用于土壤次生盐渍化监测的绿色荧光蛋白的表达及应用方法

    公开(公告)号:CN105238808A

    公开(公告)日:2016-01-13

    申请号:CN201510629664.9

    申请日:2015-09-29

    Abstract: 一种用于土壤次生盐渍化监测的绿色荧光蛋白的表达及应用方法,根据设计出的PCR引物扩增出含有酶切位点的绿色荧光蛋白gfp基因序列,将其与pMD18‐T质粒连接,重组质粒与穿梭质粒pHIS1525分别酶切后连接,连接产物转入大肠杆菌DH5α中,通过菌落PCR技术挑选含有目的基因片段的阳性克隆。提取重组质粒pHIS1525‐GFP,将其转入已制备好的巨大芽孢杆菌NCT‐2原生质体中,转化子能够表达绿色荧光蛋白。将转化菌株接种到次生盐渍化土壤中,通过监测荧光菌株来分析巨大芽孢杆菌NCT‐2在次生盐渍化土壤中的存活情况。本发明具有快速简便且可实时监测的特点,有利于科学有效地指导该菌株菌肥的施用。

    基于锰过氧化物酶的工程菌及其实现方法

    公开(公告)号:CN104232555A

    公开(公告)日:2014-12-24

    申请号:CN201410462406.1

    申请日:2014-09-12

    Abstract: 一种基因工程领域的基于锰过氧化物酶的工程菌及其实现方法,以灰略红链霉菌基因组DNA为模板,与含有酶切位点和聚组氨酸标签的引物进行PCR扩增得到编码锰过氧化物酶的核苷酸序列;然后将扩增得到的基因序列连接到表达载体,再将获得的连接产物转入大肠杆菌表达菌株内,获得锰过氧化物酶过表达重组菌株。本发明针对现有技术存在的由于锰过氧化物酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足,应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成,此外本发明通过在表达重组蛋白C端添加聚组氨酸标签的方法,提高蛋白活性的同时也保证了纯化后锰过氧化物酶的纯度;此外,本发明通过载体信号肽实现了目的蛋白的周质空间表达,提高了锰过氧化物酶的活性。

    硝酸盐同化细菌及其在修复设施次生盐渍化土壤中的应用

    公开(公告)号:CN103525739A

    公开(公告)日:2014-01-22

    申请号:CN201310512371.3

    申请日:2013-10-25

    Abstract: 一种土壤修复技术领域的硝酸盐同化细菌及其在修复设施次生盐渍化土壤中的应用,通过硝酸盐同化细菌NCT-2以土壤中硝态氮作为氮源,并将其同化为其它形态的无机氮或细胞组分,从而实现对硝态氮的降解转化、降低土壤中硝态氮含量并对土壤进行修复。该硝酸盐同化细菌NCT-2为巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium),该硝酸盐同化细菌NCT-2保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC),保藏编号为CGMCC No.4698。本发明对环境中硝态氮有很强的同化转化能力,对环境适应性强;此外,还具有溶磷能力。因此该菌在修复设施栽培次生盐渍化土壤和制备微生物肥料上有广阔的应用前景。

    一株秸秆降解放线菌及其应用

    公开(公告)号:CN102703344B

    公开(公告)日:2013-09-25

    申请号:CN201210144682.4

    申请日:2012-05-10

    Abstract: 本发明涉及秸秆降解技术领域,特别涉及一株秸秆降解放线菌及其应用。本发明的秸秆降解放线菌,属于灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens),保藏编号为CGMCC No.5706。与现有技术相比,本发明有以下优点:1、本发明的灰略红链霉菌具有较强的纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶和木质素酶产生能力,不会对自然界的碳循环产生负面影响,不会对环境造成危害;2、本发明的灰略红链霉菌具有较强的秸秆降解能力,在秸秆降解培养基中30天可使秸秆失重率达76%,且培养成本低,操作方便,易于产业化实施;3、本发明的灰略红链霉菌对土壤中的植物病害微生物有一定拮抗作用。

    次生盐渍化土壤微生物菌剂及其制备、用途

    公开(公告)号:CN103203356A

    公开(公告)日:2013-07-17

    申请号:CN201310084477.8

    申请日:2013-03-15

    Abstract: 本发明公开了一种次生盐渍化土壤微生物菌剂及其制备、用途。所述次生盐渍化土壤微生物菌剂由巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)NCT-2CGMCC NO.4698和载体组成,所述载体为稻麦秸秆和葡萄糖。制备时,每升巨大芽孢杆菌菌液中加入0.5~0.6kg稻麦秸秆,0.3~0.4kg的葡萄糖,混合均匀,即得所述次生盐渍化土壤微生物菌剂;每毫升所述巨大芽孢杆菌液的含菌量为2.0×108~2.32×108个。本发明提供的次生盐渍化土壤微生物菌剂可以有效降低次生盐渍化土壤中的硝态氮含量,并大大增加微生物种群的数量和植物产量;采用本发明的微生物菌剂对次生盐渍化土壤进行修复的方法属于原位修复,操作简单,成本低廉,易于产业化实施;且修复效果佳,不破坏土壤肥力,能提高资源利用率。

    本体半自动信息抽取处理装置

    公开(公告)号:CN102243649A

    公开(公告)日:2011-11-16

    申请号:CN201110150471.7

    申请日:2011-06-07

    Abstract: 一种信息处理技术领域的本体半自动信息抽取处理装置。包括:输入设备、存储器、规则库、中央处理器及输出设备,其中,输入设备、规则库的输出端与中央处理器连接,中央处理器与存储器通过数据总线连接,中央处理器的输出端与输出设备连接,用户通过输入设备输入领域叙词表及通用本体,并在规则库中保存领域专家自定义规则;中央处理器对用户的输入进行核心本体准则确立、概念间关系抽取、概念间关系修正、构建结果评价、构建结果形式化的核心功能,对输入叙词表进行领域本体半自动构建的结果作为显式规格的本体通过输出设备进行输出及表达。本发明增加叙词表中现有概念和关系的精确性,减少人工参与程度,提高领域本体构建的效率和准确性。

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