域。该罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR‑CO21，其在中国典型培养物保藏中心的保藏编号为CCTCC No.M 2019601。该罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR‑CO21在肠道内定植性能好，黏附性好，定植后能有效抑制TGEV感染，提高仔猪抵抗病毒侵染、抵抗细菌感染的能力和免疫力。此外，本发明还提供了罗伊氏乳杆菌(Lactobacillus reuteri)LR‑CO21株在提高仔猪抗传染病能力中应用的方法。
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公开(公告)号：CN114518447A
公开(公告)日：2022-05-20
申请号：CN202210067681.8
申请日：2022-01-20
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N33/52 , G01N33/543 , G01N33/558 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/58 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种检测牛细小病毒的信号增强型胶体金免疫层析试纸条及其应用。所述的试纸条按照连接顺序依次包括样品垫，胶体金垫，硝酸纤维素膜，吸水垫及位于下方的作为组装平台使用的PVC底板，所述的胶体金垫上吸附有胶体金和辣根过氧化物酶共同标记的抗牛细小病毒单克隆抗体，所述硝酸纤维素膜上具有兔抗牛细小病毒多克隆抗体包被的检测线，以及山羊抗鼠IgG包被的质控线，样品垫提供了待测样品加入的位置；其中，所述的抗牛细小病毒单克隆抗体由分泌牛细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株分泌产生，所述的分泌牛细小病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株命名为8C10，菌种保藏编号为：CGMCC NO.23880。本发明的提出为牛细小病毒的检测提供了有效的技术手段。
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公开(公告)号：CN107082802B
公开(公告)日：2020-02-11
申请号：CN201710116956.1
申请日：2017-03-01
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 本发明公开了一种4型蓝舌病病毒VP2蛋白中和性B细胞抗原表位多肽及其应用。本发明采用噬菌体展示技术对BTV VP2蛋白抗原表位氨基酸进行筛选。经过3轮淘选后进行测序，测序结果经分析比对后获得共同的短肽序列为160NH161。实验证明，160NH161与4A‑1G7上清、腹水均发生特异性反应并且160NH161与1‑24型BTV阳性标准血清反应特异性良好。本发明的提出，对于4型BTV的临床诊断提供了新的技术手段，也为后续建立BTV的型特异性鉴别诊断方法以及4型BTV相关表位疫苗的制备奠定了物质基础。
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