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公开(公告)号：CN102660493A
公开(公告)日：2012-09-12
申请号：CN201210106705.2
申请日：2012-04-12
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明公开了一种木霉菌产孢培养基及产孢方法。该木霉菌产孢培养基由果糖、木糖和一种基本培养基(酵母提取物、酒石酸铵、硝酸铵、磷酸二氢钾、七水合硫酸镁、氯化钠、二水合氯化钙、七水合硫酸亚铁、乙二胺四乙酸二钠和水)组成。分别以果糖和木糖为碳源，以酒石酸铵和酵母提取物为氮源；加入的无机盐具有构成微生物细胞的组成成分，并具有调节酶活性及细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位等功能；其中的磷酸氢盐调节培养基的酸碱度，维持该菌生长的最适pH值；满足了该菌的生长需要。本发明的产孢方法为22～28℃，光照培养。本发明的胡桃球内生真菌木霉菌产孢培养基培养五天产孢量可达到7.4×107个孢子/毫升培养基。
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公开(公告)号：CN1963493A
公开(公告)日：2007-05-16
申请号：CN200610119255.5
申请日：2006-12-07
Applicant: 上海交通大学
IPC: G01N30/00 , B01J20/281
Abstract: 本发明公开了一种以HP20树脂为填料的固相萃取试剂盒及其使用方法，属于生物化学工程领域。本发明试剂盒包括离心固相萃取柱和固相萃取试剂瓶组，两者装在同一个试剂盒中，配套使用。离心固相萃取柱包括上部的储液槽和下部填料管两部分，储液槽作为离心前样品和各种洗液的加样槽，填料管中填充有HP20树脂材料；固相萃取试剂瓶组包括：样品稀释液瓶，第一杂质洗脱液瓶，第二杂质洗脱液瓶，以及紫杉烷洗脱液瓶。本发明还提供了以HP20树脂为填料的固相萃取试剂盒的使用方法，包括离心固相萃取柱的再生和平衡、样品吸附、强碱洗脱、强酸洗脱、以及弱酸洗脱和富集。本发明可以实现紫杉烷样品的完整、高效分离、高收率的固相萃取。
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公开(公告)号：CN1788551A
公开(公告)日：2006-06-21
申请号：CN200510111221.7
申请日：2005-12-08
Applicant: 上海交通大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明是一种生物技术领域的长春花毛状根再生植株的方法。本发明将长春花毛状根外植体切段，置于愈伤组织诱导培养基上，经光照培养，形成愈伤组织，通过接种到不定芽诱导培养基上培养，形成芽点，挑选芽点的愈伤组织继续培养，经光照培养，形成不定芽，切取不定芽转移到生根培养基上，产生出不定根，将再生出的完整植株转移到快速繁殖培养基上继续培养，选取株系，移栽到盛有移栽基质的花盆中，通过驯化可获得生长正常的长春花植株。本发明筛选出适合长春花毛状根不定芽分化和生根的培养基，长春花毛状根的不定芽分化率达80％，不定芽生根率为100％，再生植株的移栽成活率为100％。
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公开(公告)号：CN1560255A
公开(公告)日：2005-01-05
申请号：CN200410016769.9
申请日：2004-03-04
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种红豆杉紫杉烷C13－侧链－N－苯甲酰转运酶蛋白编码序列，属于基因工程领域。所分离出的DNA分子包括：编码具有红豆杉紫杉烷C13－侧链－N－苯甲酰转运酶活性的多肽的核苷酸序列，所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.3中从核苷酸第36－1352位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40－55℃条件下与SEQ ID NO.3中从核苷酸第36－1352位的核苷酸序列杂交。本发明是一种催化苯甲酰CoA和去苯甲酰紫杉醇生成紫杉醇的酶，对保护人民的健康生长有所帮助。
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公开(公告)号：CN1560250A
公开(公告)日：2005-01-05
申请号：CN200410016709.7
申请日：2004-03-04
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/29 , C12N15/79 , C12N15/82 , C07K14/415
Abstract: 一种红豆杉凝集素蛋白编码序列，用于生物、基因工程领域。所分离出的DNA分子包括：编码具有红豆杉凝集素蛋白活性的多肽的核苷酸序列，而且所述的核苷酸序列与SEQ ID NO.3中从核苷酸第63－497位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者所述的核苷酸序列能在40－55℃条件下与SEQ ID NO.3中从核苷酸第63－497位的核苷酸序列杂交。本发明在植物抗虫中具有明显的作用，本发明具有很大的应用价值。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN1460720A
公开(公告)日：2003-12-10
申请号：CN03116164.2
申请日：2003-04-03
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12P17/02 , C07D305/14
Abstract: 一种利用酶催化半合成紫杉醇的方法属于分子生物工程与生物化学工程领域。紫杉醇的酶催化半合成以红豆杉中含量相对丰富的10去乙酰巴卡亭三为底物，对紫杉醇三环二萜骨架修饰过程中采用酶催化的方法，直接对10位和13位进行特异性酰化，且整个反应在温和条件下进行，紫杉醇酶催化半合成以三个重组酰化酶为催化剂，在反应器中进行三步酰化，从而合成紫杉醇。本发明提供的紫杉醇酶催化半合成方法，对紫杉醇骨架进行修饰，所需步骤更少，操作更简单，提高了紫杉醇合成的选择性和产率，从而在更大规模上进行更大强度的紫杉醇生产。
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公开(公告)号：CN104610383B
公开(公告)日：2017-01-04
申请号：CN201510031256.3
申请日：2015-01-21
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07G99/00
Abstract: 本发明公开一种用萃取反萃分离纯化楸树内生真菌发酵液中楸灵素的方法：调整楸树内生真菌发酵液pH为4～6；用稀酸溶液预饱和处理乙酸乙酯，使得乙酸乙酯的pH和所述发酵液匹配；将调整好pH的楸树内生真菌发酵液与乙酸乙酯混匀，静置进行双液相萃取，收集乙酸乙酯相；将所述收集到的乙酸乙酯相和pH为7～11水相混匀，进行反萃取，回收水相即为纯化的楸灵素水溶液。与现有技术相比，本发明利用楸灵素的弱酸性，在保证80％以上的楸灵素收率的条件下，经过一次简单的萃取反萃过程，分离除去发酵液中的亲水杂质和疏水杂质，将楸灵素的纯度提高10倍以上，分离过程中乙酸乙酯可以悬蒸回收后重复利用，分离成本低，环境压力小。
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公开(公告)号：CN104387425B
公开(公告)日：2016-08-24
申请号：CN201410532262.2
申请日：2014-10-11
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07G99/00
Abstract: 本发明公开一种从楸树内生真菌发酵液中浓缩分离楸灵素的方法及其应用；所述方法包括如下步骤：步骤一、调整楸树内生真菌发酵液pH为4～10；步骤二、预冷pH调整后的楸树内生真菌发酵液至预冷温度为0～4℃；步骤三、在保持晶核存在的情况下对步骤二所述楸树内生真菌发酵液进行缓慢降温至结冰；步骤四、继续缓慢降温结冰，直至剩余液态发酵液的体积缩至设定值，停止降温，收集未结冰的液体部分，即得楸灵素浓缩液。本发明将楸树内生真菌发酵液浓缩到原体积的十分之一以下，同时保证90％以上的楸灵素收率。与现有技术相比，本发明不仅可以更有效的保证原料中楸灵素的稳定、确保较高的浓缩收率，而且不添加任何有机溶剂，保证浓缩液质量。
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公开(公告)号：CN103333166A
公开(公告)日：2013-10-02
申请号：CN201310261417.9
申请日：2013-06-26
Applicant: 上海交通大学
IPC: C07D461/00
Abstract: 本发明公开了一种利用固体酸碱催化合成长春西汀的方法，所述方法包括如下步骤：步骤1，固体碱水解：将长春胺乙醇溶液送入固体碱水解柱中，进行水解反应；步骤2，分子筛脱水：将水解后的长春胺乙醇溶液通过分子筛脱水柱，进行脱水反应；步骤3，固体酸脱水酯化：脱水后的料液进入固体酸脱水酯化柱，进行固体酸脱水酯化，即可。本发明采用强碱代替氢氧化钠催化长春胺水解，固体强酸代替浓硫酸进行脱水、酯化得到长春西汀，本方法所用催化剂可以和产物方便的分离，降低生产成本；本发明方法生产过程中不产生酸碱废水，环保性好，更适于工业化生产；可重复使用，有效的降低生产成本，所用固体酸碱对设备无腐蚀，不产生酸碱废水，绿色环保。
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公开(公告)号：CN101487022A
公开(公告)日：2009-07-22
申请号：CN200810041214.8
申请日：2008-07-31
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种分子生物学技术领域的制备方法，该制备方法包括如下步骤：第一步、内生真菌的分离：分离内生真菌并且采用菌丝尖端切割法进行纯化；第二步、诱导孢子产生：将长枝木霉CCTCC M 208102接种到PDA培养基上培养，将长有菌丝的PDA培养基切下一小块，放于CMX培养基上，室温下培养，1到3天后有孢子长出；第三步、液体发酵培养：挑取孢子转接到装有CM液体培养基中，26℃到28℃，180rpm摇床振荡培养，7到8天后中止发酵，即得具有抑制肝癌细胞生长作用的发酵液。本发明适合工业规模化发酵生产具有抑制人肝癌细胞株HepG2生长的作用且高效低毒的发酵液。
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