一种Tyrobp基因敲除巨噬细胞株构建方法及其在布鲁氏菌感染中的应用

    公开(公告)号:CN120025984A

    公开(公告)日:2025-05-23

    申请号:CN202510183837.2

    申请日:2025-02-19

    Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体涉及一种Tyrobp基因敲除巨噬细胞株的构建方法及其在布鲁氏菌LPS诱导炎症反应中的应用。本发明采用CRISPR/Cas9基因编辑技术结合慢病毒表达系统,成功构建了Tyrobp基因敲除的RAW264.7巨噬细胞株(KO Tyrobp‑RAW264.7),并通过基因组测序和Western blot方法验证了基因敲除效果。试验表明,该基因敲除细胞株在维持正常增殖能力的同时,表现出显著的吞噬功能减弱。经布鲁氏菌LPS处理后,KO Tyrobp‑RAW264.7细胞株显示炎性因子及NFκB表达水平显著升高,表明Tyrobp基因在布鲁氏菌LPS诱导的炎症反应中具有重要调控作用。本发明为深入研究布鲁氏菌抗菌免疫机制提供了新的实验模型和技术平台,在生物医学领域具有重要的应用价值。

    含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法

    公开(公告)号:CN113174065B

    公开(公告)日:2023-07-25

    申请号:CN202110641566.2

    申请日:2021-06-09

    Abstract: 本发明涉及一种含有人脐带间充质干细胞冻干粉的抑菌水凝胶的制备方法。该制备方法为:首先培养孵育人脐带间充质干细胞,收集其上清液冷冻干燥得干细胞冻干粉;再从冻干石莼粉中提取石莼聚糖,氧化得到双醛化石莼聚糖,随后通过壳聚糖与双醛化石莼聚糖发生席夫碱反应,并引入多巴胺,然后制备银纳米颗粒,构建得到双醛化石莼聚糖/壳聚糖/多巴胺/银纳米颗粒复合水凝胶;最后将人脐带间充质干细胞冻干粉溶于磷酸盐缓冲液中得到干细胞冻干粉溶液,并对双醛化石莼聚糖/壳聚糖/多巴胺/银纳米颗粒复合水凝胶进行一定时间的浸泡处理即可。本发明复合水凝胶体系可抑制细菌,防止伤口感染,可促进伤口加速愈合;且具有良好的吸水溶胀性能以及保湿性。

    一种精原干细胞体外无饲养层长期培养方法

    公开(公告)号:CN108795850B

    公开(公告)日:2021-08-31

    申请号:CN201810671361.7

    申请日:2018-06-26

    Abstract: 本发明为一种精原干细胞体外无饲养层长期培养方法,其通过筛选不同的细胞外基质以及将化学小分子物质应用于猪的精原干细胞长期培养,在体外可将猪的精原干细胞培养至三个月。本发明以2D赛天然人工合成多肽基质涂层作为一种胞外基质,在培养过程中观察到典型的葡萄串珠状精原干细胞簇,对不同的化学小分子组合进行筛选,通过添加Chir99021,Repsox以及CD脂质浓缩物,将猪的精原干细胞体外培养至三个月并维持较好精原干细胞特性。

    一种促进奶山羊精原干细胞的自我更新和增殖的载体及其应用

    公开(公告)号:CN104404083B

    公开(公告)日:2018-02-16

    申请号:CN201410706339.3

    申请日:2014-11-27

    Abstract: 本发明公开了一种促进奶山羊精原干细胞的自我更新和增殖的载体及其应用。所述的载体是包含奶山羊gSirt1基因的真核表达载体,所述的奶山羊gSirt1基因的核苷酸序列如SEQ.ID.NO.1所示。本发明所构建的真核表达载体实现了在奶山羊精原干细胞中的过表达或超表达,经过RT‑PCR、Western blot及细胞周期检测证实,gSirt1基因有助于精原干细胞的自我更新、干性(多能性)维持和细胞增殖。

    一种永生化的犬脂肪间充质干细胞系及其构建方法

    公开(公告)号:CN105779395A

    公开(公告)日:2016-07-20

    申请号:CN201610165333.9

    申请日:2016-03-22

    CPC classification number: C12N5/0667 C12N15/867

    Abstract: 本发明公开了一种永生化的犬脂肪间充质干细胞系及其构建方法,所述的永生化的犬脂肪间充质干细胞系,是以犬脂肪间充质干细胞作为宿主细胞,转染携带SV40大T抗原(Ttag)的慢病毒载体,将Tag基因整合入犬脂肪间充质干细胞基因组中,经过连续传代筛选得到表达SV40大T抗原基因且具有多向分化潜能的细胞系。该细胞系在体外传代50代以上仍有较好的活力,保持较强的分裂增殖,不发生衰老和凋亡,同时能节省培养基成本,是一种永生化的细胞系。

    一种雌性生殖干细胞的体外分离及培养方法

    公开(公告)号:CN102250830B

    公开(公告)日:2013-01-16

    申请号:CN201110185764.9

    申请日:2011-07-05

    Abstract: 本发明公开了一种雌性生殖干细胞的体外分离及培养方法,从雌性哺乳动物的卵巢的生殖上皮得到细胞,雌性生殖干细胞的分离纯化方法采用0.2%明胶和Matrigel差速贴壁结合克隆法,将未贴壁的雌性生殖干细胞与贴壁培养的其他细胞区分、分离。分离到的雌性性生殖干细胞培养在MEF饲养层上。分离到的雌性生殖干细胞具有ES细胞特性和向肌肉细胞、脂肪细胞和卵母细胞样细胞以及三个胚层在内的多种细胞的分化潜能。

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