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公开(公告)号:CN110938651A
公开(公告)日:2020-03-31
申请号:CN201911076716.9
申请日:2019-11-06
Applicant: 浙江大学医学院附属第一医院
Abstract: 本发明属于生物技术领域,公开了一种靶向打靶载体及靶向整合外源基因至小鼠F4/80外显子22位点构建BAC克隆的方法和应用,所述靶向打靶载体序列如SEQ ID NO.14所示,命名为载体F4/80 5HA-IRES-DTR-PGK-EM7-Neo-F4/80 3HA。本发明提供了一个新的能实现靶向整合的位点序列,利用该位点可构建靶向插入外源基因的打靶载体,并验证了利用该打靶载体能高效整合外源基因至小鼠F4/80 BAC克隆F4/80外显子22位点,后续得到的靶向插入外源基因的F4/80 BAC,可以用于构建靶向插入外源基因的小鼠胚胎干细胞,从而为构建转基因细胞系以及小鼠建立了基础。