L-阿拉伯糖异构酶、突变体及其应用

    公开(公告)号:CN111057698A

    公开(公告)日:2020-04-24

    申请号:CN201911384083.8

    申请日:2019-12-28

    Abstract: 本发明涉及一种新型L-阿拉伯糖异构酶(LAI)及其突变体,及其在连续催化D-半乳糖异构化制备D塔格糖(D-tagatose)的应用。所述异构酶突变体,由SEQ ID NO.1所示所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第107位、(2)第199位、(3)第59位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的LAI及其突变体,85℃,700g/L D-半乳糖反应体系下,产物得率最高达89.2%。将重组酶进行固定化并连续催化200批次,转化率均仍大于89%。本发明解决了现有酶催化制备D-tagatose效率低下的难题,获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D-tagatose工业化水平具有重要意义。

    L-阿拉伯糖差向异构酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN110904087A

    公开(公告)日:2020-03-24

    申请号:CN201911383972.2

    申请日:2019-12-28

    Abstract: 本发明涉及一种L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,及其在微生物催化D-半乳糖异构化制备D-塔格糖中的应用。所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,由所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第97位、(2)第189位、(3)第301位、(4)第409位和(5)第462位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的差向异构酶及其突变体,以及其在制备塔格糖(D-tagatose)中的应用。该突变体具有高最适反应温度80℃,解决了现有酶无法在高温生产D-tagatose的技术难题。使用本突变体生产D-tagatose,底物浓度为600g/L时,产物得率最高可达79.7%,优于原始酶和其他突变酶的转化效果,具有较好工业应用前景。

    一种D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN110862980A

    公开(公告)日:2020-03-06

    申请号:CN201911204720.9

    申请日:2019-11-29

    Abstract: 本发明涉及一种D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体,及其在微生物催化D-果糖异构化制备D-阿洛酮糖中的应用。所述D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体,由所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第242位、(2)第105位、(3)第210位、(4)第147位、(5)第184位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的D-阿洛酮糖3-差向异构酶及其突变体,该突变体具有高最适反应温度85℃,解决了现有酶无法在高温生产D-psicose的技术难题。使用本突变体生产D-psicose,产物得率最高可达40.1%,优于原始酶和其他突变酶的转化效果,具有较好工业应用前景。

    耐高温D-阿洛酮糖3-差向异构酶、突变体及其应用

    公开(公告)号:CN110904088A

    公开(公告)日:2020-03-24

    申请号:CN201911384895.2

    申请日:2019-12-28

    Abstract: 本发明涉及一种新型耐高温D-阿洛酮糖3-差向异构酶及突变体,及其在微生物催化D-果糖异构化制备D-阿洛酮糖(D-psicose)中的应用。所属异构酶氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示;所述异构酶突变体由SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而得,所述点突变位点为下列中的一个或多个:(1)第106位、(2)第183位、(3)第211位、(4)第276位。本发明有益效果主要体现在:本发明提供了一种全新的耐高温D-阿洛酮糖3-差向异构酶突变体,该突变体具有超高酶活和底物转化率,最适反应温度可达90℃。当底物浓度为700g/L,反应温度为85℃时,产物得率最高达67.14%。将重组酶进行固定化并连续催化300批次,转化率均大于67%。本发明解决了现有酶催化制备D-psicose效率低下的难题,获得的优于文献报道的连续转化效果对提升D-psicose工业化水平具有重要意义。

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