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公开(公告)号：CN106167787A
公开(公告)日：2016-11-30
申请号：CN201610713001.X
申请日：2016-08-23
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明提供一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法，其包括如下步骤：1)选择生长状况良好的光皮桦一年生植株，取当年生的茎段，用流水冲洗5‑20min，剥去树皮；2)将步骤1)获得的光皮桦茎段木质部用酶解液在黑暗中进行酶解；3)将酶解后茎段转移到MMG溶液中，将原生质体分散到MMG溶液中，用孔径为70μm的细胞筛进行过滤，收集滤液，滤液离心，用MMG溶液把收集到的原生质体重新悬浮，得到纯化的原生质体；4)在质粒浓度为1500ng/μl，PEG处理时间为10min时，木质部原生质体瞬时转化效率最高。本发明方法得到的原生质体平均密度为4.5×106个·mL‑1，平均产量为1.2×106个·g‑1·FW‑1，活性最高可达到96％，最高瞬时转化效率平均可达55％左右。
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公开(公告)号：CN105917936A
公开(公告)日：2016-09-07
申请号：CN201610326508.X
申请日：2016-05-16
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明公开了一种杉木夏季轻基质扦插容器苗培育方法，包括以杉木幼树根颈萌条为材料，进行插穗制备、生长调节剂处理、扦插基质配置及扦插后培育管理等操作步骤。本发明突破了杉木夏季轻基质扦插繁育技术，集成了轻基质容器苗培育技术，一次性形成了扦插容器苗，具有扦插成活率高、扦插穗条利用率高、容器苗生长势优良等优点，解决了一次性经扦插培育成轻基质容器苗的难题，获得无性系轻基质容器苗，其性状遗传稳定、生长整齐一致，在杉木优良品系规模化繁育与周年造林推广应用中具有十分重要的应用价值和显著的竞争优势。
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公开(公告)号：CN103493735A
公开(公告)日：2014-01-08
申请号：CN201310455667.6
申请日：2013-09-30
Applicant: 浙江农林大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种喜树愈伤组织培养和增殖的光调控方法，筛选出建立喜树无性系的最优培养基配方。结果表明：茎段的诱导培养基以MS+0.1mg／L KT+4mg/L2，4-D为佳；增殖培养以B5+0.5mg／L KT+1.0mg／LNAA+0.5mg／L2，4-D最优；叶片表现出较差的诱导率。将愈伤在红光、绿光、蓝光、红蓝光、白光条件下增殖，通过分析单位愈伤的增长量，得到红光、绿光对喜树愈伤的生长有促进作用，蓝光对愈伤的生长有抑制作用，白光、红蓝光的作用不明显，其中以绿光的促进作用最显著。
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公开(公告)号：CN114214325A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111419269.X
申请日：2021-11-26
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明提供一种光皮桦的miR156a前体基因在调控植物分枝数量中的应用。本发明提供的光皮桦miR156a前体基因，该前体基因序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还提供了光皮桦miR156a前体基因在促进植物分枝形成中的应用。通过光皮桦miR156a前体基因的过量表达，有望人为地促进植物分枝的形成，增加侧枝的数量，在调控植物株形及产量等方面有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN106167787B
公开(公告)日：2020-01-14
申请号：CN201610713001.X
申请日：2016-08-23
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明提供一种光皮桦木质部原生质体制备及瞬时转化的方法，其包括如下步骤：1)选择生长状况良好的光皮桦一年生植株，取当年生的茎段，用流水冲洗5‑20min，剥去树皮；2)将步骤1)获得的光皮桦茎段木质部用酶解液在黑暗中进行酶解；3)将酶解后茎段转移到MMG溶液中，将原生质体分散到MMG溶液中，用孔径为70μm的细胞筛进行过滤，收集滤液，滤液离心，用MMG溶液把收集到的原生质体重新悬浮，得到纯化的原生质体；4)在质粒浓度为1500ng/μl，PEG处理时间为10min时，木质部原生质体瞬时转化效率最高。本发明方法得到的原生质体平均密度为4.5×106个·mL‑1，平均产量为1.2×106个·g‑1·FW‑1，活性最高可达到96％，最高瞬时转化效率平均可达55％左右。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106318896B
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201610708676.5
申请日：2016-08-23
Applicant: 浙江农林大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明公开了一种杉木原生质体制备及纯化方法。选取杉木组培苗最上部未分轮的叶片或幼嫩茎段；将叶片或茎段切断，放入酶解液中，抽真空，置于水平摇床上黑暗酶解2‑4h；用孔径70μm的细胞筛将酶解液过滤至离心管中，用原生质体清洗液清洗酶解后的叶片或茎段，用70μm的细胞筛进行过滤，滤液合并至同一离心管中，离心去上清；向沉淀中加入预冷的所述原生质体清洗液清洗原生质体，离心去上清后重复洗一次，收集的沉淀用原生质体重悬液重悬，得到纯化的杉木原生质体。本发明得到杉木叶片原生质体的产量为1.8×106个/g，活力为94％；杉木茎段原生质体的产量为8.9×105个/g，活力为86.5％，获得的原生质体产量大、活力高。
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公开(公告)号：CN106857251A
公开(公告)日：2017-06-20
申请号：CN201710053542.9
申请日：2017-01-22
Applicant: 浙江农林大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种闽楠体细胞胚及不定芽诱导方法，包括以闽楠未成熟种子为材料，剥取未成熟种子幼胚为外植体，进行体细胞胚诱导、增殖培养产生次生胚，或者进行胚性愈伤的诱导、分化不定芽等技术环节。本发明首次建立了闽楠未成熟合子胚的体细胞胚及胚性愈伤的诱导、培养技术体系，明确取材最佳时间，筛选出优良体细胞胚、胚性愈伤诱导培养基、增殖培养基、体细胞胚萌发培养基、分化培养基，有效提高了体细胞胚诱导率、增殖率、体细胞胚萌发率、分化系数等，有助于缓解闽楠种苗供应严重不足的现状。此外，本发明胚性愈伤的成功诱导，为进行体细胞融合、种质资源保存、基因转化及优良杂交组合扩繁提供了技术保证。
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公开(公告)号：CN103430839A
公开(公告)日：2013-12-11
申请号：CN201310331391.0
申请日：2013-08-01
Applicant: 浙江农林大学
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了一种巨桉组培苗的培育方法，包括以巨桉组培苗叶片为外植体，对巨桉叶片进行愈伤组织诱导，对叶片愈伤组织进行不定芽分化培养以及进行生根培养的操作步骤，其特征在于在红光和蓝光照射条件下对巨桉叶片进行愈伤组织诱导；在红光或蓝光照射条件下对叶片愈伤组织进行不定芽分化培养；在绿光照射条件进行不定芽生长培养，再转移到LED黄光下进行生根培养。本发明根据巨桉叶片在不同组培阶段对光的需求差异及时调整光源，有效提高了愈伤组织诱导率、不定芽分化率及生根率。此外，本发明耗能低，且与传统组培法相比能大幅度提高巨桉组培苗的产量并有效缩短出苗时间。
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公开(公告)号：CN119060935A
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202411222879.4
申请日：2024-09-02
Applicant: 浙江农林大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明提供了一套培养基组及建立云锦杜鹃悬浮细胞系的方法，属于悬浮细胞系培养技术领域。本发明提供了一种建立云锦杜鹃的悬浮细胞系的培养基组，包括诱导培养基和液体培养基。本发明还基于所述培养基组，首次建立了云锦杜鹃悬浮细胞系，以云锦杜鹃叶片为外植体，经过愈伤组织诱导培养和悬浮培养，最终成功建立了云锦杜鹃悬浮细胞系。本发明所述培养基组或方法不仅能够提高云锦杜鹃工厂化育苗繁殖的效率，还可以为诱变育种、遗传转化和基因工程育种及基因编辑技术等开展奠定基础。
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公开(公告)号：CN118038266A
公开(公告)日：2024-05-14
申请号：CN202410148204.3
申请日：2024-02-01
Applicant: 浙江农林大学
Abstract: 本发明涉及植物表型测量技术领域，公开一种阔叶树种苗表型测量方法、系统、设备及介质，包括：获取阔叶树种苗的侧视图和顶视图，通过改进型Unet模型得到侧视图中阔叶树种苗的掩膜以及顶视图中叶片的掩膜，利用HSV颜色阈值分割法得到只含有叶片掩膜的图像和只含有枝干掩膜的图像，通过图像复原模型得到含有完整枝干掩膜的图像，对完整枝干掩膜进行骨架化和去毛刺处理，得到阔叶树种苗表型参数的像素测量值，并利用参照物标定法对像素测量值进行反演，得到阔叶树种苗表型参数的实际预测值。本发明可以精确、快速、无损、低成本地从测量阔叶树种苗表型参数，可为阔叶树种苗的培育和生长监测等研究提供有效的数据参考。
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