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公开(公告)号:CN106380516A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610892949.6
申请日:2016-10-13
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/14 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B的纳米抗体及其应用,属抗病毒研究技术领域。本发明通过构建NS5B特异的单域重链抗体文库,筛选抗NS5B特异性纳米抗体,构建稳定表达NS5B纳米抗体的MDBK细胞系并用BVDV感染,公开了特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B纳米抗体和其氨基酸序列,以及编码该纳米抗体的基因序列,还公开了NS5B纳米抗体在制备抗BVD病毒药物中的应用。
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公开(公告)号:CN103463626B
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201310066567.4
申请日:2013-03-03
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K38/44 , A61K38/41 , A61K31/409 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种抑制PRRS病毒感染细胞的血红素加氧酶1(heme oxygenase1,HO-1)及HO-1的诱导剂钴原卟啉(Cobalt Protoporphyrin,CoPP)和高铁血红素(hemin)作为阻断剂,抑制PRRSV感染细胞的方法。猪HO-1基因在高致病性PRRSV感染后显著上调表达,而在经典PRRSV感染后显著下调表达。PRRSV的易感细胞非洲绿猴肾细胞系的HO-1基因在高致病性PRRSV感染后也显著上调表达,而在经典PRRSV感染后也显著下调表达。利用CoPP和hemin诱导Marc-145和猪肺泡巨噬细胞(PAM)的HO-1表达。结果表明两者都显著诱导了HO-1的表达,抑制了PRRSV感染Marc-145和PAM细胞。
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公开(公告)号:CN110016078B
公开(公告)日:2020-11-17
申请号:CN201910233889.0
申请日:2019-03-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/70 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于PEDV N蛋白特异性纳米抗体的阻断ELISA的检测方法及其应用,本发明以PEDV N蛋白包被酶标板,纳米抗体BioNb2为阻断抗体,通过待检血清样品抑制纳米抗体BioNb2与PEDV N蛋白结合,以检测血清中猪流行性腹泻病毒特异性抗体;本发明的阻断ELISA方法能够排除抗原中的杂蛋白成分的干扰而具有良好的特异性,且操作简单,易于大范围推广,在猪流行性腹泻病毒的血清诊断方面具有良好的应用前景;本发明通过大量的实验优化阻断ELISA反应条件,使该方法用于猪流行性腹泻病毒抗体检测具有良好的重复性、特异性和灵敏性,与目前已有的商品化试剂盒相比,具有简便、快速、成本低廉等优势。
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公开(公告)号:CN106380516B
公开(公告)日:2019-10-25
申请号:CN201610892949.6
申请日:2016-10-13
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , A61K39/42 , A61P31/14 , A01K67/027
Abstract: 本发明涉及一种特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B的纳米抗体及其应用,属抗病毒研究技术领域。本发明通过构建NS5B特异的单域重链抗体文库,筛选抗NS5B特异性纳米抗体,构建稳定表达NS5B纳米抗体的MDBK细胞系并用BVDV感染,公开了特异性结合BVD病毒非结构蛋白NS5B纳米抗体和其氨基酸序列,以及编码该纳米抗体的基因序列,还公开了NS5B纳米抗体在制备抗BVD病毒药物中的应用。
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公开(公告)号:CN110016078A
公开(公告)日:2019-07-16
申请号:CN201910233889.0
申请日:2019-03-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C07K16/10 , C12N15/13 , C12N15/70 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种基于PEDV N蛋白特异性纳米抗体的阻断ELISA的检测方法及其应用,本发明以PEDV N蛋白包被酶标板,纳米抗体BioNb2为阻断抗体,通过待检血清样品抑制纳米抗体BioNb2与PEDV N蛋白结合,以检测血清中猪流行性腹泻病毒特异性抗体;本发明的阻断ELISA方法能够排除抗原中的杂蛋白成分的干扰而具有良好的特异性,且操作简单,易于大范围推广,在猪流行性腹泻病毒的血清诊断方面具有良好的应用前景;本发明通过大量的实验优化阻断ELISA反应条件,使该方法用于猪流行性腹泻病毒抗体检测具有良好的重复性、特异性和灵敏性,与目前已有的商品化试剂盒相比,具有简便、快速、成本低廉等优势。
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公开(公告)号:CN109678953A
公开(公告)日:2019-04-26
申请号:CN201811583463.X
申请日:2018-12-24
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: C07K16/10 , C07K2317/569 , C40B40/02 , C40B50/06
Abstract: 本发明公开了一种抗猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白N的VHH噬菌体展示文库的构建方法及用途,构架方法包括以下步骤:免疫后的双峰驼分离外周血淋巴细胞、淋巴细胞总RNA的提取及反转录获得cDNA,设计两对PCR扩增引物,获得目的片段,将获得的目的片段与噬菌粒载体pCANTAB-5E连接,将连接产物转化入TG1感受态细胞中并收获噬菌体抗体文库;成功构建抗猪流性腹泻病毒N蛋白的VHH噬菌体展示文库;计算文库库容量及文库的多样性;对所构建的文库进行质量评价。本发明建立的文库库容量大,多样性丰富等特点,对于建立猪流行性腹泻病毒的临床诊断方法,研究病毒的感染机理奠定了基础。
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公开(公告)号:CN103463626A
公开(公告)日:2013-12-25
申请号:CN201310066567.4
申请日:2013-03-03
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K38/44 , A61K38/41 , A61K31/409 , A61P31/14
Abstract: 本发明提供一种抑制PRRS病毒感染细胞的血红素加氧酶1(heme oxygenase1,HO-1)及HO-1的诱导剂钴原卟啉(Cobalt Protoporphyrin,CoPP)和高铁血红素(hemin)作为阻断剂,抑制PRRSV感染细胞的方法。猪HO-1基因在高致病性PRRSV感染后显著上调表达,而在经典PRRSV感染后显著下调表达。PRRSV的易感细胞非洲绿猴肾细胞系的HO-1基因在高致病性PRRSV感染后也显著上调表达,而在经典PRRSV感染后也显著下调表达。利用CoPP和hemin诱导Marc-145和猪肺泡巨噬细胞(PAM)的HO-1表达。结果表明两者都显著诱导了HO-1的表达,抑制了PRRSV感染Marc-145和PAM细胞。
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公开(公告)号:CN109628450B
公开(公告)日:2022-02-11
申请号:CN201811583462.5
申请日:2018-12-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/113 , A61K31/713 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种RXRβ基因及其siRNA在影响PRRSV复制中的应用,本发明利用siRNA特异性敲低RXRβ,然后通过qRT‑PCR、TCID50以及western blot方法检测了RXRβ对PRRSV感染宿主细胞的影响,并发现此宿主因子RXRβ被特异性敲低后具有显著抑制PRRSV复制和增殖的作用,该宿主因子RXRβ的特异性siRNA可以开发为预防和治疗PRRSV的药物,其对应基因RXRβ可用于研究抗PRRSV转基因猪。
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公开(公告)号:CN111544583A
公开(公告)日:2020-08-18
申请号:CN202010413064.X
申请日:2020-05-15
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了CS/HPMCP纳米微粒在口服疫苗递送中的应用,属于动物病毒学和动物基因工程技术领域。为了检测CS/HPMCP纳米微粒口服递送的免疫效力,本发明选取猪流行性腹泻病毒作为试验对象;本发明通过大肠杆菌表达系统表达COE蛋白,进一步通过离子交联方法制备了载有COE的CS/HPMCP纳米颗粒,并且评估了给小鼠口服载有COE的CS/HPMCP纳米微粒后,小鼠的体液免疫、细胞免疫和粘膜免疫;旨在为研发口服型纳米微粒佐剂提供有力的技术支持,同时为PEDV口服型亚单位疫苗的研究奠定前期基础。
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公开(公告)号:CN106474111B
公开(公告)日:2019-08-06
申请号:CN201610866121.3
申请日:2016-09-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K31/4025 , A61K9/19 , A61P31/14 , G01N33/50
Abstract: 本发明公开了一种胆绿素制剂及其在防治PRRSV中的应用和检测方法。本发明利用外源性胆绿素在Marc‑145和PAM细胞水平上通过qRT‑PCR、western blot、细胞上清TCID50检测及间接免疫荧光检测等方法研究其对PRRSV的抗病毒作用。结果表明,胆绿素均显著的抑制了PRRSV在其易感细胞和宿主靶细胞中的增殖。本发明所阐述的胆绿素制剂具有很好的抗病毒效果,有望成为一种新型的防治猪繁殖与呼吸综合征的的药物。
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