-
公开(公告)号：CN101067133A
公开(公告)日：2007-11-07
申请号：CN200710039383.3
申请日：2007-04-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种基于硫代修饰的连接酶非依赖性基因克隆方法，其中扩增目标基因与质粒载体的引物的5’端第11－21位间的某一磷酸二酯键为硫代修饰；目标基因的正向引物和载体的反向引物，目标基因的反向引物和载体的正向引物，每对引物5’端至硫代修饰上游第2位的连续碱基序列互补配对。PCR扩增目标基因与质粒载体后，纯化PCR产物。5’外切核酸酶从5’端降解DNA链，硫代修饰与5’外切核酸酶消化DNA双链的共同作用会生成长10－20个核苷酸的3’单链突出端。由于目标基因与质粒载体的3’突出端碱基序列互补，形成稳定的完全配对双链，不需要进行DNA连接反应，直接转化大肠杆菌。本发明目标基因克隆不依赖于限制性核酸内切酶与DNA连接酶，操作通量大，可用于大规模基因克隆。
-
公开(公告)号：CN103750318B
公开(公告)日：2015-07-08
申请号：CN201410020286.X
申请日：2014-01-16
Applicant: 上海交通大学 , 南京乐呵呵庄园农业科技有限公司
Abstract: 一种明日叶混合软胶囊，该软胶囊的内容物由下述重量百分比的原料制成：明日叶粉13～25％；破壁灵芝孢子粉10～20％；无籽刺梨粉10～20％；小麦胚芽油47～54％；蜂蜡0～2％。上述明日叶混合软胶囊的制备方法包括以下步骤：1、将配比量的明日叶粉、破壁灵芝孢子粉和无籽刺犁粉混合过120目筛后，采用常规灭菌；将灭菌后的混合料与配比量的小麦胚芽油混合，或与配比量的小麦胚芽油及蜂蜡混合，制成混合液；2、将均质后的混合液按常规滚模压制法制备明日叶混合软胶囊。本发明利用明日叶的有效成分与破壁灵芝孢子粉、无籽刺犁粉进行协同作用，具有降血压血脂、提高免疫力、抗癌、抗衰老、保护心血管等功效。
-
公开(公告)号：CN102212615A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110082542.4
申请日：2011-04-01
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种生物检测技术领域的基于耐高温RNase HII的单核苷酸多态性检测方法，其涉及的分子信标序列为：5’-(FAM)CCGACG X7-13yX7-13CGTCGG(Dabcyl)-3’，其中：y表示任意a，u，c，g四种核糖核苷酸的一种，X表示任意A，T，C，G四种脱氧核糖核苷酸的一种，X下标数字表示连续7-13个脱氧核糖核苷酸。对应的扩增目标序列的引物为：HLA-A-F：5’-GCTCCCACTCCATGAGGTATT-3’/HLA-A-R：5’-GGGACAAGGGTCTCGGAGT-3’。本检测方法操作简便，准确度高，不需要大型昂贵仪器，可用于测定各种生物的SNP。
-
公开(公告)号：CN101067133B
公开(公告)日：2011-05-04
申请号：CN200710039383.3
申请日：2007-04-12
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种基于硫代修饰的连接酶非依赖性基因克隆方法，其中扩增目标基因与质粒载体的引物的5’端第11-21位间的某一磷酸二酯键为硫代修饰；目标基因的正向引物和载体的反向引物，目标基因的反向引物和载体的正向引物，每对引物5’端至硫代修饰上游第2位的连续碱基序列互补配对。PCR扩增目标基因与质粒载体后，纯化PCR产物。5’外切核酸酶从5’端降解DNA链，硫代修饰与5’外切核酸酶消化DNA双链的共同作用会生成长10-20个核苷酸的3’单链突出端。由于目标基因与质粒载体的3’突出端碱基序列互补，形成稳定的完全配对双链，不需要进行DNA连接反应，直接转化大肠杆菌。本发明目标基因克隆不依赖于限制性核酸内切酶与DNA连接酶，操作通量大，可用于大规模基因克隆。
-
公开(公告)号：CN101993898A
公开(公告)日：2011-03-30
申请号：CN201010255510.5
申请日：2010-08-17
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 一种基因工程技术领域的利用含有条件性重组酶的基因工程菌株发酵生产泛醌类代谢中间产物的方法。包括如下步骤：步骤一，构建和培养基因工程菌株；步骤二，加入L-阿拉伯糖于步骤一中的培养物中，诱导培养；步骤三，收集步骤三的培养物，处理后进行HPLC检测，获得泛醌类代谢中间产物。利用本发明的基因工程菌株发酵生产泛醌类代谢中间产物的方法，可实现对必需途径中的具有复杂结构的泛醌类代谢中间产物进行生物发酵生产，操作步骤简便，成本低廉，无有特殊的仪器要求，产量可达mg/L。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100487432C
公开(公告)日：2009-05-13
申请号：CN200610027997.5
申请日：2006-06-22
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种采用分子信标对核酸信号进行恒温放大与检测的方法，利用核糖核酸酶H分解RNA/DNA杂交体系中的RNA链的特性，根据含有1个或以上核糖核苷酸的核酸链水解情况确定被检测目标分子DNA的特性和含量。首先针对要检测的核酸分子序列设计嵌合分子信标，其环区域核苷酸序列与被测序列互补配对，且中间含有1个或几个核糖核苷酸。针对单链DNA，双链DNA，RNA等不同种类的被测样品，制备单链DNA以用作检测模板，将待检测样品放入核酸酶H反应混合液中混合，置于荧光检测仪于37℃温浴，实时检测反应溶液的荧光强度，根据荧光值可以指示被检测核酸分子的含量及其特性。
-
公开(公告)号：CN101168769A
公开(公告)日：2008-04-30
申请号：CN200710047954.8
申请日：2007-11-08
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种基于dU或dI寡核苷酸探针的单核苷酸多态性检测方法。dU或dI寡核苷酸探针序列特征是：全长30－40个核苷酸，5’端第15－25位的一个核苷酸与待检SNP位点配对，3’端第1－15位的一个核苷酸为dU或dI，dU或dI距离待检SNP位点5－15个核苷酸，整条寡核苷酸探针与待检SNP位点及其两侧核苷酸配对。反应组份包括dU或dI寡核苷酸探针，待测单链DNA，热稳定性mutS蛋白，报告DNA模板分子、报告DNA特异性的引物，dNTPs，pfuDNA聚合酶及其反应缓冲液。dU或dI寡核苷酸探针与待测单链DNA杂交后，若SNP位点处形成错配碱基，则PCR可扩增出报告DNA，若SNP位点处形成正确配对碱基，则不能扩增出报告DNA。根据报告DNA扩增结果，可推定待测SNP位点碱基种类。
-
公开(公告)号：CN101008030A
公开(公告)日：2007-08-01
申请号：CN200710036803.2
申请日：2007-01-25
Applicant: 上海交通大学
Abstract: 本发明涉及一种采用分子信标为底物检测尿嘧啶DNA糖苷酶活性的方法，利用UDG能切断分子信标中的尿嘧啶(U)碱基与糖基之间的N－糖苷键，再用碱处理缺碱基位点的底物就能使产物释放荧光信号的特性，根据检测到的荧光信号强度来确定UDG的活性。首先设计反应底物分子信标，根据最低自由能原理确定分子信标的一级结构顺序，再把一个脱氧尿嘧啶碱基插入到茎环结构的分子信标茎上。这样分子信标底物UDG在37℃保温一段时间后，再用适当浓度的碱处理反应混合液就可使分子信标茎环分离，释放荧光。荧光信号可在荧光检测仪上直接检测出来，无需分离产物。本发明不仅能够很灵敏的检测出纯的UDG，而且还能检测出粗抽提液中UDG的含量。
-
公开(公告)号：CN1187457C
公开(公告)日：2005-02-02
申请号：CN02136710.8
申请日：2002-08-29
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种利用条形码式基因芯片检测待检核酸的方法，采用将特定碱基序列的寡核苷酸片段以微阵列形式固定于基片表面，制备条形码式基因芯片。待检单核苷酸位点特异性的正向引物上游序列与条形码互补配对，中间是限制酶切位点，下游序列与目标序列配对，5’-末端是生物素或荧光基团标记，距离3’-末端上游1-4个核苷酸处引入一个不能与目标序列配对的核苷酸，经聚合酶链式反应、纯化、酶切，与条形码基因芯片杂交洗脱。本发明条形码碱基序列组成不依赖于待测目标核酸，检测片段长度在30个核苷酸以内，极大地降低了交叉杂交和错误杂交，通过改变引物中与待检单核苷酸位点处的目标序列配对的下游序列，使条形码基因芯片适合于各种样品的检测。
-
公开(公告)号：CN1398987A
公开(公告)日：2003-02-26
申请号：CN02136710.8
申请日：2002-08-29
Applicant: 上海交通大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明涉及一种条形码式基因芯片制备方法，采用将特定碱基序列的寡核苷酸片段以微阵列形式固定于基片表面，制备条形码式基因芯片。待检单核苷酸位点特异性的正向引物上游序列与条形码互补配对，中间是限制酶切位点，下游序列与目标序列配对，5’－末端是生物素或荧光基团标记，距离3’－末端上游1－4个核苷酸处引入一个不能与目标序列配对的核苷酸，经聚合酶链式反应、纯化、酶切，与条形码基因芯片杂交洗脱。本发明条形码碱基序列组成不依赖于待测目标核酸，检测片段长度在30个核苷酸以内，极大地降低了交叉杂交和错误杂交，通过改变引物中与待检单核苷酸位点处的目标序列配对的下游序列，使条形码基因芯片适合于各种样品的检测。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
43
records
(took 0.027 seconds)
